小鼠自由饮10%酒精3个月对肝脏的影响*

徐　燕，曾　勇， 陈育尧

(1.赣南医学院；2.赣州市食品药品监督管理局，江西　赣州　341000；3.南方医科大学中医药学院，广东　广州　510515)



小鼠自由饮10%酒精3个月对肝脏的影响*

徐燕1，3，曾勇2， 陈育尧3

(1.赣南医学院；2.赣州市食品药品监督管理局，江西赣州341000；3.南方医科大学中医药学院，广东广州510515)

目的:探讨成年小鼠自由饮10%酒精，连续3个月后对肝脏、部分肝功能及血脂的影响。方法：将小鼠分为饮酒组和正常对照组，雌雄各半，每组10只。饮酒组自由饮10%酒精3个月，正常对照组自由饮自来水。各组小鼠自由进食，3个月后空腹摘除眼球采血，测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量；取小鼠肝称重，计算肝指数。并取肝左叶用10%中性福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋，HE染色，光镜下检查。结果：与正常对照组比较，饮酒组组小鼠血清AST活性明显升高(P<0.01)；血清TG含量也有一定程度的升高(P=0.076)；饮酒组小鼠肝指数明显增加(P<0.01)，肝脏明显脂肪变及坏死(P<0.01、P<0.05)。结论：小鼠自由饮10%酒精3个月，会造成肝细胞肿胀、脂肪变及坏死。

小鼠；酒精；血脂；转氨酶；病理组织检查

本实验采用小鼠长期饮酒3个月，观察酒精对小鼠血脂、肝功能及肝脏的影响。

1　材料与方法

1.1动物昆明种小鼠，SPF级，20只，雌雄各半，体重18～22 g，动物由南方医科大学实验动物中心提供，动物许可证号：SCXK(粤)2006-0015。

1.2试剂及仪器无水乙醇，批号：20100327，由广东光华化学厂有限公司生产。CX9全自动生化分析仪，美国Beckman coulter 公司生产。

1.3实验方法将20只小鼠分为饮酒组、正常对照组，每组10只，雌雄各半。饮酒组小鼠给予10%酒精替代水。两组小鼠均摄食普通颗粒饲料，自由进食。3个月后空腹摘除眼球采血，分离血清，送南方医科大学中西医结合医院检验科，测ALT、AST活性及TG、TC含量；取小鼠肝称重，计算肝指数。并取小鼠肝左叶，用10%福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋，HE染色，光镜下检查。

2　结　果

2.1小鼠体重、肝重及肝指数变化与正常对照组比较，饮酒组小鼠在实验第1天及实验结束后，体重无显明差异。饮酒组小鼠肝湿重有所增加，但无明显差异，肝指数显著增加(P<0.01)。见表1。

2.2小鼠血清ALT、AST活性及TG、TC含量的变化饮酒组小鼠与正常对照组比较，血清AST活性显著升高(P<0.01)。见表2。

表1　小鼠体重、肝重及肝指数变化±s

表2　小鼠血清ALT、AST活性及TG、TC含量的变化

2.3小鼠肝脏病理组织学变化病理组织学检查可见饮酒组小鼠均有不同程度的肝细胞肿胀、气球样变，肝细胞小泡性、大泡性脂肪变性，肝小叶内坏死灶明显增多，多数表现为凝固性伴出血性点状、灶状、片状坏死，炎细胞浸润。表明小鼠肝脏损伤病变处在脂肪肝和肝炎阶段；正常对照组大部分小鼠肝小叶结构清晰，细胞排列整齐，无变性坏死，汇管区未见炎性细胞浸润。只有少量小鼠肝细胞出现轻度的肿胀及点、灶状坏死，炎细胞浸润。见表3、图1。

表3　小鼠肝脏病理组织学变化

注：脂肪肝变化[1]：+表示肝小叶结构尚存，肝组织结构大致正常，部分肝细胞索排列紊乱，汇管区周围细胞肿胀、轻度空泡变及气球样变；++表示肝小叶结构模糊不清，部分肝细胞索结构消失，肝细胞排列紊乱，大部分肝细胞肿胀、气球样变及空泡变，部分动物可见肝细胞点状及局灶状坏死，汇管区少量炎细胞浸润；+++表示肝小叶结构轮廓消失，肝细胞形态不规则，绝大部分肝细胞肿胀呈气球样变，并可见部分肝细胞空泡变性，也可见部分动物出现肝细胞点状或片状坏死，汇管区炎细胞浸润。

A.正常组：正常肝组织。B.正常组：肝细胞轻度肿胀、点状坏死。C.饮酒组：肝细胞肿胀、大泡性及小泡性脂肪变。D.饮酒组：肝细胞肿胀，凝固性坏死.。

图1小鼠肝脏病理组织学变化(HE染色，×200)3讨论

酒精性肝病是由于长期大量饮酒所致的肝脏损害及其一系列病变，是慢性酒精中毒最常见和最严重的并发症之一。目前，我国酒精性肝病已成为仅次于病毒性肝炎的第2大肝病，严重威胁国民健康[2-3]。

本实验采用小鼠不间断地自由饮10%酒精3个月，造成小鼠脂肪肝及肝炎。通过实验过程粗略计算，平均20 g小鼠1天喝1 mL酒精度为50度的高度白酒。按照体表面积换算，相当于1个成人每天喝7～8两高度白酒，连续3个月(90天)。

通过本实验表明，长期大量饮酒会造成肝脏损伤，表现为肝细胞的脂肪变及坏死、肝脏指数增加、肝功能异常，血清甘油三酯也有一定程度的升高。再发展下去可能会出现酒精性肝纤维化和酒精性肝硬化。故长期大量饮酒对健康极为不利。

[1]陈育尧，陈业豪，石彩霞.大鼠高血脂及脂肪肝模型的建立[J].中药药理与临床,2007,23(4):64-65.

[2]鲁晓岚，陶明，罗金燕，等.饮酒与肝病流行病学调查[J].中华肝脏病杂志，2002，10(6):467-468.

[3]全国酒精性肝病调查协作组.全国酒精性肝病的多中心调查分析[J].中华消化杂志，2007，27(4):231-234.

Effects of 3-month Freely Drink with 10% Alcohol on Mouse Livers

XUYan1,3,ZENGYong2,CHENYu-yao3

(1.SchoolofPharmacy,GannanMedicalUniversity; 2.FoodandDrugAdministrationofGanzhou,GanzhouJaingxi341000;3.SchoolofTraditionalChineseMedicine,SouthernMedicalUniversity,GuangzhouGuangdong510515)

Objective：To study the effect of 3-month freely drink with 10% alcohol on partial liver function and blood lipid levels of adult mice. Methods：The mice were divided into drinking group and normal control group with equal number of male and female (10 mice in each group). The mice in drinking group freely drank 10% alcohol for 3 months, and the mice in normal control group freely drank tap water for 3 months. The mice of every group freely ate food. After 3 months, we took blood samples from mouse eyeballs in fasting conditions, and tested the activity of the serum alanine aminotransferase (ALT), aspartate transaminase (AST) and the levels of the triglyceride (TG) and total cholesterol (TC); We then weighted the livers and calculated the liver index.The left lobe of liver were fixed in 10% neutral formalin, dehydrated, embedded in paraffin, HE stained and inspected under light microscope. Results:In comparison to control group, serum AST activity of mice in drinking group significantly increased (P<0.01)；The serum TG levels also elevated to some extent (P=0.076); The liver index were raised remarkably(P<0.01)and the livers of mice in drinking group showed more fatness and necrosis than controls (P<0.01,P<0.05). Conclusion: Three-month freely drink with 10% alcohol in mice led to swelling of the livers, fat metamorphosis, and necrosis.

Mice; Alcohol; Blood lipid; Aminotransferase; Pathological examination

陈育尧，男，高级实验师，研究方向：中药药理、毒理、健康食品、动物实验技术。E-mail：chyy@fimmu.com

R961

A

1001-5779(2016)03-0362-03

10.3969/j.issn.1001-5779.2016.03.008

2016-02-04)(责任编辑：刘仰斌)