俞静波,徐 艳,吴 晖,苏为科(.浙江工业大学 绿色制药协同创新中心,浙江 杭州 3004;.杭州中美华东制药有限公司,浙江 杭州 300)
响应面法优化机械辅助提取放线菌肽聚糖
俞静波1,徐 艳1,吴 晖2,苏为科1
(1.浙江工业大学 绿色制药协同创新中心,浙江 杭州 310014;2.杭州中美华东制药有限公司,浙江 杭州 310011)
在单因素实验的基础上,通过响应面分析法对机械球磨辅助提取放线菌发酵菌泥肽聚糖的提取工艺进行优化.实验结果表明:在NaOH质量分数为6%、球料比为15、转速为300 r/min的条件下作用5 min能够有效去除细胞壁表层磷壁酸,并维持其骨架相对完整.与传统方法相比,机械研磨具有时间短、效率高和经济环保的特点.混合物经过十二烷基磺酸钠(SDS)沸水浴30 min和37 ℃胰蛋白酶处理6 h后得到类白色提取物.经溶菌酶酶解实验和红外光谱分析,初步证明该提取物主要成分为肽聚糖.
肽聚糖;球磨;磷壁酸
游动放线菌Actinoplanessp. SE50/110是革兰氏阳性菌,是放线菌中的重要成员,其次级代谢产物阿卡波糖具有很好的降血糖作用[1].肽聚糖为G+菌细胞壁的主要成分,多达30~40层[2].研究表明肽聚糖具有多种生物学活性如抗免疫活性、抗肿瘤及其他活性[3],在调节宿主免疫功能方面发挥着重要作用.提取菌体细胞壁肽聚糖方法主要包括机械破碎、化学和生物化学渗透及物理渗透[4]等方法.传统化学法常采用三氯乙酸高温处理,破壁效果较好,肽聚糖完整性高,但处理时间长、试剂用量多,且会产生大量废酸.生物化学法利……