青岚湖外湖河蚬的胚胎发育及胚后发育

陶志英++邓勇辉++李彩刚++张桂芳++丁立云++王庆志

doi：10.15889/j.issn.1002-1302.2016.10.088

摘要：显微观察并拍摄河蚬从受精卵到蚬苗发育过程的形态特征，河蚬的受精卵为黑色球形，卵内径约为 100 μm；3～7 h后担轮幼虫出膜，再经面盘幼虫到D形幼虫，此时壳长约200 μm；随着内部器官组织的生长发育及外部形态的变化，30 d后成稚贝，50 d后可见蚬苗。

关键词：受精卵；蚬苗；发育过程；形态特征

中图分类号： S961.2文献标志码： A文章编号：1002-1302（2016）10-0305-03

收稿日期：2016-12-13

项目基金：江西省科技支撑计划（编号：20132BBF60055）。

作者简介：陶志英（1983—），女，安徽桐城人，助理研究员，主要从事水产生态和繁养殖研究。

通信作者：邓勇辉。E-mail：161628535538@qq.com。河蚬（Corbicula fluminea）为瓣鳃纲真瓣鳃目异齿亚目蚬科蚬属双壳类软体动物，其摄食底栖藻类、浮游生物、有机碎屑等。河蚬具有很强的耐饥和耐旱力，能很好地富集城市污泥、水体重金属、水体富营养化、农药等水体有机污染物，被作为生态修复生物而受到环境保护者的重视和开发运用。河蚬是理想的环境指示生物，对稳定生态平衡起着重要作用，是生态系统中重要的一员。然而，近年来我国河蚬大量出口、水生物资源利用和渔业结构不合理、过度捕捞、湖泊污染严重、盲目围垦等问题导致天然资源日趋枯竭，制约了河蚬产业的发展，开展河蚬的人工繁殖和苗种培育工作势在必行。已有学者对河蚬人工繁殖中胚胎发育的特征进行了报道，顾敏强等综合了龚惠卿等的研究结果[1]，对河蚬胚胎发育分期报道了不同发育阶段的特点[2]。王庆志等系统论述了大洋河河蚬性腺发育、生殖周期、胚胎发育的详细内容[3]。Kraemer等从性别机制与繁殖方式相关性的角度报道了河蚬的胚胎发育[4]。本试验在人工繁殖成功的基础上，连续观察河蚬胚胎发育及胚后发育的全过程，并以显微拍照进行记录，详细描述了各阶段的特征，旨在为河蚬受精卵孵化和蚬苗培育提供依据。

1材料与方法

于2015年5—7月分批次对河蚬进行人工繁殖。亲本取自青岚湖外湖，采用阴干、化学浸洗联合流水冲洗刺激的方法诱导催产获得受精卵，在pH值为6.22～8.03、室内水温为23.5～28.0 ℃的条件下连续充氧孵化；每天换水1次，每次换水量为1/3，投喂小球藻和过滤池塘水收集藻类，不定时取样进行显微镜观察拍照并记录。

2结果与分析

2.1胚胎发育膜内阶段

受精卵：于2015年6月1日傍晚刺激诱导，于6月2日11：00左右见到白色涕状物（图1-A），显微镜下呈球形、黑色，外表包被1层胶质卵膜即为受精卵，卵内径（不含卵膜）约为100 μm（图1-B）。

桑椹期：受精后5～7 h，受精卵经细胞裂殖呈桑椹形状（图1-C）。

担轮幼虫期：受精后8～14 h，早、中期见倒锥形，顶端有1束渐细长纤毛，最长的形似长鞭毛被称为顶毛，在膜内旋转，鞭毛不断撞击卵膜，带同膜作旋转运动。后期中上端有纤毛环，破膜而出，清晰可见。在水中形似桃子、蘑菇云或陀螺，并作滚动式运动（图1-D）。

2.2胚胎发育出膜后阶段

面盘幼虫期：受精后24～48 h呈圆盘状，面盘外形闭合但不能完全闭合，趋向D形，顶毛和纤毛环逐渐消失（图1-E、图1-F）。

D形幼虫期：受精后48～72 h可见D形幼虫。早期壳呈D形，薄而透明，可见内部结构，壳长约为200 μm，棒状足快速向前伸缩，带动D形壳作运动（图1-G、图1-H）。 中、后期顶部壳腺清晰可见，壳形趋向卵圆形。可见内部不停摆动的胃，内有食物呈绿色，透明的心脏持续跳动，壳边缘可见放射状外套膜雏形，隐约可见同心生长纹与壳面放射肋，进水口已形成（图1-I、图1-J）。镜检壳长、壳宽分别为374、335 μm（图1-J）。

壳顶幼虫期：受精后7～11 d，早期肠、胃、心脏的内部结构更清晰，可见胃部褐色晶杆搅动，围心腔心室有规则地收缩，围心腔由透明膜包裹；可见壳顶部、绞合部雏形（图1-K）。中期壳顶部凸出，壳形趋向三角卵圆形，进水口、出水口器官清晰明显且易区分。足变扁平，足前段似三角形，伸缩划动作匍匐运动（图1-L）。后期可见足基部的眼点，足更加扁平，伸缩足似三角形刀片，呈纯白色，其边缘薄而透明；进出口、出水口器官与外套膜逐渐融合，只见口边纤毛裸露，外套

膜及鳃清晰可见，绞合部清晰，壳顶显著凸出，同心生长纹与壳面放射肋更清晰，壳形呈明显三角卵圆形（图1-M至图1-O）。镜检壳长、壳宽分别为2 523、2 114 μm（图1-O）。

2.3埋栖阶段

稚贝：受精后30～37 d，足更扁、更大，与成年蚬斧足一致；同心生长纹与壳面放射肋显著，壳后端近壳顶处只可见胃部晶杆摆动；进出水口、外套膜合入壳内，壳顶膨凸，贝壳呈金黄色（图1-P至图1-R）。

蚬苗（幼蚬）：受精后50～57 d，壳顶、绞合部更加结实，整体趋向等边三角形，壳面出现斑点和斑纹，与成年蚬一致（图1-S）。

受精后60～67 d，镜检壳长、壳宽分别为669～1 050、565～938 μm（图1-T）。受精后90 d，镜检壳长、壳宽、两壳膨胀处分别约为4、3、1.5 mm（图2-Ⅰ至图2-Ⅲ）。受精后 110 d，镜检壳长、壳宽、两壳膨胀处分别约为5、3、2 mm（图2-Ⅳ至图2-Ⅵ）。受精后156 d，镜检壳长、壳宽分别约为8、7 mm，距壳宽为16 mm的成年蚬需几个月的生长（图2-Ⅶ、图2-Ⅷ）。活动中的蚬苗见图2-Ⅸ、图2-Ⅹ。

3结论与讨论

3.1受精卵到D形幼虫所需时间

本研究于受精后48～72 h见到D形幼虫，与顾敏强等报道的36～72 h[1]相近，与王庆志等报道的80～100 h[3]相差较多。造成差异的原因可能为水温不同，顾敏强等的研究中水温为23～26 ℃[1]，王庆志等的研究中水温为20～22 ℃[3]，本研究中水温为23.5～28.0 ℃。

3.2青岚湖外湖河蚬的繁殖方式

本研究中河蚬卵排出后受精为白色涕状黏连物，很快沉底散开并消失。卵裂阶段在膜内进行，至担抡幼虫出膜，在水中到处游动，逐渐沉底长成D形幼虫。可见，青岚湖外湖河蚬将成熟精卵直接排出，在体外完成受精和胚胎发育，因此其繁殖方式为非孵育型[5]。吴小平研究发现，陈家湖河蚬内鳃腔未见幼虫，因此其繁殖方式为非孵育型[6]，本研究结论与之一致。

3.3蚬苗生长的影响因素

常亚青等研究发现，河蚬胚胎经15～30 d可发育为幼蚬，3个月蚬苗壳长达1.1 cm[7]。在本研究中，河蚬胚胎发育30～37 d见稚贝，50～57 d见幼蚬，3～4个月蚬苗壳长仅为0.4～0.5 cm，可能的原因为试验中饵料不足。由研究结果可知，壳顶幼虫后期壳长大于蚬苗壳长，蚬苗壳长也各不相同，这是发育不同步的结果。河蚬胚胎从D形幼虫到幼苗壳长的生长及其影响因素，以及胚胎发育所需的有效积温有待进一步研究。

参考文献：

[1]龚惠卿，王众，孙金福，等. 河蚬Corbicula fluminea（Müller）人工繁殖技术研究[J]. 现代渔业信息，2001，16（1）：22-23，37.

[2]顾敏强，王众. 河蚬胚胎发育观察及分期的探讨[J]. 现代渔业信息，2001，16（10）：28-29.

[3]王庆志，常亚青. 大洋河河蚬的繁殖生物学研究[J]. 大连水产学院学报，2010，25（1）：8-13.

[4]Kraemer R L，Galloway M L. Larval development of Corbicula fluminea（Müller）（Bivalvia：Corbiculacea）：an app raisal of its heterochrony[J]. American Malacological Bulletin，1986，4（1）：61-79.

[5]刘月英，张文珍，王跃先，等. 中国淡水经济动物志：淡水软体动物[M]. 北京：科学出版社，1979：120-123.

[6]吴小平. 河蚬（Corbicula fluminea）和江蚬（C.fluminslis）的种群生态学比较[M]//贝类学论文集. 北京：科学出版社，1990：54-61.

[7]常亚青，沈和定，钟幼平，等. 贝类增养殖学[M]. 北京：中国农业出版社，2007：140-141.