南极磷虾中产抗菌活性物质菌株的筛选及系统发育分析

袁兰云,王亚璐,宁喜斌,*,刘志东

(1.上海海洋大学食品学院,上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心,上海 201306;.中国水产科学研究院东海水产研究所,上海 200090)

南极磷虾中产抗菌活性物质菌株的筛选及系统发育分析

袁兰云1,王亚璐1,宁喜斌1,*,刘志东2

(1.上海海洋大学食品学院,上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心,上海 201306;.中国水产科学研究院东海水产研究所,上海 200090)

分别以金黄色葡萄球菌StaphylococcusaureusATCC 27661(Sa 27661)和大肠杆菌EscherichiacoliATCC 35218(Ec 35218)为指示菌,以南极磷虾中分离出的59株菌为测试菌,利用牛津杯法进行抗菌活性菌株的初筛及复筛,同时用比浊测定法和牛津杯法对活性菌株的部分特性包括生长曲线、抗菌曲线、最佳温度、最佳pH、最佳盐度进行了测定,以Mega 5邻接法对其16S r RNA基因序列及系统发育地位进行探究。结果发现,初筛获得13株菌对Sa 27661具有抗菌活性,6株菌对Ec 35218具有抗菌活性。复筛得到对Sa 27661和Ec 35218均具有明显抗菌活性的菌株3株,阳性率为5.08%,其编号分别为1A3、A4、1A5。且3株菌分别培养16、20、28 h进入生长对数期,培养36、48、60 h达到稳定期。分别培养56、64、72 h时抗菌活性达到最高,之后基本达到稳定。最佳温度分别为15、20、20 ℃,最佳pH分别为7、6、6,最佳盐度分别为1%、3%、2%。系统发育分析结果表明,菌株A4、1A5,均属于嗜冷杆菌属Psychrobacter,菌株1A5与已注册的菌株(Psychrobactersp. OK1)基因序列相似性可达100%。而菌株1A3与不可培养嗜冷杆菌属(UnculturedPsychrobacter)同源性为97%。三株菌均具有较好的耐酸性、耐碱性和耐盐性的能力,同时具有较好的抗菌活性。

南极磷虾,嗜冷杆菌属,抗菌活性,系统发育分析

极地微生物主要存在于极端的低温、高盐度及干燥的环境中,正是由于这样特殊的环境使其具有特殊的生物学特征及竞争优势[1-3]。……