氨基酸前体对棘白霉素B发酵合成的影响

王耀耀，　付美红，　朱研研，　郝惠云，　王亚莉，　张雪霞

微生物药物国家工程研究中心，河北省工业微生物代谢工程技术研究中心，华北制药集团新药研究开发有限责任公司，石家庄 050015

氨基酸前体对棘白霉素B发酵合成的影响

王耀耀，付美红，朱研研，郝惠云，王亚莉，张雪霞*

微生物药物国家工程研究中心，河北省工业微生物代谢工程技术研究中心，华北制药集团新药研究开发有限责任公司，石家庄 050015

摘要：以构巢曲霉(Aspergillus nidulans)发酵生产酯肽类化合物棘白霉素B，研究棘白霉素B己肽环结构的前体性氨基酸对产物的代谢影响，显示出脯氨酸、鸟氨酸、苏氨酸在发酵48 h补入，对发酵代谢有促进作用。利用响应面统计学方法进行前体及有机氮源配方优化，得出优化配方：脯氨酸4.55 mg/mL,鸟氨酸1.85 mg/mL，苏氨酸0.97 mg/mL，棉籽粉2.62%，摇瓶发酵水平达到3 270 μg/mL，较原水平提高30.2%。新工艺在50 L罐上放大，发酵水平进一步提高至3 520 μg/mL，显示出良好的工业应用前景。

关键词：棘白霉素B； 酯肽； 响应面统计学方法； 氨基酸前体

阿尼芬净是继卡波芬净、米卡芬净之后开发出的又一个重要的芬净类抗生素药物。其合成途径包括利用曲霉发酵获取先导性化合物——棘白霉素B(ECB)，再经脱酰基化去除脂肪酸侧链，最后进行侧链化学结构改造而成药[1]。芬净类对近年来日益严重的侵袭性念珠菌感染有显著疗效[2,3]。药物作用机理为通过非特异性抑制真菌细胞壁的β-(1, 3)-D-葡聚糖合成酶，导致葡聚糖合成受阻，破坏真菌细胞壁完整性，最终导致真菌细胞溶解死亡[4]。……