王 君,邱 彬,刘 明,王 超,雍伟东,谢忠稳
(1. 安徽农业大学,茶与食品科技学院, 茶树生物学与资源利用国家重点实验室,安徽,合肥 230036;2. 中国医学科学院医学实验动物研究所, 基因与发育室,北京 100021 )
蛋白磷酸酶5(PP5)对小鼠脂肪代谢的影响
王君1,邱彬2,刘明2,王超2,雍伟东2,谢忠稳1
(1. 安徽农业大学,茶与食品科技学院, 茶树生物学与资源利用国家重点实验室,安徽,合肥230036;2. 中国医学科学院医学实验动物研究所, 基因与发育室,北京100021 )
目的利用蛋白磷酸酶5(PP5)基因敲除小鼠,探究PP5在小鼠脂肪代谢中的作用。方法随机选取6周龄雄性PP5基因敲除(PP5 KO)和野生型(WT)小鼠,高脂饲养6周后,应用HE染色和油红O染色技术对小鼠肝脏结构和脂滴积累进行检测,应用Western blotting和real-time PCR技术检测肝脏组织中脂代谢相关基因的表达情况。同时应用PP5 KO和WT小鼠成纤维细胞,在体外观察PP5对脂肪分化的影响。结果与WT小鼠相比,高脂饲养后PP5 KO小鼠体重与WT小鼠相比显著减轻,肝脏中脂滴数量显著较少且脂滴较小。体外实验发现与WT小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)相比PP5 KO MEF细胞脂肪分化显著较弱,脂滴较小。此外,在PP5 KO肝脏组织中脂肪分化标记基因CD36、AP2、PPARγ2和Glut4的相对表达量显著降低,而能量代谢相关蛋白糖皮质激素受体(GR)的磷酸化水平显著增加,解偶联蛋白1(UCP1)表达量也显著升高。结论 PP5通过调节GR的去磷酸化影响机体脂肪分化和能量代谢调控小鼠脂肪代谢。
蛋白磷酸酶5;糖皮质激素受体;解偶联蛋白1;脂肪分化;能量代谢
甾体激素受体是一类参与细胞调控的核受体超家族,对生物体具有极其重要的作用,主要包括糖皮质激素受体(GR)、雌激素受体(ER)、雄激素受体(AR)、孕激素受体(PR)以及盐皮质激素受体(MR)。……