快速检测试剂盒在粮谷转基因检测中应用

□ 徐 晶 哈尔滨市农产品质量安全检验检测中心 蒲国锋 黑龙江省农业科学院大豆所李环宇 张立群 哈尔滨市农产品质量安全检验检测中心

快速检测试剂盒在粮谷转基因检测中应用

□ 徐 晶 哈尔滨市农产品质量安全检验检测中心 蒲国锋 黑龙江省农业科学院大豆所
李环宇 张立群 哈尔滨市农产品质量安全检验检测中心

随着转基因作物的快速发展，转基因产品已迅速进入到人们的生活中。为了维护人民群众的食品安全，很多国家都要求转基因食品中的转基因成分能够有效被检测出来，进一步对检测机构提出了严格的要求，完善检验标准十分迫切。本文表明，不同品牌的转基因快速检测试剂盒能够对转基因产品准确定性，检测时间短，工作效率高，能够满足检测工作的需要。

转基因食品；快速检测试剂盒；快速检测法

哈尔滨市作为黑龙江省重要的稻谷、玉米、大豆的生产基地，开展粮食作物种子转基因监测，对依法禁止种植转基因粮食作物，从源头上保证食品安全具有重大意义。

目前，国内外检测生物技术产品最常用的方法是荧光定量检测方法，方法具有准确性高、检出限低、适用范围广等特点，但是检测设备昂贵，检测周期长[1]。快速检测试剂盒具有成本低、特异性强、灵敏度高、通用性广和反应速度快的优点[2]。中国农业科学院油料作物研究所研制的“Cry1Ab/Cry1Ac快速检测试纸”在14 min内从40份不同水稻和玉米样品中准确检测出全部阳性盲样样品，成为第一个提交检测结果并全部正确的参试检测试纸[3]。

为保证转基因试剂盒检测准确率，2017年4月，以中心2016年规定的“转基因试纸条快速检测技术操作规程”为依据[4]，进行了不同品牌转基因快速检测试剂盒比对试验。

1 材料和方法

1.1 材料及试剂

试验材料分别来自本地不同地区农民种植品种，试纸盒分别为两个不同公司产品，分为A组和B组（如下），纯净水、一次性样品管（2 mL）、一次性胶头滴管和振荡培养箱。

A组

BT Cry1Ab/Ac *（检测植物样本中是否含有特异性抗虫转基因BT产物BT Cry1Ab/Ac蛋白）。

CP4 EPSPS *（检测植物样本中是否含有特异性抗除草剂转基因CP4 EPSPS蛋白）。

B组

BT Cry1Ab/Ac * Test(检测植物样本中是否含有特异性抗虫转基因BT产物BT Cry1Ab/Ac蛋白）。

CP4 EPSPS * Test（检测植物样本中是否含有特异性抗除草剂转基因CP4 EPSPS蛋白）。

1.2 试验方法

试验选取含有BT转基因玉米样品3份（经确证），普通玉米样品28份，大豆样品10份，水稻样品8份，打乱顺序编号，随机检测，每个样品重复5次。用实验磨将样品粉碎，取适当数量分别装入2 mL离心管中，加入提取剂（不同品牌提取剂不同），样品量与提取剂比例为1︰3，振荡2 min，静止30 s，将试纸条分别插入离心管中观察记录。

2 结果与讨论

快速检测法应用了双抗体夹心法，将CP4 EPSPS 蛋白特异的抗体，偶连于显色试剂，并渗入试纸条[5]。当试纸条被插入含有CP4 EPSPS 蛋白的植物组织的小量萃取物时，偶连抗体与蛋白之间就发生了结合，与偶连于显色剂上的某些但不是全部抗体形成夹心物。膜片含有两个捕获区，一个捕获区捕获结合的CP4 EPSPS 蛋白，一个捕获区可捕获显色试剂。当夹心物和未反应的显色试剂被膜片上的特定区域捕获时，这些捕获区就显现出红色。若膜片上仅存在一条红色对照线，便说明受检样品为阴性；若存在两条线，说明受检样品为阳性。

2.1 质控线和检测线显色时间比较

转基因试剂盒结果通过质控线和检测线来判定。质控线表示试纸条方法使用正确，结果可控，检测线判定样品结果。

结果表明，质控线在上，检测线在下。A组和B组两类产品质控线显色时间分别为1 min、1.3 min，A组颜色清晰，达到稳定时间短。检测线A组和B组显色时间分别为2.5 mim和3 min，A组时间短。

2.2 样本检测结果比较

试验选取49份样品，结果表明：两组产品检测出2号、8号、23号样品为阳性，表明含有特异性抗虫转基因BT产物BT Cry1Ab/Ac蛋白，其他为阴性。检测结果与试验设计相同，结果准确。

2.3 产品性能比较

两组产品都可以检测范围相同，分别为玉米、水稻和大豆等粮食作物的种子和叶片，检测灵敏度高，检测过程中要求基本相同。

从产品使用说明书中比较，两组产品检测时对样品要求相同，两组产品振荡提取时间相同，区别在于A组产品提取溶液为纯净水，B组产品按照操作说明配制提取溶液。

3 结论

以上比对结果表明：两组产品检测对环境要求低，操作步骤简单，准确度高，产品检测速度快，操作简单，灵敏度更高。比对试验结果为相关检测机构开展转基因成分的快速检测提供了更多选择和技术支撑。

[1]丁耀魁,沈娟,马黎黎.快速检测试纸条法在大豆转基因检测中的应用[J].粮油食品科技,2010(2):45-46.

[2]任春华,亢卫民,罗惠明,等.测量方法确认技术及其指标评价[J].理化检验-化学分册,2006(8):677-681.

[3]卢利军,马书民,李爱军,等.检测实验室方法确认技术理论和应用[J].现代测量与实验室管理,2006(3):47-51.

[4]王绪卿.食品化学检验方法的确认[J].中国食品卫生杂志,2003(2):98-107.

[5]张广远,孙红炜,李凡,等.转基因玉米MIR162转化事件特异性检测方法及其标准化[J].作物学报,2013(7):1141-1147.