液相色谱—串联质谱法测定火锅食品中罂粟碱等非法添加剂含量的不确定度评定

刘慧　袁兴启　宋芳　王娟　袁博

1引言

罂粟壳是成熟罂粟果去籽后的部分，属于国家管制药品，但因其具有调味的功能，所以被一些不法商贩用于火锅、面汤、酸辣粉、卤制品等食品中。罂粟壳中主要成分有罂粟碱、吗啡、那可丁、可待因和蒂巴因等，长期食用容易上瘾，过量摄入可能引起心律不齐，甚至导致死亡。因此，准确检测食品中罂粟碱等非法添加剂含量，对于维护人民身体健康、打击非法添加现象具有重要的意义。测量不确定度表征合理地赋予被测量之值的分散性，对检测结果的可信性有着重要意义。

本文以罂粟碱为例对液相色谱一串联质谱法测定火锅食品中非法添加剂含量的不确定度进行了评定，计算了测定结果的合成不确定度和扩展不确定度，为评价检测结果提供了理论依据。

2材料与方法

2.1仪器与试剂

Dionex Ultimate 3000高效液相色谱仪：TSQ QuantivaMS三重四级杆质谱仪（Thermo fisher）；配加热电喷雾离子源（H-ESI）；XP204型电子天平（METTLER TOLEDO）；超声波清洗机（德国Elma-P120H）；高速离心机（德国Sigma）；WH-861涡旋混合器（南京诺泰施格科学仪器有限公司）；罂粟碱等非法添加剂混合标准溶液（罂粟碱浓度10μg/mL，安谱公司）；乙腈、甲醇、甲酸（色谱纯，美国天地有限公司）。

色谱柱：Phenomenex C18（4.6mm×100mm，2.6μm）；流动相A为含0.1%甲酸水溶液，流动相B为甲醇，梯度洗脱条件：0～2min：90%A；2～3min：90%A～10%A；3～7min：10%A：7～8min：10%A～90%A：8～10min：90%A：流速0.5m L/min，进样量10μL，柱温35℃。

质谱条件：H-ESI；正离子模式；选择反应监测（SRM）扫描模式；喷雾电压3.5kV；毛细管温度350℃，离子源温度350℃，鞘气（N₂）流速4.58L/min，辅助气（N₂）流速7.97L/min。

2.2实验方法

称取样品5g于50mL聚乙烯离心管中，加入5mL水，振搖使分散均匀，加入15mL乙腈，涡旋振荡1min，加入6g无水硫酸镁门.5g无水醋酸钠的混合粉末（Waters公司），迅速振摇，涡旋振荡1min，以4000转/分钟离心5min。取上清液1.5mL于DisQuE的净化管（150mg无水硫酸镁/50mgPSA/50mg C18，Waters公司），涡旋混合1miD，以10000转/分钟离心2min，移取上清液，0.22μm滤膜过滤，取滤液待测。

2.3数学模型

根据样品测试方法建立的不确定度评估模型如下：

式中：ω——试样中罂粟碱的含量（μg/kg）；C——试样溶液中罂粟碱的浓度（ng/mL）；V——定容体积（mL）；M——试样质量（g）。

3不确定度的分析与评定

3.1测量重复性引入的不确定度U_rel（X）

采用A类方法评定测量重复性引入的不确定度，评定结果已涵盖了各步骤的重复性及样品前处理中各因素的影响。

在相同的条件下，取一阳性样品采用相同的方法平行测试10次，测试结果如表1所示：