玻璃化冷冻法保存兔腰椎间盘的实验研究

胡成栋，刘曦，李盼，周玉军，陈怀志，郭全义



玻璃化冷冻法保存兔腰椎间盘的实验研究

胡成栋，刘曦，李盼，周玉军，陈怀志，郭全义

【摘要】

目的观察玻璃化冷冻法保存兔腰椎间盘的效果。

方法选取 30 只新西兰大耳白兔，随机分为玻璃化冷冻组、常规低温冷冻组和新鲜髓核细胞组，每组 10 只，将取下的腰椎间盘标本通过玻璃化冷冻法与常规低温冷冻法分别冻存 30 d，复温洗脱后，利用 MTT 比色法测量两组腰椎间盘纤维环及髓核细胞的相对活性，利用台盼蓝拒染法检测其细胞存活率。

结果MTT 比色法和台盼蓝拒染法所得结果基本一致，玻璃化冷冻组和常规低温冷冻组兔腰椎间盘髓核细胞存活率和相对活性均低于新鲜髓核细胞组，玻璃化冷冻组的兔腰椎间盘髓核细胞存活率和相对活性均优于常规低温冷冻组，其差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。

结论玻璃化冷冻法保存兔腰椎间盘髓核细胞存活率及细胞活性高，保存效果优于常规低温冷冻法。

【关键词】玻璃化作用；低温保存；椎间盘

作者单位：056001 河北省邯郸市中心医院骨二科（胡成栋、李盼、周玉军、陈怀志），免疫科（刘曦）；100039 北京，中国人民解放军总医院骨科研究所（郭全义）

www.cmbp.net.cn中国医药生物技术, 2016, 11(3):247-251

目前临床上经常用传统低温冷冻法保存腰椎间盘，但该法常导致细胞内外形成冰晶，由于冻融效应造成细胞损伤，腰椎间盘细胞存活率和活性下降，从而导致其应用受到限制［1］。玻璃化冷冻法采用高浓度溶液单步骤快速降温，溶液转变为玻璃样无定形体，组织在保存过程中细胞内外不形成结晶，避免了细胞结构的破坏，有效保留了细胞的活性［2-4］。……