埃博拉病毒进入抑制剂筛选模型的建立与应用

王静，陈淑敏，马铃，张瑞欣，李卓荣，余利岩，岑山



埃博拉病毒进入抑制剂筛选模型的建立与应用

王静，陈淑敏，马铃，张瑞欣，李卓荣，余利岩，岑山

【摘要】

目的旨在以埃博拉病毒（EBOV）包膜糖蛋白（GP）为靶点，建立埃博拉病毒进入抑制剂高通量筛选模型，应用该模型筛选具有特异性抑制埃博拉病毒进入的活性样品。

方法利用细胞水平重组病毒技术，分别用两株不同爆发时间的 Zaire-EBOV 的 GP 与 HIV 核心质粒（pNL4-3.Luc）共表达，制备重组病毒 EBOV-GP-Old/HIV-luc 和EBOV-GP-New/HIV-luc。利用 ELISA 和荧光素酶检测技术，优化病毒产量、感染性、感染剂量及荧光活性测定时间等因素，建立药物筛选模型。利用统计学参数及阳性化合物评估该模型的稳定性和灵敏性。应用该模型，对 242 个样品进行初步筛选，并通过与水泡性口膜炎病毒包膜蛋白包装的重组病毒 VSVG/HIV-luc 进行比较，以判断样品的特异性。

结果该模型可用于靶向 GP 蛋白的埃博拉病毒进入抑制剂的高通量筛选，并获得 4 种具有特异性抗埃博拉进入活性的样品。

结论该模型可用于抗 EBOV 进入药物的高通量筛选，应用该模型获得的阳性样品有助于抗 EBOV 药物的发现。

【关键词】埃博拉病毒；高通量筛选分析；进入抑制剂

www.cmbp.net.cn中国医药生物技术, 2016, 11(3):193-199

作者单位：100050 北京，中国医学科学院医药生物技术研究所免疫生物学室

据世界卫生组织报道，2014 年 3 月由扎伊尔埃博拉病毒（Zaire-EBOV）引起的西非疫情是自1976 年首次发现埃博拉病毒以来发生的最大一轮埃博拉疫情。埃博拉病毒为单股负链 RNA 病毒，属于丝状病毒科（Filoviridae）。……