5个燕麦品种基因组DNA的提取

闫艳华，杜京旗，李娇娇

(吕梁学院 生命科学系，山西 吕梁 033000)

5个燕麦品种基因组DNA的提取

闫艳华，杜京旗，李娇娇

(吕梁学院 生命科学系，山西 吕梁 033000)

以5个不同品种的燕麦种子和叶片为原料，用CTAB法提取燕麦基因组DNA，最后通过吸光度来检测所提取DNA的纯度和质量，确保提取出纯度较高的燕麦基因组DNA样品。结果表明，燕麦叶子基因组DNA比燕麦种子基因组DNA要容易提取得多，得到的DNA溶液质量比较高，而这5种燕麦的基因组DNA的提取难易程度不同，只有符合要求纯度的燕麦基因组DNA才可以用于进一步研究。

燕麦； 基因组DNA； CTAB法； 吸光度

燕麦属于禾本科燕麦属一年生草本植物，分为有壳和无壳两大类，即皮燕麦和裸燕麦。燕麦抗旱、抗寒，是我国主要高寒作物之一，在贫苦地区是不可缺少的干粮，市场开发前景广阔[1-5]。但是燕麦DNA提取过程中易受纤维、蛋白质、酚类，脂类、糖类及其他干扰物质含量的影响，DNA提取的质量较差，严重影响燕麦分子生物学方面的研究与进展[6-8]。

本研究旨在用燕麦叶片和种子两种不同材料通过改良的CTAB法得到优质的基因组DNA，为进一步研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

供试燕麦种子由吕梁学院生物实验室提供，保存于4 ℃冰箱内。5个品种分别是定燕1号、白燕2号、宁莜1号、晋燕17号和晋燕8号。

主要试剂有无水乙醇、氯仿、异戊醇、CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)、Tris(三羟甲基氨基甲烷)、EDTA(乙二胺四乙酸)、氯化钠、2-巯基乙醇、浓盐酸、氢氧化钠、蒸馏水等。

主要仪器有HH-6型数显恒温水浴锅、Neofuge13R型台式高速冷冻离心机、UV-1601双光束紫外/可见分光光度计、超低温冰箱、pH值试纸、玻璃棒、移液器、研钵、1.5 mL的离心管、电子天平、微波炉。……