韩坤煌戴燕彬邹志华张子平王艺磊
(1. 集美大学水产学院 农业部东海海水健康养殖重点实验室,厦门 361021;2. 宁德市富发水产有限公司,宁德 352103;3. 漳州市水产技术推广站,漳州 363000;4. 福建农林大学动物科学学院,福州 350002)
CKS1B参与拟穴青蟹性腺发育的研究
韩坤煌1,2戴燕彬3邹志华1张子平4王艺磊1
(1. 集美大学水产学院 农业部东海海水健康养殖重点实验室,厦门 361021;2. 宁德市富发水产有限公司,宁德 352103;3. 漳州市水产技术推广站,漳州 363000;4. 福建农林大学动物科学学院,福州 350002)
CDC28蛋白激酶调节亚基1B(CDC28 protein kinase regulatory subunit 1B,CKS1B)是高度保守的CKS1家族成员之一,在细胞周期中作为细胞周期蛋白激酶的调节亚基参与调控真核生物的细胞分裂。因此,研究CKS1家族基因参与甲壳动物性腺发育调节的分子机制具有重要的意义。从已构建的拟穴青蟹性腺EST数据库中筛选到CKS1B基因片段,继而克隆出其全长cDNA序列(Sp-CKS1B),并利用qRT-PCR技术检测其在不同组织和性腺不同发育阶段中的差异表达。结果显示,获得Sp-CKS1B的全长cDNA序列722 bp,其中5' UTR为82 bp,3' UTR为379 bp,开放阅读框261 bp,编码86个氨基酸,包含一段典型的CKS保守序列,属于CKS家族蛋白。在不同组织qRT-PCR结果显示,Sp-CKS1B 基因在O5期雌蟹卵巢中的表达水平最高,并与其他组织具有极显著差异(P<0.01);同时,在性腺不同发育阶段的表达结果显示,Sp-CKS1B 基因在精巢T1期的表达量最高,其次为O5期,二者显著高于卵巢O1-O4期的表达水平(P<0.05);而在精巢T3期的表达量最低,并显著低于T1、T2以及卵巢O4、O5期的表达水平(P<0.05)。结果说明了Sp-CKS1B在拟穴青蟹的性腺发育过程中可能具有十分重要的作用。……