紫草素提取工艺优化的研究

陈梦婷+杨芸+魏艳丽+覃倩菲+杜泓+涂豪慧

摘 要：以紫草素作为研究对象，利用正交试验法，以紫草的粉碎目数、乙醇用量、提取时间、提取温度四因素安排实验，选取超聲提取法的最佳条件。与传统方法（回流提取，索氏提取，渗漉）提取紫草素进行比较，超声提取法紫草素的提取率提高了2倍，同时简化了提取工艺，缩短时间且节省溶剂用量。

关键词：提取工艺；紫草素；超声波提取

紫草作为常用的传统中药，是食药同源性植物，安全性高，国内外对于其有效成分紫草素的研究逐渐深入。传统的涉及加热回流的提取方法，在提取过程中势必会造成一部分紫草素的损失。本文通过正交实验优化超声提取法的最佳条件，并与传统提取方法进行比较。

一、仪器与试药

Agilent 1200高效液相色谱仪；超声波清洗器（宁波金达超声波仪器厂）；MILLI-Q超纯水仪（MILLIPORE公司）；新疆紫草购自成都荷花池中药材专业市场，经鉴定为为紫草科植物新疆紫草Arnebia euchroma （Royle） Johnst.的干燥根；左旋紫草素对照品（中国食品药品检定所，批号110769-200405）；乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

二、方法与结果

1.回流提取法

称取10目的紫草粗粉10 g，加入无水乙醇100 mL，回流提取3 h，重复2次，合并提取液，浓缩并定容至50 mL，采用HPLC法测定含量。乙醇回流提取法的平均提取率为0.545 mg/g，RSD = 2.03%。

2.索氏提取法

称取10目的紫草粗粉10 g，装入索氏提取器中，加入100 mL的无水乙醇，虹吸10次后收集提取液，浓缩并定容至50 mL，采用HPLC法测定含量。乙醇索氏提取法的平均提取率为0.601 mg/g，RSD = 3.22%。

3. 渗漉法

称取10目的紫草粗粉10 g，用100 mL的无水乙醇浸泡过夜，并以1 mL/min的流速进行渗漉。24小时之后收集渗漉液，浓缩并定容至50 mL，采用HPLC法测定含量。乙醇渗漉法的平均提取率为0.210 mg/g，RSD = 3.83%。

4. 超声波提取法

运用正交实验的方法，以紫草的粉碎目数、加乙醇量、超声提取时间和提取温度为四因素，三水平L9（34）正交实验法安排实验（表1、2），以提取物中主要的有效成分紫草素的含量作为综合评分指标优选的最佳工艺条件进行试验。

称取4 g的紫草粉末，将其置于锥形瓶中，加入无水乙醇后经超声提取2次。将2次得到的滤液合并，浓缩并定容至50 mL，采用HPLC法测定含量。

对表3数据进行直观分析可知，比较4个因素的极差，说明乙醇的用量对紫草素提取率的影响最大，而提取时间的影响最小。通过方差分析（表4），因素B和因素D的F比值大于1，表明各水平之间有显著性差异，对紫草素提取率有明显影响。因此可以确定紫草中紫草素的最佳提取工艺为A2B2C2D2。按此工艺条件进行试验，平行操作3次，平均提取率为1.01 mg/g，RSD = 1.52%。

二、结语

通过正交试验确定了超声波提取法提取工艺的最佳条件：紫草粉碎目数为40目，乙醇量为32 g，提取时间为40 min，提取温度为50℃。将超声波提取法与传统提取工艺相比较，超声波提取法大幅度简化紫草中紫草素的提取工艺，时间缩短为传统提取法耗时的四分之一，且溶剂的消耗量也只需传统方法的三分之一，大大的提高了提取效率且方法重现性更好。