沉默肝星状细胞神经菌毛素-1抑制肝癌生长的实验研究

徐之超，陈　晨，慎浩鑫，马　丽，李文智，王　林，耿智敏

(西安交通大学第一附属医院：1.急诊科；2.肝胆外科，陕西西安　710061)



◇基础研究◇

沉默肝星状细胞神经菌毛素-1抑制肝癌生长的实验研究

徐之超1，陈晨2，慎浩鑫2，马丽2，李文智2，王林2，耿智敏2

(西安交通大学第一附属医院：1.急诊科；2.肝胆外科，陕西西安710061)

目的探讨沉默肝星状细胞神经菌毛素-1(neuropilin-1,NRP-1)表达后，是否会影响其对肝癌的促生长作用，并初步探讨可能存在的作用机制。方法细胞免疫荧光及细胞荧光双重染色观察NRP-1在肝星状细胞LX2中的表达及其与血小板源性生长因子受体β(platelet-derivedgrowthfactorreceptor-β,PDGFR-β)的共表达；MTT法检测沉默肝星状细胞NRP-1后对肝癌细胞体外增殖能力影响；建立裸鼠皮下肝癌移植瘤模型，绘制生长曲线，免疫组化法观察各组瘤体α-平滑肌肌动蛋白(α-smoothmuscleactin,α-SMA)、NRP-1、PDGFR-β表达强度的差异。结果LX2表面存在NRP-1表达，且NRP-1与PDGFR-β共表达于LX2；沉默LX2NRP-1后对HepG2促增殖作用降低(P<0.05)；NRP-1KG移植瘤体积较NRP-1CG、NRP-1NG小(P<0.05)，进一步对各组瘤体行免疫组化染色并进行表达强度积分分析，发现NRP-1KG瘤体间质NRP-1、PDGFR-β表达均较NRP-1CG弱(χ2=25.89，P<0.05；χ2=28.12，P<0.05)。结论沉默肝星状细胞NRP-1表达后，其对肝癌细胞促增殖作用降低，在体内环境中其对肝癌皮下移植瘤促生长作用也降低，其机制与肝星状细胞活化减弱有关，而肝星状细胞NRP-1表面共受体PDGFR-β表达减弱也可能参与这一过程。

神经菌毛素-1；肝星状细胞；肝癌；肿瘤微环境

肝癌微环境中除了肝癌细胞(hepatocellularcarcinomacells,HCCs)，还包括多种间质细胞及细胞外基质成分，这些间质成分一定程度上决定肿瘤的发生发展。肝星状细胞(hepaticstellatecells,HSCs)作为肝癌微环境主要间质细胞之一，在血小板源性生长因子(platelet-derivedgrowthfactor,PDGF)等细胞因子作用下，转化为活化的HSC，自身增殖能力增强，进而促进肝癌发生发展[1-2]。同时，活化的HSC自分泌PDGF能力增强，反过来又可促进自身活化。神经菌毛素-1(neuropilin-1,NRP-1)是一种Ⅰ型跨膜糖蛋白，表达于多种细胞，可促进大多数肿瘤的发生发展。已有研究证实，沉默HCCNRP-1表达可抑制其增殖能力[3]。……