术前处理和珠核规格对企鹅珍珠贝游离珍珠培育效果的影响

梁飞龙，王钦贵，邓岳文，谢绍河，

（1广东海洋大学珍珠研究所，广东　湛江　524025；2广东绍河珍珠有限公司，广东　汕头　515822）

术前处理和珠核规格对企鹅珍珠贝游离珍珠培育效果的影响

梁飞龙1，王钦贵2，邓岳文1，谢绍河1，2

（1广东海洋大学珍珠研究所，广东湛江524025；2广东绍河珍珠有限公司，广东汕头515822）

本研究比较了不同术前处理方式和不同规格珠核对企鹅珍珠贝（Pteria penguin）游离珍珠培育效果的影响。术前处理方式分别为抑制母贝性腺发育和促进性腺发育排精产卵，珠核规格分别为5.0 mm、6.0 mm、7.0 mm和8.0 mm，手术贝休养期为1个月，育珠期为18个月。结果显示：术前处理和珠核规格对育珠贝成活率、留核率和成珠率存在显著影响（P＜0.05），促进性腺发育排精产卵处理的育珠贝休养期、育珠期成活率、留核率和成珠率最高（62.0%、54.0%、21.0%和48.0%），未经术前处理的对照组最低（50.0%、38.0%、11.0%和32.0%），珠核直径5.0 mm组休养期、育珠期手术贝成活率、留核率和成珠率最高（64.0%、54.0%、22.0%和45.0%），8.0mm最低（42.0%、33.0%、8.0%和22.0%）。本研究结果表明，通过手术前处理可以显著提高企鹅珍珠贝育珠贝的成活率、留核率和成珠率，企鹅珍珠贝游离珍珠培育的合适的珠核规格为5.0～6.0 mm。

企鹅珍珠贝；游离有核珍珠；术前处理；珠核规格

企鹅珍珠贝［Pteria penguin（Röding）］，属软体动物门（Mollusca），双壳纲（Bivalvia），珍珠贝科（Pteriidae），珍珠贝属（Pteria）。分布于热带、亚热带海区，如日本、泰国、印度尼西亚、菲律宾、澳大利亚、马来西亚等国，以及我国广东、广西和海南沿海深水海域。贝体成斜方形，前耳短，后耳长，壳外表面黑色，壳内表面珍珠层银白色，靠近腹缘部分为古铜色，具有彩虹光泽，足丝十分粗壮，附着力强，闭壳肌发达，具有生长速度快，对环境适应力强，分泌珍珠质机能旺盛等特点。成体壳高约18 cm，壳长约21 cm，厚4 cm，最大壳高可达25 cm，企鹅珍珠贝左右两壳隆起显著，是培育半圆附壳珍珠的理想母贝，在国外主要用于培育附壳珍珠［1-4］。企鹅珍珠贝形态结构特殊，培育游离珍珠十分困难，国外还没有利用企鹅珍珠贝（Pteria penguin）成功培育出游离珍珠的有关报道。在国内，利用企鹅珍珠贝培育正圆游离珍珠已经取得初步成功，但还存在育珠贝吐核率高，病死率高，成珠率低的问题［5-10］。为了突破企鹅珍珠贝游离珍珠培育的技术瓶颈，笔者进行了术前处理和珠核规格对企鹅珍珠贝游离珍珠培育的影响试验。

1　材料和方法

1.1材料

植核母贝来自广东绍河珍珠有限公司徐闻承梧养殖基地。手术贝：贝龄2.0～3.0龄，壳高11.6～14.7 cm，壳表面光洁，角质层无分层脱落现象，鳞片锐利，足丝粗壮。小片贝：贝龄1.5～2.0龄，壳高10.8～12.5 cm，壳内珍珠层为银白色或彩虹色。珠核：由淡水丽蚌贝壳研磨而成，正圆形，直径5.0～8.0 mm；休养笼为锥形笼，底径30 cm，高25 cm，网目3.0 cm×2.0 cm；育珠笼为片状网笼，规格120 cm×50 cm，网目3.0 cm×2.0 cm。

1.2方法

1.2.1细胞小片制作用解剖刀将小片贝的闭壳肌从中间切断，将贝体打开，用消毒海水冲洗干净黏液及其他附着物，再用切片刀将唇瓣下方至肛门之间的外套膜切下，切除外套膜缘触手，以色线为中心按外侧占30%、内侧占70%的比例切成宽度为2.0～2.5 mm的条状，然后切成正方形的细胞小片，使用前滴上3%的红汞水进行消毒和染色。

1.2.2植核手术将经过术前处理的待植核贝清洗干净，经排贝、栓口后挑选合格者作为手术贝，固定于植核台上，用剪刀剪去足丝，在足和内脏囊交界处切一口作为送核口，用通道针通道至预定核位，先送核后送片，植核位置为“左袋”位于肠道回曲处前方。

1.2.3休养与育珠植核手术结束后，按每笼2～3只施术贝的密度装入休养笼中（每只施术贝外套一个网目3.0 mm×3.0 mm的休养网袋，以回收死贝脱落和吐核脱落的珠核），吊养于湛江徐闻承梧绍河珍珠公司养殖海区，每3～5 d检查1次育珠贝的恢复与脱核情况。休养期为1个月，休养期结束后，按每笼装贝9～12只的密度换用片笼进行育珠贝养殖，育珠期为18个月。根据附着生物的多寡，约每月清洗1次养殖笼外的附着物，同时更换破损的育珠笼。

1.3实验设计

1.3.1术前处理对植核育珠效果的影响

1.3.1.1抑制性腺发育法在每年的1—2月，植核手术前30～40 d，挑选性腺发育尚未丰满，外观分辨不出雌雄性的母贝，按每笼12～15个的密度装进锥形笼中，外套一个30目的网布，吊养在浮排下水深400 cm水层处。每5～6 d检查1次，切除新生长的足丝，处理时间20～25 d，共切除足丝3～4次，待贝体不再生长出新的足丝和鳞片或只有1～2条足丝，软体部松软，外套膜呈白色透明状，即达到处理目的可以进行植核手术。试验使用母贝1 500只。

1.3.1.2促进性腺发育排精产卵法手术前30 d左右，选择性腺比较丰满的母贝（雄性乳黄色，雌性土黄色），按每笼2～3只的密度装进锥形笼，吊养于浮排下150～200 cm水层，经10～15 d的培育，切除足丝，洗刷干净，挑选性腺丰满的母贝阴干（温差刺激）1～2 h再吊回养殖浮排相同水层，刺激1～2次，性腺发育成熟的母贝会自动排精产卵，母贝排放后休整3～5 d进行植核手术。使用母贝1 500只。

1.3.2珠核规格对植核育珠影响选择贝龄2.0～3.0年，壳高11.6～14.7 cm的企鹅珍珠贝，分别植入直径5.0、6.0、7.0和8.0 mm的珠核。比较不同规格珠核的植核育珠效果，植核位置为“左袋”（位于肠道回曲处前方），植核方式为先送核后送片［11］，使用母贝1 500只。

1.4数据的收集和统计分析

休养期为30 d、育珠期18个月，休养期和育珠期分别统计育珠贝成活率、留核率和成珠率。

休养期成活率=休养期结束成活贝数量/植核贝数量×%；育珠期成活率=育珠结束成活贝数量/休养期结束成活贝数量×%；留核率=收获珍珠及珠核数量/成活贝数×%；成珠率=收获商品珍珠数量/成活贝中收获珍珠及珠核数量×%。

利用单因素方差（ANOVA）比较实验组间的成活率、留核率和成珠率，若差异显著再利用LSD方法比较各组间的差异；检验的显著性水平设为P＜0.05。

2　结果与分析

2.1术前处理对企鹅珍珠贝植核育珠效果的影响

从表1可见，术前处理对植核母贝的成活率、留核率和成珠率存在显著影响（P＜0.05）。促性腺发育排精产卵法处理的手术贝成活率、留核率和成珠率最高（62.0%、54.0%、21.0%、48.0%），未经术前处理的对照相最低（50.0%、38.0%、11.0%、32.0%）；不同术前处理方式之间在育珠贝成活率、留核率和成珠率方面差异不显著。

2.2珠核规格对植核育珠效果影响

珠核规格对育珠贝成活率和成珠率存在显著影响（P＜0.05），植入直径5.0 mm珠核的育珠贝具有最高的休养期和育珠期成活率、留核率和成珠率（64.0%、54.0%、22.0%和45.0%），并且显著大于8.0 mm组（42.0%、33.0%、8.0%和22.0%），但与植入直径6.0 mm珠核的相比差异不显著。珠核直径达7.0 mm和8.0 mm时吐核率接近90%，表明2～3龄的企鹅珍珠贝植核手术使用的适宜珠核直径为5.0～6.0 mm。

表1不同术前处理的企鹅珍珠贝植核育珠效果　%

表2手术贝植入不同珠核规格的育珠效果　%

3　讨论

珍珠培育过程中，需要将合适规格的珠核和细胞小片植入到手术贝内脏囊，并且使细胞小片的光滑面和珠核表面紧密相贴，随后手术贝经过一系列的生理生化变化形成珍珠囊分泌珍珠质沉积在珠核表面形成珍珠。手术贝的性腺发育水平和贝体活力，以及珠核规格对植核育珠效果产生重要影响。

3.1术前处理对植核育珠的影响

研究表明，性腺丰满的手术贝妨碍植核操作，并且成珠率低，污珠及有机质珍珠比例高，为了提高育珠贝的成活率、留核率和优质珠率，需要对手术贝进行合适的术前处理以调整手术贝达到适合植核手术的状态［1，11-15］。例如，梁飞龙等［12］报道了经过术前处理能够显著提高马氏珠母贝（Pinctada martensii）手术贝的成活率、留核率和珍珠质量。符韶等［13］认为术前处理可以明显提高珠母贝（Pinctada margaritifera）植核贝的成活率、留核率和收珠率。谢玉坎等［14］在大珠母贝（Pinctada maxima）植核育珠实验中观察到经过预（术）前处理的手术贝，休养期平均成活率达85%，有的甚至达100%。珍珠贝类的手术前处理方法主要有抑制性腺发育与促进性腺成熟提前排放精卵2种方法［15］。抑制性腺发育法主要通过增加养殖密度，将养殖母贝吊养在较深的养殖水层，通过控制水流和饵料供给，以抑制母贝的活力和性腺发育，达到调节母贝的生理状态。本研究将企鹅珍珠贝从常规养殖密度3～4个/笼，增加到12～15个/笼，水深200 cm增加到400 cm，吊养20～25 d，切除足丝3～4次，以抑制母贝的性腺发育和活力。对于性腺发育较丰满的采用疏养浅吊，养殖密度从3～4个/笼调整为2～3个/笼，养殖水深从200～300 cm调整为150～200 cm，通过阴干（利用空气温度和水温差异）刺激母贝排精产卵，两种方式均取得良好的育珠效果。其中，促性腺发育排精产卵法效果略好于抑制性腺发育的，笔者认为造成这一结果的主要原因是促性腺发育法是促进贝体的生长发育，然后诱导其排精产卵休整3～5 d即进行手术，贝体在整个处理过程中生长没有受到抑制，处理时间短，生殖腺排空后核位空间较大，因此手术后恢复快，手术贝成活率高、留核率高；抑制性腺发育方式的处理时间长，处理过程中贝体受到抑制，手术后要经过一段时间才能从抑制状态恢复到正常状态，其次抑制造成贝体内脏团瘦小导致核位缩小，故植核贝的成活率和留核率低。由于贝体的性腺发育水平和养殖水域环境存在差异，在实际应用中要根据贝体的生理状态采取合适的术前处理方法，对于性腺没有充分发育的母贝，采取抑制性腺发育的方法。对于性腺发育接近成熟的母贝，采取疏养促进性腺发育人工刺激诱导其排精产卵。

3.2不同规格珠核对企鹅珍珠贝植核育珠效果的影响

珍珠培育使用的珠核大小关系到所培育的珍珠规格和质量，珠核直径小，所产珍珠颗粒小，价格低，不能充分发挥育珠贝的产能，珠核规格过大，育珠贝病死率高、脱核率高，影响珍珠的收获量。黄惟灏等［16］认为体长120～122 mm的三角帆蚌（Hyriopsis cumingii）内脏团植入直径8.00～8.25 mm珠核培育有核珍珠效果比较理想。符韶等［13］认为珠母贝（Pinctada margaritifera）首次植核的适宜珠核直径为6.0mm，珠核规格越大，手术贝病死率越高。Kripa V等［17］认为，手术贝的留核率和病死率因养殖场的位置和珠核规格而异，使用大规格珠核可使日本珠母贝（马氏珠母贝）珍珠收获量减少40%～70%。

该研究表明，企鹅珍珠贝手术贝的成活率、留核率、成珠率和珠核规格成反比，珠核直径越大、育珠贝的成活率、留核率、成珠率越低。笔者经过解剖观察到企鹅珍珠贝内脏团结构特殊，足丝和闭壳肌发达，挤压其他部位的组织器官，可容纳珠核的空间小，其次表皮厚实，开口、通道、送核十分困难，结缔组织单薄不能为植核后珍珠囊的形成提供充足的营养，因此大颗粒珠核在手术过程中容易损伤通道周围的组织器官，导致育珠贝病死率高、留核率低、成珠率低。但是，如果使用珠核直径过小，虽然不影响植核操作，但培育的珍珠颗粒小，价格低，育珠贝的产能得不到充分发挥，造成母贝资源浪费。珍珠的价格主要由珍珠的大小、光泽、颜色和形状决定，在光泽、颜色和形状相同或相似的情况下，珍珠直径越大价格越高。珠核直径5.0 mm组和6.0 mm组在育珠贝成活率和成珠率方面差异不显著，建议2.0～3.0龄（壳高11.6～14.7 cm）企鹅珍珠贝植核使用直径6.0 mm珠核，只有个别尺寸比较小的使用5.0 mm珠核，以提高珍珠培育的经济效益。

3.3不同贝龄对企鹅珍珠贝植核育珠效果的影响

贝体的大小与贝龄和环境条件密切相关，珍珠贝类随着年龄和个体的增加生长速度减慢，珍珠质分泌速度下降［1，11，18-21］。例如，Yukihira H等［18］在大堡礁（Great Barrier Reef）的两个不同地点养殖大珠母贝（Pinctada maxima）和珠母贝（P.margaritifera），结果显示大珠母贝生长速度比珠母贝快，大珠母贝在两个实验点达到首次植核的壳高12 cm所需时间为1.9年和2.1年，而达到相同规格珠母贝所需时间为2.5年和3.9年。尹立鹏等［19］利用2龄和1.5龄的马氏珠母贝（Pinctada martensii）进行植核育珠，结果显示低龄贝（1.5龄）植核育珠明显提高育珠贝的留核率、成活率和珍珠层厚度。符韶等［13］进行珠母贝（Pinctada margaritifera）育珠实验，结果显示年幼的母贝对手术适应性强、伤口愈合快，具有较高成活率、成珠率。Xu等［20］认为3～4龄三角帆蚌（Hyriopsis cumingii）分泌珍珠质能力最强，2～3龄次之，5龄后珍珠分泌能力明显下降。因此，在选择手术母贝时既要考虑母贝的年龄，还要考虑母贝的大小，选择年龄小个体大的母贝做手术母贝，因为低龄贝的珍珠质分泌能力强，而较大的个体可承受较大直径的珠核，达到在比较短的养殖时间内培育较大颗粒的珍珠，提高育珠效益。

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Pre-operative condition and nucleus size on round nucleated pearl production of Pteria penguin

Liang Feilong1，Wang Qingui2，Deng Yuewen1，Xie Shaohe1，2
（1.Pearl Research Institute，Guangdong Ocean University，Zhanjiang Guangdong 524025，China；2.Guangdong Shaohe Pearl Co.Ltd，Shantou Guangdong，515822 China）

Experiments were conducted to evaluate the effects of pre-operative condition and nucleus size on round nucleated pearl production performances of pearl oyster Pteria penguin.The pearl oyster was farmed in deeper water column to reduce metabolic rate，or induced to spawn by temperature stimulating prior to nucleusinserting operation for pre-operative condition.The diameters of nuclei were 5.0 mm，6.0 mm，7.0 mm and 8.0 mm，respectively.The recovery period and pearl farming period after nucleus implantation were one month and 18 months，respectively.The results showed that there were significant differences in the survival and pearl formation rates among groups（P＜0.05）.The survival rates，nucleus retention and pearl formation rates of host oysters during recovery and farming period were highest，with the values of 62.0%，54.0%，21.0%and 48.0%for implanted oysters by temperature stimulating for inducing to spawn.The lowest values were 50.0%，38.0%，11.0%and 32.0%for control groups，respectively.The survival rates during recovery and farming period，nucleus retention and pearl formation rates of operated oysters were the highest，with the values of 64.0%，54.0%，22.0%and 45.0%for 5.0 mm nucleus implanted oysters.The lowest values were 42.0%，33.0%，8.0% and 22.0%for 8.0mm nucleus implanted oysters，respectively.The results suggested that pre-operation condition can evidently improve survival rate，nucleus retention and pearl formation rates of host oysters and the nucleus diameter was 5.0～6.0 mm should be optimum for round nucleated pearl production of Pteria penguin.

Pteria penguin；round nucleated pearl；pre-operative condition；nucleus size

S968.35

A

1004-2091（2016）01-0030-05

10.3969/j.issn.1004-2091.2016.01.006

广东省教育部产学研结合项目（2009B090300161）

梁飞龙（1963-），男，教授级高工，研究方向：珍珠养殖技术研究与开发.E-mail:lflzjou@126.com

谢绍河（1955-），男，教授.E-mail:xsh5760288@126.com

2015-06-23）