FK506对人肝HL-7702细胞中Akt表达的影响

李浩言，张雪梅，安 军，张韶峰，王宏宇，高 飞，马永华，徐 春

FK506对人肝HL-7702细胞中Akt表达的影响

李浩言，张雪梅，安 军，张韶峰，王宏宇，高 飞，马永华，徐 春

目的观察他克莫司（FK506）对人肝HL-7702细胞系胰岛素信号通路关键位点Akt表达的影响，以探究FK506诱导血糖升高的分子机制。方法 选用处于对数生长期的人肝HL-7702细胞系，分为3个处理组和1个对照组。处理组分别用不同浓度的FK506（0.1、1、5 mg/L）处理24 h，对照组用等量培养基培养24 h。采用蛋白质免疫印迹法（western blot）检测各组Akt蛋白的表达量及其磷酸化水平，同时采用蛋白磷酸酶2A（protein phosphatase 2A, PP2A）活性测定试剂盒测定PP2A活性。结果各组Akt的表达水平及磷酸化位点p-Akt（Ser473）水平无明显变化，另一磷酸化位点p-Akt（Thr308）水平（F=5.657，P=0.022）差异有统计学意义；当FK506 浓度为5 mg/L时与对照组相比显著升高，差异有统计学意义（P=0.037），随着FK506浓度的升高，PP2A活性有一定程度升高，但差异无统计学意义（F=0.857，P=0.501）。结论FK506引起HL-7702细胞中Akt磷酸化水平升高，这一变化可能与PP2A无关。

Akt；他克莫司；胰岛素抵抗；器官移植后糖尿病

他克莫司（FK506）是一种钙调神经磷酸酶抑制剂，用于预防器官移植术后急性排斥反应，可有效提高移植物的存活率[1]。然而，与其相关的副作用如移植后糖尿病（post-transplantation diabetes mellitus，PTDM）严重影响移植物的功能。临床研究显示，FK506比环孢素A更易导致糖尿病[2,3]，其诱导糖尿病发生的机制尚不清楚。最近研究发现，钙调神经磷酸酶对于葡萄糖促进胰岛素基因转录具有关键作用[4]，作为钙调神经磷酸酶抑制剂，FK506抑制胰岛素基因的转录，损伤胰岛β-细胞。实验发现FK506可致胰岛素抵抗[5]，研究FK506对胰岛素信号传导分子的影响将有助于揭示其增加胰岛素抵抗的机制。……