高效液相色谱法对膨化食品中合成色素的测定

□ 房 磊 天津市滨海新区大港产品质量监督检验所

高效液相色谱法对膨化食品中合成色素的测定

□ 房 磊 天津市滨海新区大港产品质量监督检验所

人工合成色素往往比天然色素的色彩更为鲜艳，并能长久持续的保存。同时，人工合成色素比天然色素的价格更为低廉，且坚牢度与稳定性较高。但食品中添加的色素往往属于非营养成分，且人工合成色素在制造过程中大多数会选择煤焦油作为提炼的原料，因此在食品中过多的添加人工合成色素可能会对人们的身体健康造成一定的影响。再者，一些昧着良心的食品生产厂家为提高食品的销量，常会在食品中过量地添加人工合成色素，对消费者的健康产生一定的影响。所以，检测食品中的人工合成色素十分必要。本文利用高效液相色谱法测定膨化食品中合成色素，不仅仅操作简单、快速、准确，并且还具有良好的测定效果。

材料和方法

材料与试剂

水，杭州娃哈哈集团饮用纯净水5 96m L；氨水，国药集团化学试剂有限公司；甲酸，国药集团化学试剂有限公司；氨，国药集团化学试剂有限公司；诱惑红，天津市卫生防疫中心，0.5 m g/m L；日落黄，国家标准物质研究中心，0.5 m g/m L；胭脂红，国家标准物质研究中心，0.5 m g/m L；甲醇，di k mAPure；乙醇，di k mAPure；乙觅菜红，国家标准物质研究中心，0.5 m g/m L；新红，农业部环境保护科研监测所，0.5 m g/m L；亮蓝标准品，国家标准物质研究中心0.5 m g/m L；柠檬黄，国家标准物质研究中心，0.5 m g/m L。其余试剂均为分析纯。

仪器与设备

Mi l li-Q去离子水制备系统，美国Mi l liPor e公司；K Q-5200d E型超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；AL20 4型电子天平，梅特勒-托利多公司；Td L-5-A型离心机，上海安亭科学仪器厂；wAterSACQ Ui tY H-ClASs超高效液相色谱仪，配有二极管阵列检测器、自动进样器、柱温箱、高压泵和EmPower2色谱工作站。

色谱条件

（1）色谱柱。进样体积：5 μg；柱温：25 ℃；ACQ Ui tY UPLCBeHC18（2.1 m m×50m m， 1.7 μm）。流速：0.25 m L/mi n；检测波长：254n m和627 n m；流动相：甲醇和乙酸铵（0.02mol/L）水溶液；洗脱梯度见表1。

（2）标准溶液的配制。将质量浓度0.5 m g/m L的色素单标溶液，根据需要混合，并用娃哈哈饮用纯净水稀释成质量浓度分别为1.0、5.0、25.0、5 0.0、100.0 μg/m L和20 0.0 μg/m L的混合标准溶液，

经0.22μm滤膜过滤后待测。

结果

新红黄、柠檬黄、胭脂黄、觉菜红黄和日落黄在1～200μg/m L，亮蓝、诱惑红黄在2～200μg/m L的范围内，线性关系良好，相关系数0.999 6～0.999 9，平均回收率为8 7%～105%，相对标准偏差0.5%～3.1%，检出限为0.1 0～0.30m g/k g。

表1 洗脱梯度

结语

本文采用乙醇＋氨水＋水（7＋2＋1）的混合提取液对样品存在的人工合成色素直接进行超声提取，此操作不仅能缩短预处理的时间，还能缩短人工合成色素的提取时间。本文构建的UPLC法，在短柱填充时选择小颗粒填充，不仅能够包含较高的柱效，还具有低扩散体积的特点。本实验中的流动相选择了甲醇和乙酸铵（0.02mol/L）水溶液。与此同时，针对食品中存在的人工合成色素的检测构建了UPLC进行相关检测。本文研究结果表明，该方法具有灵敏、准确、经济、快速四大特点，且该方法不仅能够有效地检测膨化食品，还能有效地监控膨化食品市场，使我国膨化食品的市场安全得到有效保障。选择梯度洗脱，变化波长检测膨化食品中亮蓝、胭脂红、日落黄，主要是利用每种色素具备的最大可见吸收波长，间接地提高检测灵敏度，降低干扰峰对目标峰的影响。在对选择样品的进行处理前，需在试样清液中添加了聚酰胺粉，然后根据试样清液的具体吸附情况确定样品添加的聚酰胺粉的剂量，从而使色素吸附的状况相对于国家标准规定方法更完全。在处理选择的样品前中，首先是样品的定容，然后再对样品高速离心，最好并取高速离心的上清液，选择聚酰胺粉法过注射器管小柱，然后使多个样品同一时间共同处理，并且能够使目标成分提取比较完全，且相对于国家标准规定的垂融漏斗抽滤法的损失较少、操作也简单易行。