多奈哌齐抑制实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型血脑屏障渗透性的研究

江滢 刘莹莹 马丽丽 陈晓红

·基础研究论著·

多奈哌齐抑制实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型血脑屏障渗透性的研究

江滢 刘莹莹 马丽丽 陈晓红

目的 探讨多奈哌齐对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型血脑屏障渗透性的影响。方法 将48只6～8周龄雌性C57BL/6小鼠分为多奈哌齐组(19只)、PBS 组(19只)与空白对照组(10只)。将多奈哌齐组及PBS组制备为EAE小鼠模型，在接种免疫后第13日，将多奈哌齐2 mg/(kg·d)溶解于PBS中对多奈哌齐组进行灌胃；而PBS组只予PBS进行灌胃。对EAE小鼠进行临床症状评分和组织学评估(炎症评分及脱髓鞘评分)，利用伊文思蓝对EAE小鼠脑组织的蓝染程度评估血脑屏障渗透性，用蛋白免疫印迹法检测EAE小鼠脑组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达情况。结果 多奈哌齐组的临床症状评分低于PBS组的临床症状评分 (t=4.351,P<0.001)。多奈哌齐组的炎症评分低于PBS组(t=6.325,P<0.001)；PBS组的腰髓有大片的髓鞘脱失，但多奈哌齐组脱髓鞘病变较其少，2组评分比较差异有统计学意义(t=3.308,P=0.008)。与空白对照组相比，PBS组(t=8.621,P<0.001)和多奈哌齐组(t=9.974,P<0.001)脑内伊文思蓝含量均较高；与PBS组相比，多奈哌齐组脑内伊文思蓝含量较低(t=2.286,P=0.045)。与PBS组相比，多奈哌齐可抑制MMP-2(t=4.679,P=0.010)和MMP-9 (t=5.822,P=0.001)的表达。结论 多奈哌齐可降低EAE小鼠血脑屏障的渗透性。

多奈哌齐；实验性自身免疫性脑脊髓炎；血脑屏障；基质金属蛋白酶

多发性硬化(MS)是最常见的发生于青年人的中枢神经慢性炎性脱髓鞘疾病[1]。实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠是研究MS免疫病理学机制及其实验治疗的最佳动物模型[2]。研究显示，EAE的特征性病理变化是血脑屏障破坏和T细胞进入中枢神经系统，导致脑内细胞因子、基质金属蛋白酶(MMP)和自由基的含量升高，最终导致髓鞘脱失和神经传导受阻[1,3]。多奈哌齐是一种具有高选择性的胆碱酯酶抑制剂，可用于阿尔茨海默病的治疗，且目前发现其具有抗炎效应及神经保护作用[4-7]。……