门诊干眼患者炎症因子表达水平及干眼相关危险因素研究

李海辉 王彦荣 刘 洋 顾莉莉

陕西省延安市人民医院眼科，陕西延安716000

门诊干眼患者炎症因子表达水平及干眼相关危险因素研究

李海辉 王彦荣 刘 洋 顾莉莉

陕西省延安市人民医院眼科，陕西延安716000

目的探讨门诊干眼患者炎症因子的表达水平及干眼相关危险因素。方法选取2014年6月～2016年3月在延安市人民医院眼科门诊就诊的48例干眼患者（A组）和同期在眼科门诊单纯配镜的96例非干眼者（B组）作为研究对象。所有研究对象均行眼表疾病指数（OSDI）问卷、泪膜破裂时间（BUT）检查、泪液分泌试验Ⅰ（SⅠt）和角膜荧光素染色试验，采用ELISA法检测两组血液和眼泪中白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的浓度，采用多因素Logistic回归和Spearman秩相关分析等分析数据。结果A组血液和眼泪中IL-6、IL-1β和TNF-α浓度均明显高于B组（均P＜0.05）。血液和眼泪中的IL-6、IL-1β和TNF-α均分别与OSDI、BUT、SⅠt和角膜荧光素染色试验结果显著相关（rIL-6血=0.91、-0.94、-0.93、0.61，rIL-6眼泪=0.86、-0.81、-0.77、0.58；rIL-1β血=0.56、-0.48、-0.71、0.62，rIL-1β眼泪=0.55、-0.43、-0.69、0.53；rTNF-α血=0.53、-0.49、-0.45、0.51，rTNF-α眼泪= 0.51、-0.47、-0.44、0.50，均P＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示，糖尿病（OR=0.313，95%CI=0.118～0.831，P= 0.020）、沙眼（OR=0.197，95%CI=0.066～0.587，P=0.004）、视频终端综合征（OR=0.072，95%CI=0.007～0.774，P= 0.030）和服用抗组胺药物（OR=0.142，95%CI=0.025～0.796，P=0.027）是干眼的独立危险因素。结论血液和眼泪中TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度与干眼的病情关系密切。延安地区干眼危险因素众多，应采取针对性的预防措施。

白细胞介素-6；白细胞介素-1β；肿瘤坏死因子-α；干眼；危险因素

干眼是影响患者生活质量的常见眼部疾病，近年来因为其发病率逐年上升且年轻化而备受关注［1］。干眼的病因复杂，目前发病机制尚未完全阐明，但越来越多的研究证实炎症因素与干眼关系密切［2］，但很少有研究比较炎症因子在干眼患者及正常人中表达水平异同，关于炎症因子与干眼检查结果的相关关系也报道甚少［3］，而延安地区关于干眼相关危险因素暂未见报道。本研究拟探讨干眼与非干眼患者外周血和眼泪中炎症因子的表达水平异同，分析干眼的相关危险因素，为其防治提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2014年6月～2016年3月在延安市人民医院（以下简称“我院”）眼科门诊连续就诊的48例（96眼）干眼患者作为实验组（A组），同时选择同期在我院眼科门诊单纯配镜的96例非干眼者作为对照组。匹配标准：性别相同，两组年龄差＜3岁，均同一地区居住＞10年。干眼诊断参考我国2013年角膜病学组制订的诊断标准［2］。所有研究对象在最近3个月内均没有眼外伤、眼手术等。研究经我院伦理委员会批准，均取得受试者和家属知情同意。

1.2 方法

1.2.1 眼科检查采用眼表疾病指数（ocu1ar surface disease index，OSDI）问卷对所有研究对象进行干眼症状评估［4］。所有研究对象均行泪膜破裂时间（breakup time of tear fi1m，BUT）、泪液分泌试验Ⅰ（Shirmer I test，SⅠt）和角膜荧光素染色试验。荧光素钠试纸和准泪液检测试纸均购自天津晶明新技术开发有限公司。

1.2.2 外周血炎症因子检测所有研究对象均清晨采集空腹肘静脉血5 mL置于EDTA管中，2000 r/min离心10 min，分离血浆于-20℃保存备检。采用酶联免疫吸附双抗体夹心法（ELISA）检测白细胞介素-6（inter1eukin-6，IL-6）、白细胞介素-1β（inter1eukin-1 beta，IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-a1pha，TNF-α）在静脉血中的浓度。ELISA试剂盒购自北京晶美生物技术公司，严格按照试剂盒说明书操作。

1.2.3 泪液中炎症因子检测采用毛细管法于早晨8∶00～10∶00采集所有研究对象的泪液，通过研究对象数次瞬目后用25 μL毛细管在外眦收集泪液约15 μL，于-80℃保存备检。采用ELISA法检测IL-6、IL-1β和TNF-α的浓度，相关试剂盒和操作方法同“1.2.2”项下。

1.3 统计学方法

采用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析，符合正态分布的数据用均数±标准差（）表示，如方差齐，两组间比较采用t检验，如方差不齐，则采用Wilcoxon秩和检验；不符合正态分布的数据用中位数（四分位数）［M（Q25，Q75）］表示，两组间比较采用Wilcoxon秩和检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验；眼科检查结果与炎症因子的相关性分析采用Spearman秩相关分析；干眼相关影响因素分析采用多因素Logistic回归分析（以P＜0.1为纳入标准）。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组眼科检查结果比较

两组OSDI评分、SⅠt、BUT和荧光素染色评分差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表1。

2.2 两组外周血和眼泪中炎症因子水平比较

A组外周血和眼泪中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均高于B组，差异有统计学意义（均P＜0.05）。见表2。

2.3 眼科检查结果与炎症因子相关性分析

Spearman相关分析显示，眼科检查结果（OSDI、SⅠt、BUT和荧光素染色评分）均与炎症因子（外周血和眼泪中IL-6、IL-1β和TNF-α水平）显著相关，其中，SⅠt和BUT与炎症因子（外周血和眼泪中IL-6、IL-1β和TNF-α水平）呈负相关，而OSDI评分和荧光素染色评分与炎症因子（外周血和眼泪中IL-6、IL-1β和TNF-α水平）呈正相关。见表3。

2.4 干眼相关因素的单因素分析

单因素分析显示，高血压病（χ2=15.73，P＜0.01）、糖尿病（χ2=13.37，P＜0.01）、沙眼（χ2=14.67，P＜0.01）、结缔组织病（χ2=7.43，P＜0.01）、绝经后雌激素治疗（χ2=3.13，P＜0.1）、视屏终端综合征（χ2= 12.91，P＜0.01）、服用抗组胺药（χ2=12.38，P＜0.01）、使用角膜接触镜（χ2=3.17，P＜0.1）和长期滥用滴眼液（χ2=10.48，P＜0.01）均符合多因素Logistic回归分析的纳入条件。见表4。

表1 两组眼科检查结果比较［M（Q25，Q75）］

表2 两组外周血和眼泪中炎症因子水平比较（）

表2 两组外周血和眼泪中炎症因子水平比较（）

注：与B组相比，*P＜0.05；IL-6：白细胞介素-6；IL-1β：白细胞介素-1β；TNF-α：肿瘤坏死因子-α

组别IL-6（μg/L）外周血眼泪IL-1β（μg/L）外周血眼泪TNF-α（ng/L）外周血眼泪A组（n=48）B组（n=96）100.55±13.56*32.72±13.11 22.06±7.68*8.06±5.99 38.56±8.67*10.22±8.17 132.22±11.05*14.12±10.12 38.56±20.11*27.04±15.64 708.26±100.24*20.12±10.12

表3 眼科检查结果与炎症因子相关性分析

表4 干眼相关因素的单因素分析［n（%）］

2.5 干眼相关因素的多因素Logistic回归分析

以单因素分析P＜0.1的因素为自变量，以干眼为因变量，进行多因素Logistic回归分析，结果显示，糖尿病、沙眼、视屏终端综合征和服用抗组胺药为干眼的独立危险因素（均P＜0.05）。见表5。

表5 干眼相关因素的多因素Logistic回归分析

3 讨论

IL-6、IL-1β和TNF-α是单核巨噬细胞等产生的体内重要炎症因子，均可通过激活单核细胞和中性粒细胞等促进局部白细胞聚集，引起炎性反应［5-6］。A组血液与眼泪中炎症因子（IL-6、IL-1β和TNF-α）的表达均明显强于B组（均P＜0.05），这与北京等地报道的类似［2，7-9］，提示炎症在干眼发病中起着重要作用，其原因可能与干眼患者眼表常存在免疫调节机制紊乱有关［10］。国外也证实了眼表上皮自身反应性T细胞浸润及前炎症因子的高表达所致的炎性反应是导致干眼发病及病情进展的关键因素［11］。

IL-6、IL-1β和TNF-α均与眼科检查结果相关，其中与SⅠt和BUT呈负相关，而与荧光素染色评分呈正相关，这与Boehm等［12］报道类似，提示IL-6、IL-1β和TNF-α可反映泪膜的稳定性、泪液动力学和眼表完整性，也参与了泪膜稳定性下降和眼表损害等过程，其表达水平变化反映了干眼的进展过程［13］。IL-6、IL-1β和TNF-α与OSDI评分呈正相关，提示IL-6、IL-1β和TNF-α也可反映干眼患者的症状和体征。

本研究显示，糖尿病是干眼的独立危险因素，其原因可能如下：高糖状态可导致糖尿病患者的角膜感觉神经障碍，造成眼泪放射的传入路径受阻，降低三叉神经对角膜的营养作用，同时可破坏角膜上皮的屏障作用和导致杯状细胞减少从而减低眼表面亲水性。高糖状态也可导致糖尿病患者的上皮剥脱，角膜知觉减退，瞬目减少和泪液蒸发增加等［14-15］。此结果与广东省惠东县报道一致［16］，但与新疆喀什地区报道不同［14］，原因可能与各地区的研究对象、环境、研究手段和医疗条件等不同有关。沙眼是干眼的独立危险因素，这与刘菲菲等［17］报道一致，原因可能与沙眼可导致泪液分泌异常有关。视频终端综合征患者常存在屏幕放置距离太近、工间休息时间太少和视觉常处于阴暗环境等情况［18］，可能导致干眼，该结果与德州市和惠东县的研究结果一致［16，19］。服用抗组胺药是干眼的独立危险因素，其原因可能与抗组胺药物是H1或H2受体拮抗剂，有些能通过血液循环穿透泪腺，影响毒蕈碱活动，减少泪液中水液层和杯状细胞的分泌有关［20-21］。值得注意的是，抗组胺药若与某些药物（例如抗镇静药、鼻血管收缩药等）联合应用，可加重干眼症状［21］，临床中应尽可能避免此情况出现。值得一提的是，高血压、结缔组织病、绝经后雌激素治疗、使用角膜接触镜和长期滥用滴眼液在本研究中均未显示为干眼的独立危险因素，这与其他地区报道不同［19-20］，提示干眼独立危险因素有地区差异性，原因可能与我国幅员广阔，不同地区的遗传因素、生活环境等存在差异有关［20］，临床工作者应注意本地区的干眼独有危险因素，采取有效应对措施。

综上所述，IL-6、IL-1β和TNF-α与干眼病情关系密切，而干眼的危险因素众多，鉴于陕北地区处于干燥风沙地带，干眼患者常见，临床应关注干眼的危险因素，特别对于有独立危险因素的的患者，应采取合理措施干预和防治干眼。

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Study on the inflammatory factor exPression level and risk factors of Patients with dry eye in outPatient clinic

LI HaihuiWANG YanrongLIU YangGU Lili
Department of Ophtha1mo1ogy，the Peop1e's Hospita1 of Yan'an City，Shaanxi Province，Yan'an716000，China

Objective To investigate the the expression 1eve1 of inf1ammatory factor in dry eye patients of outpatient c1inic and its risk factors.Methods 48 patients with dry eye（group A）and 96 vo1unteers（group B）were enro11ed from Ophtha1mo1ogy C1inic of the Peop1e's Hospita1 of Yan'an City from June 2014 to March 2016.The test of ocu1ar surface disease index（OSDI）questionnaire，tear fi1m breakup time（BUT），sehirmerⅠtest（SⅠt）and cornea1 f1uorescence staining test were performed.Inter1eukin-6（IL-6），inter1eukin-1beta（IL-1β）and tumor necrosis factor-a1pha（TNF-α）in serum and tear were detected using enzyme-1inked immunosorbent assay.Data was ana1yzed by the method of mu1-tifactor Logistic regression ana1ysis and Spearman rank corre1ation ana1ysis.Results The concentrations of IL-6，IL-1β and TNF-α in serum and tear in group A were significant1y higher than those in group B（P＜0.05）.IL-6，IL-1β and TNF-α 1eve1s in serum and tear were a11 corre1ated with the score of OSDI，BUT，SⅠt and cornea1 f1uorescence staining test resu1ts（rIL-6-b1ood=0.91，-0.94，-0.93，0.61；rIL-6-tear=0.86，-0.81，-0.77，0.58；rIL-1β-b1ood=0.56，-0.48，-0.71，0.62；rIL-1β-tear=0.55，-0.43，-0.69，0.53；rTNF-α-b1ood=0.53，-0.49，-0.45，0.51；rTNF-α-tear=0.51，-0.47，-0.44，0.50；a11 P＜0.05）. Mu1ti-factor Logistic regression ana1ysis showed that diabetes（OR=0.313，95%CI=0.118-0.831，P=0.020），trachomatis（OR=0.197，95%CI=0.066-0.587，P=0.004），visua1 disp1ay termina1 syndrome（OR=0.072，95%CI=0.007-0.774，P= 0.030）and taking antihistamines（OR=0.142，95%CI=0.025-0.796，P=0.027）were independent risk factors of dry eye. Conclusion The concentrations of TNF-α，IL-1β and IL-6 in serum and tear are c1ose1y re1ated to dry eye condition. Many risk factors contributed to dry eye in Yan'an District.Pertinence measures shou1d be taken to prevent the disease.

Inter1eukin-6；Inter1eukin-1beta；Tumor necrosis factor-a1pha；Dry eye；Risk factors

R770.4

A

1674-4721（2016）07（c）-0127-04

2016-04-22本文编辑：程铭）

陕西省卫生科研项目（E8）；陕西省延安市科学技术研究发展计划项目（2014KW-12）。