张家口市马铃薯脱毒种薯病毒检测试验研究

杨博文

（张家口市种子管理站，河北 张家口 075000）

张家口市马铃薯脱毒种薯病毒检测试验研究

杨博文

（张家口市种子管理站，河北 张家口 075000）

本试验应用酶联免疫吸附技术对36个马铃薯脱毒种苗样品进行PVX、PVY、PVS、PLRV 4种病毒检测，未检测出PVX、PVS和PLRV病毒，表明这3种病毒脱毒情况良好；PVY病毒有1份样品检测结果呈阳性，需重点对PVY病毒进行监测，阻止带毒瓶苗进入生产，从源头上控制种薯质量。

马铃薯；脱毒种薯；病毒检测；试验

近年来，张家口地区马铃薯产业蓬勃发展，播种面积占河北省马铃薯面积的60%。由于大量使用脱毒种薯，全市马铃薯平均单产高达1.49 t/667 m2，高于全国单产0.968 t/667 m2。要保证脱毒种薯的质量，脱毒瓶苗的带毒率必须为0。

本试验应用酶联免疫吸附技术，对本市生产的马铃薯脱毒种苗进行检测，以了解本市各种薯企业马铃薯种薯脱毒情况，为马铃薯脱毒种薯质量监督提供依据。

1 材料与方法

1.1 供试材料

采用瑞士BIOREBA公司生产的马铃薯病毒检测试剂盒，包括马铃薯X病毒（PVX）、马铃薯Y病毒（PVY）、马铃薯S病毒（PVS）、马铃薯卷叶病毒（PLRV）。试验材料为本地主栽品种“荷兰十五”、“冀张薯12号”、“夏波蒂”、“布尔班克”等马铃薯脱毒瓶苗样品，共计36个。试验仪器包括酶标仪、微量移液器、恒温箱、离心机、冰箱等。

1.2 试验方法

①配置溶液，制备样品，提取缓冲液和洗涤缓冲液。②样品制备：将马铃薯种苗称重后放入样品袋并做好标记，每0.1 g加入1 mL提取缓冲液，研磨后离心取上清备用。③对照物准备：稀释阴阳对照物-20℃保存备用。④加样和对照物：将已包被好的酶标板取出，标注样品号（一个样品两个重复）和病毒名称，每孔加100 μL样品上清液。……