基于2 种衍生化方法对牛乳中寡糖的高效液相色谱-质谱联用分析

陈新新，芦 晶，刘 鹭，逄晓阳，张书文，李 诚，吕加平

基于2 种衍生化方法对牛乳中寡糖的高效液相色谱-质谱联用分析

陈新新1,2，芦 晶2，刘 鹭2，逄晓阳2，张书文2，李 诚1,*，吕加平2

（1.四川农业大学食品学院，四川 雅安 625014；2.中国农业科学院农产品加工研究所，北京 100193）

利用Sep-Pak C18柱和石墨化碳柱对已脱脂和除去蛋白质的牛乳进行分离纯化，并采用1-苯基-3-甲基-5-唑啉酮（3-methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one，PMP）和2-氨基吖啶酮（2-aminoacridone，AMAC），2 种衍生化试剂对其进行衍生化处理，通过高效液相色谱进行优化，AMAC衍生化的结果（约有67 个峰）明显优于PMP衍生化的结果（约20 个峰），最终确定AMAC为最佳衍生化试剂，并利用最终优化好的高效液相色谱条件，采用高效液相色谱-串联离子阱飞行时间质谱对牛乳中寡糖进行测定，最终测得7 种乳寡糖并获得该7 种乳寡糖的单糖组成。

牛乳寡糖；1-苯基-3-甲基-5-唑啉酮；2-氨基吖啶酮；高效液相色谱-串联离子阱飞行时间质谱

牛乳中含有4.5%的碳水化合物，其中乳糖的含量超过80%，寡糖含量约占总糖含量的4%。研究发现游离寡糖是哺乳动物乳汁中除乳糖和脂肪外种类最为丰富的固形化合物[1]。乳寡糖是由3～10个单糖通过糖苷键共价连接的碳水化合物聚糖，构成牛乳寡糖的单糖包括葡萄糖（glucose，Glc）、半乳糖（galactose，Gal）、N-乙酰葡糖胺（N-acetylglusamine，GlcNAc）、岩藻糖（fucose，Fuc）、N-乙酰神经氨酸（N-acetylneuraminic acid，NeuAc）和N-羟乙酰神经氨酸（N-glycolylneuraminic acid，NeuGc），大多数的牛乳寡糖都有一个乳糖核心（Gal（β1-4）Glc）[2-3]。乳制品特别是婴儿配方奶粉、食品工业及功能食品制造商确定为牛奶中的低聚糖是一种新颖、有高潜力的生物活性食品配料。研究发现，乳寡糖作为益生元可以刺激肠道有益细菌的生长如新生儿肠道内双歧杆菌，改善微生态，从而降低婴幼儿患病风险，如腹泻，脑膜炎和中耳炎等[4-8]。……