龙岩市地方优良种禽原种场禽白血病p27抗原检测与分析

蓝养金　邬良贤　福建省龙岩市农产品质量安全检验检测中心　364000

龙岩市地方优良种禽原种场禽白血病p27抗原检测与分析

蓝养金邬良贤福建省龙岩市农产品质量安全检验检测中心364000

用酶联免疫吸附试验法对长汀河田鸡原种场、武平象洞鸡原种场、龙岩山麻鸭原种场共686份蛋清样本及801份泄殖腔棉拭子进行禽白血病p27抗原检测。结果为：龙岩山麻鸭的蛋清样本和泄殖腔棉拭子均未检出ALV核酸；鸡蛋清样本阳性率为12.8%（80/626），明显高于泄殖腔棉拭子阳性率8.9%（66/741）；鸡原种场180日龄蛋清样本和泄殖腔棉拭子阳性率均最高，平均阳性率分别为15.0%和11.3%。表明：龙岩市境内地方优良鸡原种场中有禽白血病感染现象。

禽白血病p27抗原ELISA检测

禽白血病是由禽白血病病毒（Avian Leukosis Virus，ALV）和禽肉瘤病病毒（Avian Sarcoma Virus，ASV）引起的禽类多种肿瘤性疾病的统称。在临床上感染率很高且危害严重，到目前为止，还没有合适的疫苗和有效的药物加以对抗。p27是AL病毒群（A，B，C，D，E和J亚群）的主要群特异性抗原（gs），高度保守，因而p27抗原检测是ALV抗原检测的基础。笔者选择在龙岩市辖区内的3个原种禽场：武平象洞鸡某原种场、长汀河田鸡某原种场和山麻鸭某原种场，采集同批不同日龄泄殖腔棉拭子801份，蛋清样本686份，用禽白血病抗原试剂盒检测ALV-p27抗原，了解在自然条件下龙岩市禽原种场ALV感染情况，现将初步检测结果报告如下。

1　材料与方法

1.1检测试剂和方法ALV-Ag（p27）检测试剂盒为美国IDEXX公司生产，批号为：99-09254BK775，4℃保存备用。

检测方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法，严格按照试剂盒的操作步骤说明对采集的蛋清样本及泄殖腔棉拭子样本进行检测。

1.2主要检测仪器酶标仪（北京普良，型号：DNM-9602）；洗板机（芬兰雷勃Wellwash 4MK2）；微量移液器（德国Eppendorf）。

1.3样品来源2014年在龙岩市3个原种禽场采集泄殖腔棉拭子801份、蛋清样本686份。其中新罗山麻鸭原种场蛋清样本60份、泄殖腔棉拭子60份，武平象洞鸡原种场蛋清样本317份、泄殖腔棉拭子360份，长汀河田鸡原种场蛋清样本309份、泄殖腔棉拭子381份。

2　检测结果

2.1三个原种禽场禽白血病p27抗原检测情况结果表明：龙岩市新罗山麻鸭原种场并未受到ALV感染，而本地优良鸡种均受到ALV感染。武平象洞鸡原种场蛋清样本阳性率13.9%（44/317）、泄殖腔棉拭子样本阳性率9.7%（35/360），均高于长汀河田鸡原种场蛋清样本阳性率11.7%（36/309）、泄殖腔棉拭子样本阳性率8.1%（31/381）；同一鸡品种蛋清样本阳性率明显高于泄殖腔棉拭子。见表1。

2.2武平象洞鸡原种场及长汀河田鸡原种场不同日龄鸡群禽白血病p27抗原检测情况结果表明：象洞鸡原种场、河田鸡原种场的蛋清样本阳性率和泄殖腔棉拭子样本阳性率均随着日龄增加而增加，于180日龄达到峰值后逐渐下降。见表2。

3　分析与讨论

1）山麻鸭原种场未检出ALV-p27抗原阳性，表明鸭场未感染ALV，符合禽白血病自然情况下只感染鸡的结果［1］。

2）龙岩市境内地方品种鸡群中有禽白血病感染现象。ALV是自然存在、引进外来鸡种污染或是使用被ALV污染的疫苗所致，有待进一步调查核实。

3）通过对泄殖腔棉拭子样本和蛋清样本ALV-p27抗原检测发现，蛋清样本检出率明显高于泄殖腔棉拭子样本检出率。表明在执行ALV监测和净化计划时，应以蛋清样本的检测结果进行判定较为科学可靠。

4）象洞鸡原种场、河田鸡原种场的蛋清样本阳性率和泄殖腔棉拭子样本阳性率均随着日龄增加而增加，于180日龄达到阳性检出率峰值后逐渐下降。印证在临床上ALV的危害是渐进发展过程，以垂直传播为主、水平传播为次，在达到性成熟时期多表现临床发病，而后因高低不等的发病死亡淘汰后逐渐归于平稳。

5）本次ALV病原核酸的检测结论与境内武平县部分鸡场禽白血病J亚群抗体和A、B亚群抗体的检测结论具有较高的关联性［2-4］。

6）本次调查受品种、场数及范围的限制，检测项目较单一，样本的采集分类等均还有待改进和完善，龙岩市优良地方鸡种原种场的ALV净化工作仍任重道远。

表1　三个原种场ALV-p27抗原检测结果

［1］赵振华.禽白血病［M］.北京：中国农业出版社，2006.

［2］刘辉兰.武平县部分鸡场禽白血病J亚群抗体和A、B亚群抗体的检测结果分析报告［J］.福建畜牧兽医，2014，36（5）：14-15.

［3］甘孟候.中国禽病学［M］.北京：中国农业出版社，2000.

［4］卡尔尼克B W.禽病学［M］.高福，苏敬良，译.10版.北京：中国农业出版社，1999.

Detection and analysis of p27 antigen of avian leucosisvirus in local original breeding poultry farm of Longyan city

Lan Yangjin Wu Liangxian
（Longyan quality inspection of agricultural products monitoring center，Longyan 364000）

In order to investigate the positive rate for antigen P27 of avian leukosis virus（ALV）by ELISA in egg whites（n=686）and cloacal swabs（n=801）from three breeding poultry farms，including Changting Hetian chicken farm，Wuping Xiangdong chicken farm and Longyan sheldrake farm.The results showed that，in Longyan sheldrake farm，the ALV-p27 antigen was not detected in egg whites and cloacal swabs.In other two breeder farms，the ALV-p27 antigen positive rates of egg whites were 12.8%（80/626）.It was significant higher than that of cloaca swabs 8.9%（66/741）.In a 180-day chincken flock，the positive rates of ALV-p27 in egg whites and cloacal swabs were highest，the average positive rates were 15.0%and 11.3%，respectively.The results suggested that breeder farms are at risk of ALV infection in longyan city.

Avian leukosis p27 antigen ELISA

表2　原种场不同日龄鸡群ALV-p27抗原检测结果

A

1003-4331（2016）05-0024-02