Ad-ING4对人胃癌AGS细胞凋亡及其p53基因表达的影响

2016-12-21 09:58:12程海燕沈哲
浙江医学 2016年18期
关键词:胃癌检测

程海燕 沈哲

Ad-ING4对人胃癌AGS细胞凋亡及其p53基因表达的影响

程海燕 沈哲

目的 探讨腺病毒介导的肿瘤生长抑制因子4(Ad-ING4)在体外对人胃癌AGS细胞凋亡的作用及其p53基因表达的影响。方法 不同浓度(80、160、320ng/ml)的Ad-ING4作用人胃癌AGS细胞48h后,用AnnexinV-FITC检测细胞凋亡率,RT-PCR检测p53 mRNA的表达,免疫印迹法检测p53蛋白表达水平,并与对照组进行比较。结果 凋亡检测发现,不同浓度Ad-ING4可明显诱导人胃癌AGS细胞凋亡,并呈浓度依赖性(P<0.05);Ad-ING4作用前AGS细胞p53 mRNA和p53蛋白表达水平较低,不同浓度Ad-ING4作用后p53 mRNA和p53蛋白表达水平明显上调,呈浓度依赖性(P<0.05)。结论 随Ad-ING4作用浓度增高,人胃癌AGS细胞出现明显凋亡,其机制可能与p53基因转录活性增强有关。

腺病毒介导的肿瘤生长抑制因子4 人胃癌AGS细胞 细胞凋亡 p53基因

胃癌是消化道最常见的恶性肿瘤,可通过多种途径侵袭、转移,严重威胁人类生命。既往的治疗仅限于手术及化疗等手段,随着对其发生机制的分子水平认识的提高,基因治疗胃癌已成为目前胃癌治疗研究的热点。肿瘤生长抑制因子4(inhibitor of growth family member 4,ING4)是一种重要的抑癌基因,有研究已证明其在胃癌中表达明显下降[1]。用腺病毒介导的ING4(Ad-ING4)感染多种肿瘤细胞,如膀胱癌T24细胞[2]、非小细胞性肺癌细胞[3]等,发现其可促进细胞凋亡。本研究主要检测不同浓度的Ad-ING4在体外对人胃癌AGS细胞凋亡的作用及其p53基因表达的影响。

1 材料和方法

1.1 细胞株及主要试剂 人胃癌AGS细胞、Ad-ING4均由苏州大学细胞与分子生物学教研室惠赠。RPMI1640培养基、噻唑盐(MTT)和AnnexinV-FITC细胞凋亡试剂盒均购自杭州都泰生物科技有限公司。……

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