胰腺癌细胞总RNA转染树突细胞与胰腺癌-树突融合细胞激发特异性细胞毒T淋巴细胞能力的比较研究

陈 江 李宏宇 王 迪 许文达 郭晓钟

胰腺癌细胞总RNA转染树突细胞与胰腺癌-树突融合细胞激发特异性细胞毒T淋巴细胞能力的比较研究

陈 江 李宏宇 王 迪 许文达 郭晓钟

目的比较人胰腺癌MiaPaCa-2细胞总RNA电转染树突细胞（Dendritic Cell,DC）与DCM iaPaCa-2融合细胞体外激发抗原特异性细胞毒T淋巴细胞（Cytotoxic T Lymphocyte,CTL）能力的差异。方法自6例胰腺癌患者外周血单核细胞中分离、培养DC。使用电穿孔法将M iaPaCa-2细胞总RNA转染DC，使用细胞融合方法将胰腺癌M iaPaCa-2细胞抗原负载DC，以未负载抗原的DC为对照。使用流式细胞术（FCM）检测PE-MUC/FITC-CD86抗体双标细胞评估融合效率；四甲基偶氮唑盐（MTT）检测转染各组DC存活率；混合细胞培养法评价各组DC体外刺激自体T淋巴细胞增殖能力；ELISA法检测各组DC体外激发抗原特异性CTL因子释放量。结果采用PEG-DMSO诱导的DC与M iaPaCa-2的融合细胞同时表达DC表型和MUC1分子，CD86与MUC1双阳性表达率为（42.3±7.30）%;融合细胞组DC存活率呈时间依赖性下降，转染后96h的存活率降低至62.81%，而M iaPaCa-2总RNA转染组DC细胞存活率稳定在85%左右，两组间差异有统计学意义（P＜0.05）；转染M iaPaCa-2总RNA DC刺激自体T细胞增殖指数（DC∶T=1∶10）为8432±611.25，显著高于DC-MiaPaCa-2融合细胞（DC∶T=1∶10）5672±107.51（P＜0.05）；且MiaPaCa-2总RNA转染DC激发特异性CTL分泌IL-12p70、IL-10和IFN-γ细胞水平亦显著异于DC-M iaPaCa-2融合细胞（P＜0.05）。结论胰腺癌细胞总RNA转染DC较胰腺癌-树突融合细胞有更强的体外抗原特异性CTL激发能力。

树突细胞；RNA转染；细胞融合；胰腺肿瘤；细胞毒性T淋巴细胞

胰腺癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，多数病例在发现时已属晚期，手术治疗及放、化疗作用有限，患者预后极差，临床迫切需要探索新的有效治疗手段[1]。……