miR146通过靶向Notch 1促进骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化

岳宗进，刘汝银，于　露，冯仲锴，王新立

(河南中医药大学第二附属医院，河南郑州　450002)



◇基础研究◇

miR146通过靶向Notch1促进骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化

岳宗进，刘汝银，于露，冯仲锴，王新立

(河南中医药大学第二附属医院，河南郑州450002)

目的探讨miR146在骨髓间充质干细胞(BMSC)向髓核样细胞分化中的作用及其机制。方法从SD大鼠中分离培养BMSC，传至第3代用于本实验。以TGFβ1(转化生长因子-β1)诱导BMSC向髓核样细胞分化为模型。检测TGFβ1诱导BMSC后蛋白多糖(ACAN)、Ⅱ型胶原蛋白(COLⅡ)和SOX9的蛋白及mRNA表达水平；RT-PCR检测miR146的表达水平。随后通过上调或下调miR146水平，检测ACAN、COLⅡ和SOX9的蛋白及mRNA表达水平；双荧光素酶报告系统验证miR146的靶基因，并上调或下调miR146水平后检测靶基因的蛋白表达水平；过表达靶基因并检测其与miR146mimic共转染对ACAN、COLⅡ和SOX9表达的影响。最后，上调或下调靶基因后，检测miR146表达水平的变化。结果TGFβ1诱导BMSC向髓核样细胞分化后ACAN、COLⅡ、SOX9和miR146高表达。上调miR146后，ACAN、COLⅡ和SOX9的表达升高；下调miR146后ACAN、COLⅡ和SOX9的表达降低。双荧光素酶报告系统证实，Notch 1是miR146的靶基因，miR146通过抑制Notch 1的表达上调ACAN、COLⅡ和SOX9的表达水平。上调Notch 1后miR146表达下调，下调Notch 1后miR146表达上调。结论miR146通过靶向Notch 1促进骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化，Notch 1对miR146亦具有负向调控作用。

骨髓间充质干细胞；髓核样细胞；miR146；Notch 1

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