血清Afamin在冠心病中临床意义

曾伯石，周青山

血清Afamin在冠心病中临床意义

曾伯石，周青山

目的检测冠心病(CHD)患者血清Afamin浓度水平，并探讨Afamin在冠心病中的临床意义。方法酶联免疫反应方法检测167例CHD患者（CHD组）及127例健康对照者（对照组）血清Afamin水平，同时收集所有受试者血糖、血脂等临床资料。结果CHD组血清Afamin浓度明显高于对照组 (417.78±55.87vs231.67±71.71,P＜0.01)。相关分析表明，CHD组血清Afamin水平与MDA(r=0.271，P=0.011)、hs-CRP(r=0.191，P=0.021)、TNF-α(r=0.212,P=0.034)、HOMA-IR(r=0.161，P=0.021)水平呈正相关，但与HDL-C(r=-0.191，P=0.029)、GSH(r=-0.376，P＜0.01)水平呈负相关；多重线性回归分析提示，MDA和HOMA-IR是影响Afamin水平的独立相关因素；血清Afamin诊断冠心病ROC曲线下面积为0.957，最佳截断点为460.11 ng/ml。结论血清Afamin与胰岛素抵抗、氧化应激密切相关，有助于冠心病诊断以及病情检测。

Afamin；冠心病；胰岛素抵抗；丙二醛

冠心病(coronary heart disease，CHD)主要是一种由于冠状动脉粥样硬化导致心肌供血不足的临床代谢综合征[1]。冠心病发病率高，危害大，严重影响广大人民的身心健康。冠心病的确切发病机制至今尚未明了，国内学者现一致认为内皮细胞损伤是冠心病发生发展的中心环节[1-2]，而其损伤与内皮细胞氧化应激以及机体胰岛素抵抗密切相关[1-2]。Afamin又称维生素E结合蛋白，是一种主要由肝脏分泌的具有多种生物学效应的糖蛋白[3]。既往研究发现，Afamin广泛参与免疫、炎症反应[4]。近年研究发现，Afamin能够与硫氧还蛋白结合，导致氧化应激[5]；Afamin表达水平增强会导致胰岛素抵抗相关[6]。鉴于氧化应激和胰岛素抵抗在冠心病发生发展中的重要作用[7]，本研究通过检测血清Afamin在冠心病患者中的表达水平，以探讨其在冠心病中的临床意义。

1 对象与方法

1.1 研究对象 收集2014年1月～2015年8月在我院心内科导管室经过冠状动脉造影明确诊断为CHD患者167例为CHD组，其中男86例，女81例，平均年龄（48.12±13.23）岁。选取同期健康体检正常的127例为对照组，其中男65例，女62例，平均年龄（49.35±14.12）岁。所有操作和测量均征得受试者同意，并签署知情同意书。

1.2 检测指标

1.2.1 人体生理指标 包括身高、体重、腰围，按相关公式计算人体质量指数(BMI)。其中体重指数=体重/身高的平方。

1.2.2 血生化指标 清晨抽取受试者空腹静脉血，按照常规经典方法检测空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-c)、低密度脂蛋白(LDL-c)及超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平以及空腹血糖水平(FBG)；采用南京建成生物公司相关试剂盒检测丙二醛(MDA)水平；采用武汉谷歌生物有限公司相关试剂盒检测血清Afamin和还原型谷胱甘肽(GSH)水平。利用放射免疫法检测血清胰岛素水平(FINS)，计算胰岛素指数(HOMA-IR)。HOMAIR=FBG×FINS/22.5）。

1.3 统计学方法 应用SPSS18.0软件进行统计学分析，计量资料以±s表示，两组间比较采用t检验；计数资料采用χ2检验。Afamin与血生化指标之间的关系采用Pearson相关法分析；多元线性回归探讨影响血清Afamin因素。Logistic回归分析冠心病发病的危险因素；进行受试者Afamin对CHD诊断工作特征(ROC)曲线分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较 CHD组和对照组在年龄、性别比较无统计学差异（P＞0.05），而两组的BMI、腰围、MDA、LDL-C、TG、TC、hs-CRP、HOMA-IR、HDL-C和GSH均有统计学差异 （P＜0.05或P＜0.01）。见表1。

表1 两组一般资料比较

2.2 两组血清Afamin水平比较 CHD组血清Afamin浓度明显高于对照组 (417.78±55.87vs231.67± 71.71,P=0.000)。

2.3 相关分析以及多元线性回归分析 CHD组血清 Afamin与年龄 (r=0.404，P=0.123)，BMI(r= 0.323，P=0.389)、腰围(r=0.378，P=0.312)、LDL-C(r= 0.245，P=0.212)、TG(r=0.451，P=0.131)、TC(r=0.537，P=0.271)无相关性，而与HDL-C(r=-0.191，P=0.029)、GSH(r=-0.376，P=0.000)负相关，与MDA(r=0.271，P= 0.011)、hs-CRP(r=0.191，P=0.021)、TNF-α(r=0.212,P= 0.034)、HOMA-IR(r=0.161，P=0.021)正相关。以Afamin为因变量，上述与之呈显著性关系的指标作为自变量，进行多元线性逐步回归分析，结果显示MDA、HOMA-IR是影响Afamin水平的重要因素。相关回归方程YAfamin=321.36－12.26XMDA-9.25XHOMA-IR（R2=0.812, F=40.36，P=0.020）。

2.4 Logistic回归分析冠心病诊断的危险因素将表1中两组间有差异的相关因素——BMI、腰围、MDA、LDL-C、TG、TC、hs-CRP、HOMA-IR、HDL-C和GSH进行Logisticc回归分析，结果表明Afamin (OR=1.012，95%CI：1.007～1.102，P=0.034)，腰围(OR= 1.213，95%CI：1.131～1.412，P=0.021)，hs-CRP（OR= 1.022，95%CI：1.013～1.125，P=0.041)是CHD发病的危险因素。

2.5 血清Afamin冠心病诊断的ROC曲线 血清Afamin对冠心病诊断ROC曲线下面积为0.957，95%CI：0.933～0.980，最佳截点为460.11 ng/ml(敏感度为71.4%，特异度89.1%，P=0.039)，约登指数为0.606。见图1。

图1 血清Afam in诊断CHD的ROC曲线

3 讨论

在冠心病发生发展过程中，存在诸多的病理生理方面的改变，其中氧化应激在冠心病的发生发展进程中起着至关重要的作用[1]。生理情况下，机体氧化应激和抗氧化应激系统处于稳态平衡状态，即机体内产生氧自由基形成与脂质过氧化反应的终末产物和保护性抗氧化物质处于动态平衡状态。在冠心病发展过程中这种平衡被打乱，导致内皮细胞出现氧化损伤，从而促使冠心病的发生发展[7]。

Afamin的基因位于人染色体1q21-22，包含8个外显子，长4174 bp。在冠心病模型大鼠中，Afamin表达降低，会导致氧化损伤发生，提示Afamin可以调节氧化应激[8]。既往已对Afamin在肿瘤、炎性肠疾病、糖尿病等疾病临床意义进行大量的研究[9-11]，然而Afamin在冠心病患者血清表达水平以及临床意义鲜见报道。本研究发现，冠心病组患者血清Afamin浓度明显高于健康对照组；相关分析发现，Afamin与HDL-C、GSH呈负相关，与MDA、hs-CRP、HOMA-IR呈正相关。Koninger在对Afamin在多囊卵巢综合症临床意义进行研究时亦发现，多囊卵巢综合症患者Afamin血清水平明显高于正常对照组人群，Afamin与胰岛素敏感性亦成正比，但同时发现Afamin与体重指数成正比[9]。Dieplinger等[10]发现，剔除Afamin基因时，增强大鼠胰岛素敏感性。上述研究提示，血清Afamin浓度增高可能是导致胰岛素抵抗的原因之一。其机制可能是Afamin可以激活NLRP3炎症体，促使无活性的caspase-1前体转化为活性caspase-1，后者介导IL-1β的释放。Zhou研究发现，Afamin在多囊卵巢综合症患者炎症调节过程中发挥重要作用，这可能是Afamin与hs-CRP呈正比的原因[11]。综上所述，在血清Afamin增高时，可介导氧化应激、胰岛素抵抗以及炎症的发生，最终导致冠心病发生发展。然而，血清Afamin在冠心病发病中的作用分子机制并未见明确报道。

目前在冠心病诊断方面问题比较突出。虽然冠脉造影检查是冠心病诊断以及病情检测的 “金标准”，但因存在有创性、取样标本穿刺偏移、价格高昂、具有一定的风险等缺陷，严重制约着其在临床中的广泛应用[12]。临床迫切需要操作简单、且重复性好的无创诊断方法，既便于冠心病诊断，又利于病情监测。血清生物标志物诊断因其重复性好、取样创伤小，近年来来在临床CHD病情检测方面得到广泛应用[13]。本研究通过绘制ROC曲线分析，发现血清 Afamin对冠心病检验ROC曲线下面积为0.957，最佳截点460.11 ng/ml(敏感度为71.4%，特异度89.1%，P=0.039)，约登指数分别为0.606。提示血清Afamin用于冠心病疾病诊断以及病情监测方面检验效能良好，值得进一步深入研究。

综上所述，Afamin与冠心病发生发展中的氧化应激、炎症、胰岛素抵抗紧密相关，Afamin在CHD的诊断和检测方面具有重要的临床意义和良好的研究前景。

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Clinical significance of serum Afamin in CHD

Zeng Boshi,Zhou Qingshan ICU,Renmin Hospital of Wuhan University,Wuhan,Hubei,430060,China

Objective To detect the levels of serum Afamin in patients with coronary heart disease (CHD),and to analyze the clinical significance of Afamin in CHD.MethodsEnzyme linked immunosorbent assay (ELISA)was used to detect the levels of serum Afamin in CHD patients(the CHD group,n=167)and healthy persons(the control group,n=127).Such clinical data as blood glucose and blood lipid of all subjects were collected.ResultsThe concentration of serum Afamin in the CHD group was much higher than that in the control group(417.78±55.87 vs 231.67±71.71;P＜0.01).As indicated by relevant analysis,the levels of serum Afamin in the CHD group was positively correlated to the levels of MDA(r=0.271,P=0.011),hs-CRP(r=0.191,P=0.021),TNF-α (r=0.212,P=0.034)and HOMA-IR(r=0.161,P=0.021)but negatively correlated to the levels of HDL-C(r=-0.191,P=0.029) and GSH(r=-0.376,P＜0.01);multiple linear regression analysis indicated that MDA and HOMA-IR were independent related factors affecting the levels of Afamin;the area under the ROC curve for the diagnosis of CHD with Afamin was 0.957,and the best cut-off point was 460.11 ng/m l.ConclusionSerum Afamin is closely related to oxidative stress,inflammation and insulin resistance in CHD.It is useful for the diagnosis and disease surveillance of CHD.

Afamin;CHD;insulin resistance;MDA

R 541

A

1004-0188（2016）12-1437-03

10.3969/j.issn.1004-0188.2016.12.025

2015-11-10）

430060武汉，武汉大学人民医院重症监护科

周青山，E-mail：zhouqingshano6@medmail.com.cn