禽腺病毒4型鞭毛重组蛋白的原核表达及其免疫效果研究

刘 超 ， 侯 磊 ， 韦 莉 ， 王 菁 ， 全 荣 ， 朱珊珊 ，李子璇 ， 齐宾宾 ， 王利佳 ， 姜海军 ， 王 丹 ， 刘 爵

(1.北京农学院动物科技学院 ， 北京昌平102206 ； 2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所 ， 北京海淀100097)

禽腺病毒4型鞭毛重组蛋白的原核表达及其免疫效果研究

刘 超1，2， 侯 磊2， 韦 莉2， 王 菁2， 全 荣2， 朱珊珊2，李子璇2， 齐宾宾2， 王利佳1，2， 姜海军2， 王 丹2， 刘 爵2

(1.北京农学院动物科技学院 ， 北京昌平102206 ； 2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所 ， 北京海淀100097)

为研究禽腺病毒4型重组鞭毛-fiber2蛋白免疫保护性，将鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白基因与禽腺病毒4型的fiber2基因融合，再将融合基因和单独的fiber2基因分别克隆到原核表达载体pET-28a，后将构建的pET-28a-flagellin-fiber2和pET-28a-fiber2重组载体分别转入大肠杆菌BL21细胞，经IPTG诱导表达，利用SDS-PAGE和Western Blot鉴定表达产物，再将表达产物纯化后免疫21日龄SPF鸡；结果表明，重组菌在37 ℃培养条件下1.0 mmol/L的IPTG诱导6 h可表达最多的可溶性重组蛋白，Western Blot分析表明，所表达的重组蛋白均能与禽腺病毒血清4型感染阳性血清发生特异性反应，说明所表达蛋白具有良好反应原性，动物试验表明，表达的两种目的蛋白能为鸡提供一定保护力，且低剂量的重组鞭毛-fiber2蛋白产生较好的免疫保护效果。

禽腺病毒4型 ； 鞭毛基因 ； fiber2基因 ； 原核表达 ； 免疫保护

腺病毒(Adenovirus，AdV)是家禽和野禽常见的传染性病原。近几年，由Ⅰ亚群禽腺病毒感染引起鸡的包涵体肝炎(Inclusion body hepatitis，IBH)、心包积水综合征(Hydropericardium syndrome，HPS)等临床病例逐渐增多并已遍及全世界。中国相继诊断和报道了大量IBH或HPS病例，其中以禽腺病毒4型感染居多；感染鸡可在没有呈现临床症状的情况下突然死亡，死亡率高达80%[1]，给养禽业造成巨大的经济损失[2]。……