SSA/Ro60自身抗原的基因克隆与表达纯化*

牛广华，张　程，吕　丹，高玉洁

(辽宁中医药大学附属医院，沈阳 110032)



SSA/Ro60自身抗原的基因克隆与表达纯化*

牛广华，张程△，吕丹，高玉洁

(辽宁中医药大学附属医院，沈阳 110032)

目的克隆人SSA/Ro60自身抗原并表达纯化，为辅助诊断自身免疫提供物质基础。方法采用RT-PCR技术扩增SSA/Ro60基因，定向插入pPICZ表达载体，转入毕赤酵母表达系统，将获得的重组蛋白行SDS-PAGE和Western blotting鉴定。结果扩增出约1.5 kb的SSA/Ro60全长序列，获得相对分子质量60×103的重组蛋白，经鉴定具有SSA/Ro60抗原性。结论成功克隆并表达SSA/Ro60，为诊断自身免疫疾病奠定基础。

SSA/Ro60;基因克隆;表达纯化

干燥综合征(SS)是一种全身外分泌腺的慢性炎性自身免疫反应疾病。研究表明，干燥综合征A型抗原(SSA)与SS、系统性红斑狼疮(SLE)等疾病的发生、发展及预后判断密切相关[1]。SSA抗原是细胞质中一类小核糖核酸与蛋白质结合的复合物,是一种重要的自身抗原[2]。近年来越来越多的学者对自身免疫性疾病进行深入的研究，对Ro抗原的认识也越来越深，Ro成为了核糖核蛋白复合物(RNP)抗原中最常见的抗原之一[3]。后来发现，Ro抗原与SSA属同一种自身抗原，故命名SSA/Ro抗原[4]。同时有研究者发现检测SSA/Ro抗原在临床上对自身免疫性疾病的诊断有极其重要的意义[5]。该抗原有52 000和60 000两种相对分子质量的蛋白，分别称为SSA/Ro52和SSA/Ro60。SSA/Ro60存在于多种自身免疫性疾病患者体内,生理状态下SSA/Ro60核蛋白及hYRNA共同构成核糖核蛋白复合体SSA/Ro60抗原，与多种自身免疫疾病密切相关[6]。目前检测SSA的免疫双扩散法无法区分Ro52和Ro60，免疫印迹法只能检出Ro52，常常导致Ro60的漏检[5]。……