周 芳,王金祥,李自安,刘菊芬,白盈盈,杨建勇,朱光旭,潘兴华
骨髓单个核细胞体外培养诱导分化为脂肪细胞
周 芳,王金祥,李自安,刘菊芬,白盈盈,杨建勇,朱光旭,潘兴华
目的体外培养骨髓单个核细胞(BMNCs),并观察其成脂肪细胞分化能力。方法无菌取SD大鼠骨髓制作细胞悬液,差速贴壁法培养第三次贴壁细胞,传代扩增,取3~5代细胞用于实验。流式细胞分析检测CD34、CD44、CD45、CD90、CD144 (VE-cadherin)和血管内皮细胞生长因子受体-2(KDR)表达;STEMPROAdipogenesis Differentiation Kit检测细胞成脂肪分化能力。结果通过差速贴壁法可获得相对单一的BMNCs,流式细胞分析表明培养的BMNCs细胞表达CD34、CD44、CD45及CD90等表面标志,但不表达CD144和KDR;在未经诱导的情况下,培养的BMNCs能自发分化为脂肪细胞;培养BMNCs成脂肪细胞诱导后在第3、5、7 d,成脂率分别为(22.4±3.8)%、(55.6±11.4)%以及(82.4±17.7)%,显著高于诱导培养第1 d[(1.3±1.1)%,P<0.01]。结论骨髓单个核细胞体外培养后可以诱导分化为脂肪细胞。
骨髓单个核细胞;间充质干细胞;脂肪细胞分化
人脂肪细胞在整个成年期都存在更新换代,具有脂肪分化潜能的干、祖细胞的持续性供应对于维持脂肪生成极其重要。最新研究表明,骨髓源性干细胞(BBSCs)可参与脂肪生成。对于一般患者,BSCs对皮下脂肪细胞的贡献率大约占10%,对于肥胖患者则可高达25%,证明至少在骨髓移植患者,骨髓可以被认为是脂肪前体细胞的储存库[1]。骨髓间充质干细胞(BMSCs)可向脂肪细胞分化,然而其向脂肪细胞分化能力并不一致,甚至有文献报道人原代培养的BMSC在体外诱导时,绝大部分细胞并不能分化为脂肪细胞[2],因此,除了BMSCs外,骨髓内其他细胞极可能也具有脂肪细胞分化潜能。……