室内空气微生物不同采样方法检测分析

张玲玲，王晓琼，张鹏帅

（郑州工业应用技术学院，河南郑州 450000）

室内空气微生物不同采样方法检测分析

张玲玲，王晓琼，张鹏帅

（郑州工业应用技术学院，河南郑州 450000）

目的：探讨室内空气微生物不同采样方法检测结果差异。方法：分别采用自然沉降法、液体撞击法和固体培养基撞击法在实验室进行空气微生物采样检测，对比分析三种检测方法的检测结果。结果：三种检测方法在空气微生物检测数量方面比较差异显著（P＜0.05）；但是自然沉降法、液体撞击法与固体培养基撞击法在超标率检测方面比较差异不显著（P＞0.05）。结论：三种检测方法都可以应用到检测当中，其中固体培养基撞击法的检测效果最好，但是设备昂贵，不适于推广使用，自然沉降法简单易行，但是准确性不高；液体撞击法更适用于传播病原微生物的检测当中。

室内空气微生物；不同采样方法；检测分析

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究选择实验室为样品采集地点，实验室面积约为42m2，室温23~27℃，相对湿度为46%~60%。采集空气样品时以对角线布点方式选择3个样品采集点，空气样品采集高度为1.4m，三种空气微生物检测方法同时采集空气样品。

1.2 方法

1.2.1 检测仪器

液体撞击式玻璃采样器、LY36-FA-1多级撞击式空气微生物采样器、普通营养琼脂培养基、平皿（直径9cm）、灭菌的采样液（生理盐水）。

1.2.2 检测方法

液体撞击法：采样前将10mL的灭菌采样液加入到液体撞击式玻璃采样器的玻璃吸收管中，将空气采集速度调节至1.0L/ min，连续收集空气25min。空气样本采集完成后将灭菌采样液加入到平皿中，并在平皿中加入融化并冷却至45℃的普通营养琼脂，每管采样液对两个平皿进行接种，以上处理完成后将平皿放置于36℃的恒温箱中进行培养，48h后对微生物进行统计。微生物数量（cfu/m3）=N×10 000/（Q×T）。N是接种平皿平均菌落数，T是采样时间（min），Q表示采样流量（L/ min）。

自然沉降法：将普通营养琼脂平皿放置于选择好的空气采集点，打开平皿，让其在空气中暴露6min。空气样品采集完成后将平皿放置于36℃的恒温箱中进行培养，48h后对微生物进行统计。微生物数量（cfu/m3）=N×50 000/（A×T），N是平皿菌落数，T是平皿暴露时间（min），A表示平皿面积（cm2）。

固体培养基撞击法：将Y36-FA-1多级撞击式空气微生物采样器置于空气样品采集点，将采集空气流量调整至28.3L/ min，连续采集空气12min，空气样品采集完成后将平皿放置于36℃的恒温箱中进行培养，48h后对微生物进行统计。微生物数量（cfu/m3）=N×1 000/（Q×T）。N是平皿菌落数，T是采样时间（min），Q表示采样流量（L/min）。

本研究中每种检测方法采样35次进行反复检测。

1.3 观察指标

①观察比较三种方法的测定结果；②分别分析自然沉降法、液体撞击法与固体培养基撞击法超标率的一致性；

1.4 统计学方法

对于三种采集方法的结果相关数据使用SPSS21.0统计学软件处理，计数单位和计量单位分别使用（%）和（X±s）表示，对三组的数据比较结果采用X2、F进行检验，最终得出P＜0.05，本研究具有统计学意义。

2 结果

2.1 三种采样方法检测结果比较

研究发现三种检测方法检测的微生物总数比较差异显著，自然沉降法检测的微生物总数最多，固体培养基撞击法检测的微生物数量最少，三组之间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。

表1 三种采样方法检测结果比较

2.2 自然沉降法与固体培养基撞击法超标率的一致性分析

自然沉降法的超标率与固体培养基撞击法超标率比较差异不显著，（P＞0.05），不具有统计学意义。详见表2。

表2 自然沉降法与固体培养基撞击法超标率比较

2.3 液体撞击法与固体培养基撞击法超标率的一致性分析

液体撞击法的超标率与固体培养基撞击法超标率比较差异不显著（P＞0.05），不具有统计学意义。详见表3。

表3 自然沉降法与固体培养基撞击法超标率比较

3 讨论

本研究以实验室为空气采集对象，同时采用三种方法对空气中微生物的数量进行检测。研究发现三种检测方法检测的微生物数量差异显著，检测到微生物数量有多到少排列为：自然沉降法、液体撞击法和固体培养基撞击法，但是自然沉降法、液体撞击法与固体培养基撞击法在超标率方面比较差异显著。这一研究表明三种方法都能应用于室内空气微生物的检测当中，但是固体培养基撞击法是最理想的一种检测方法。

每种空气微生物检测方法都不可能十全十美，都有其自身的局限性。目前固体培养基撞击法是公认的最理想的一种空气微生物检测方法。该种方法通过多级撞击式空气微生物采样器对空气中的微生物进行捕获，准确性很高，而且能够对空气中的微生物进行分级处理，因此将其应用于空气微生物的检测当中具有较好的效果。但是多级撞击式空气微生物采样器的价格昂贵，在实际检测当中并不适用，不能推广运用。

与各种检测方法进行比较，自然沉降法是最为简单易行的一种检测方法，在各种检测中被推广运用。但是此种检测方法很容易受到空气质量的影响，检测的微生物数量往往发生明显偏高现象。次瓦斯该种检测方法的计算公式也备受质疑。本研究中自然沉降法检测室内空气微生物的数量明显高于其他检测方法，这一研究结果与以上分析一致。但是在超标率测定方面自然沉降法与固体培养基撞击法测定结果比较差异不显著，表明可以将该种方法引用到实际检测当中。

液体撞击法采用液体撞击式玻璃采样器将空气中的微生物收集到采样液中，该种采样方式与其他方式相比就有明显的优势，能够测出空气中活微生物数量及一些空气中的脆弱的微生物。正因为该种检测方法有这样的优势被广泛应用于传播病原微生物的检测当中。尽管该种方法有明显优势，但是也同样存在很多缺陷，例如其采样流量远远低于固体培养基撞击法。尽管该种检测方法的超标率与固体培养基撞击法比较差异不显著，但是检测效果远远不如固体培养基撞击法。

4 结束语

综上所述，三种检测方法都具有自身的优势与局限性。其中固体培养基撞击法的检测效果最佳，但是不适于广泛应用；自然沉降法是应用最广泛的一种检测方法，简单易操作，但准确性较低；液体撞击法适用于传播病原微生物的检测当中。因此在对室内空气微生物进行检测时要根据实际需要选择合适的样品采集方法。

[1] 李燕明，佟训靓，许宏涛.Illumina高通量测序技术检测医院内空气中微生物[J].温州医科大学学报，2015，45（6）：437-439.

[2] 李红梅，白林，姜冬梅.基于16SrDNA高通量测序方法检测猪舍空气微生物多样性[J].中国畜牧杂志，2015，51（3）：81-84.

Detection and Analysis of Indoor Air Microorganisms with Different Sampling Methods

Zhang Ling-ling，Wang Xiao-qiong，Zhang Peng-shuai

Objective：To investigate the difference of the results of different sampling methods for indoor air microbes.Methods Airborne microbial sampling was carried out in the laboratory by natural sedimentation method，liquid impact method and solid medium impact method respectively.The detection results of the three detection methods were compared and analyzed.Results：There were significant differences between the three detection methods in the number of air microbiological tests（P <0.05）.However，there was no significant difference between the natural sedimentation method，the liquid impact method and the solid medium impact method in the detection of the excess rate（P> 0.05）.Conclusion：Three kinds of detection methods can be applied to the detection，in which the detection effect of the solid medium impact method is the best，but the equipment is expensive，not suitable for popularization，natural sedimentation method is simple，but the accuracy is not high；More suitable for the detection of pathogenic microorganisms.

indoor air microbes；different sampling method；detection and analysis

R122.1

B

1003–6490（2017）05–0148–02

2017–04–12

张玲玲（1988—），女，河南周口人，讲师，主要从事从事病原生物与免疫学的教学工作。