济南市部分猪场口蹄疫抗体监测结果与分析

陈伟 马慧玲 陈静 王敏 孙圣福

（1，山东省济南市动物疫病预防与控制中心 250002；2，山东省动物疫病预防与控制中心 250022）

济南市部分猪场口蹄疫抗体监测结果与分析

陈伟1马慧玲2陈静2王敏2孙圣福2

（1，山东省济南市动物疫病预防与控制中心 250002；2，山东省动物疫病预防与控制中心 250022）

为了解济南市口蹄疫免疫效果，抽检了济南市的12个规模化猪场的血清样品370份，采用液相阻断ELISA方法对其进行O型口蹄疫抗体检测，其中313份免疫合格，免疫合格率为84.59%，检测结果表明济南市规模化猪场口蹄疫免疫效果良好，接种起到免疫预防的作用。

口蹄疫；规模化猪场；O型口蹄疫；免疫抗体；免疫效果；ELISA；济南市

口蹄疫是由口蹄疫病毒 （Foot-and-mouth disease virus，FMD）引起的猪的一种危害严重的烈性接触性传染病，其主要特征为嘴周围、口内、蹄、乳房和乳头出现水疱[1]。口蹄疫1514年首次发现于意大利，1898年确认为病毒，目前世界上有70多个国家存在该病。该病发病率高，几乎达100%，死亡率低，一般只有2～3%[2]。

口蹄疫病毒侵入机体内，首先在侵入部位的上皮细胞繁殖，使上皮细胞逐渐肿大，发生水泡性变性和坏死，于细胞间隙出现浆液性渗出，形成水疱，当机体的抵抗力不足以抵抗病毒的致病力时，则病毒由水疱进入血液而扩散至全身，引起病毒血症，造成病畜体温升高，食欲减退或废绝，病畜的水泡皮、水疱液、唾液、粪便和呼出的空气中含有大量的病毒，通过接触传播，健康家畜可以通过接触病畜的水疱液而感染。口蹄疫潜伏期较短，猪的潜伏期为18～20h，临床主要变现为蹄部水疱，体温升高，口腔黏膜形成小水泡或糜烂，蹄冠、蹄叉等部位出现红、肿、敏感等症状，感染严重时可使蹄壳脱落，病猪鼻镜、乳房也常发生水泡及破溃面，仔猪通常患急性胃肠炎和心肌炎，突然死亡。病理变化主要表现为咽喉、气管、支气管和前胃黏膜可见圆形烂斑和溃疡，心脏有心肌炎病变，心肌松软，心肌切面有灰白色或浅黄色斑点条纹，称为 “虎斑心”。

口蹄疫病毒属小RNA病毒科口蹄疫病毒属，与脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒同属。口蹄疫病毒主要有7个血清型，即O、A、C、AsiaI和SAT1、SAT2、SAT3，不同血清型之间无交叉和交叉免疫现象，O、A、C型几乎遍布亚、非、拉、欧洲各洲，SAT1、SAT2、SAT3主要分布在非洲，AsiaI主要分布在亚洲。北美、中美洲、加勒比海地区以及大洋洲等为口蹄疫的清洁区[3]。我国主要存在O、A和AsiaI3个血清型。

口蹄疫病毒为单股正链RNA病毒，基因组全长8500个核苷酸，由5’-端非编码区 （5’-NCR）一个开放阅读框（ORF）和3’-端非编码区组成，ORF由L基因、P1结构蛋白基因、P2和P3非结构蛋白基因以及起始密码子和终止密码子构成，长约6.5kb，编码成一个大的聚合蛋白，该聚合蛋白在翻译过程中不断裂解产生病毒的结构蛋白和功能蛋白。P1区编码VP4、VP2、VP3和VP1结构蛋白，组装成病毒的衣壳蛋白，P2区编码2A、2B、2C三种非结构蛋白，研究证实P2与病毒的复制和毒力相关；P3区编码3A、3B、3C、3D四种非结构蛋白，其中3A与口蹄疫病毒致病性相关[4]。

口蹄疫的诊断包括临床诊断和实验室诊断，根据口蹄疫的典型症状:高热、厌食、流涎以及在舌面、齿龈、唇内侧、颊部黏膜、趾间皮肤、蹄叉、蹄部出现水疱可初步诊断，确诊需要结合实验室检测进行。

实验室检测包括病毒分离鉴定，分子生物学诊断技术和血清学检测技术等，病毒分离可选取病料进行接种猪原代肾细胞进行病毒分离，也可接种2～7日龄幼鼠进行口蹄疫病毒的分离；分子生物学手段主要包括聚合酶链式反应 （含荧光聚合酶链式反应）等，血清学检测技术包括补体结合试验、病毒中和试验、酶联免疫吸附试验、血凝试验、琼脂扩散试验、金标试纸条等[5]。

目前口蹄疫的防疫在我国实行强制免疫的防控策略，目前常用的疫苗有灭活疫苗、合成肽疫苗等。灭活疫苗以细胞的全病毒进行提纯灭活后作抗原；合成肽疫苗采用病毒衣壳表面抗原作为抗原涉及合成肽疫苗；目前研发阶段的还有蛋白质和病毒亚单位疫苗、DNA疫苗、表达病毒蛋白的复制缺陷性病毒载体疫苗等[4]。

1 材料与方法

1.1 试剂

O型口蹄疫液相阻断ELISA检测试剂盒，由中国农业科学院兰州兽医研究所提供。

1.2 血清样品

2015年1～12月份抽检济南市12个规模化猪场口蹄疫疫苗免疫的血清样品370份。

1.3 主要仪器设备

酶标仪:美国Thermo MK3，洗板机:405 Touch微孔板洗板机；移液器:法国吉尔森。

1.4 检测方法

参照说明书进行。按照 《2015年国家动物疫病监测与流行病学调查计划》进行结果判定，抗体效价≥1∶64判定为免疫合格。

2 结果

从抽检的12个养殖场的监测结果来看，采集的12个猪场中，猪场的口蹄疫免疫效果参差不齐，群体免疫合格率从37.50%到100%不等，其中10个猪场的免疫抗体合格率在70%以上 （农业部群体免疫合格标准），12个猪场共采集了370份血清样品，其中313份免疫合格，样品免疫合格率为84.59%，场点免疫合格率为83.33%。

附表 不同场点口蹄疫免疫抗体检测结果

3 讨论

（1）共抽检了12个规模化养猪场，经过调查，12个猪场都进行了口蹄疫的免疫，说明养殖场对于口蹄疫免疫的重视程度，也从侧面说明了口蹄疫对养殖业的重要性。

（2）抽检的370份样品，样品免疫合格率为84.59%（313/370），场点的免疫合格率为83.33% （10/12），抽检的样品大部分为育肥猪，口蹄疫免疫效果尚算理想，远高于农业部要求的70%的群体免疫合格率。

（3）抽检的12个规模化猪场，10个猪场的口蹄疫免疫合格率达到70%以上，有2个猪场免疫合格率不足70%，表明该2个猪场存在发生口蹄疫的风险，需要进一步加强口蹄疫的防疫。

[1]龚团莲,孙立杰,毛景东,等.口蹄疫研究概述[J].内蒙古民族大学学报（自然科学版）,2001,16（4）:393-396.

[2]冯雪平.口蹄疫疫情与控制[J].中国兽医科技,1986（1）:62-64.

[3]Sobrino F.Saiz M，Jimenez M A，et al.Foot-and-mouth virus：a long known virus，but a current theat[J].Vet Res,2001,32:1-30.

[4]卢曾军,刘在新.口蹄疫病毒研究概况[J].中国兽医科技,2003（2）:69-73.

[5]董志强,张志等.口蹄疫检测技术研究进展[J].中国动物检疫,2007,24（3）:48-50.

陈伟 （1978-），女，山东省济南市人，助理畜牧师，主要从事动物疫病监测与流行病学调查工作。