禽网状内皮组织增生症病毒蛋白酶PR酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定

姜莉莉 ， 蒋培红， 温海燕 ， 樊兆斌

(1.菏泽学院药物科学与技术系 ， 山东菏泽274015 ； 2.锦州医科大学畜牧兽医学院 ， 辽宁锦州121001)

禽网状内皮组织增生症病毒蛋白酶PR酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定

姜莉莉1，2， 蒋培红1， 温海燕1， 樊兆斌1，2

(1.菏泽学院药物科学与技术系 ， 山东菏泽274015 ； 2.锦州医科大学畜牧兽医学院 ， 辽宁锦州121001)

为研究禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosisvirus, REV)蛋白酶PR与宿主细胞的相互作用，将REV PR基因克隆入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7，构建诱饵载体pGBK-PR，经菌落PCR 、酶切鉴定及测序验证正确后，将重组诱饵质粒转化酵母菌株Y2H Gold感受态，进行重组诱饵载体在酵母中的自激活活性和毒性检测。结果表明，成功构建诱饵载体pGBK-PR，此载体在酵母细胞Y2H Gold中无自激活活性和毒性。研究结果为进一步利用酵母双杂交技术筛选与REV 蛋白酶PR互作的宿主蛋白奠定了基础。

禽网状内皮组织增生症病毒 ； PR ； 酵母双杂交 ； 诱饵载体

禽网状内皮组织增生症是由禽网状内皮组织增生症病毒(ReticuloendotheliosisVirus, REV)引起的一种重要的肿瘤性免疫抑制病。REV感染能引起慢性肿瘤、矮小综合征[1]。还可引起免疫器官的萎缩，引发重剧的免疫抑制，造成免疫失败或继发其他传染病[2]。近年来，REV 已在全球范围内流行[3]，在我国的流行愈发严重，鸡群中REV的血清抗体阳性率逐渐增高，存在普遍的混合感染[4-5]，对养禽业危害严重。

REV属反转录病毒科，哺乳动物C型反转录病毒亚科，γ逆转录病毒属，为双倍体单股正链 RNA 病毒[6]。REV基因组有两个开放阅读框，有3个主要编码基因：衣壳蛋白基因(gag)、聚合酶基因(pol)和囊膜蛋白基因(env)，主要编码gag、pol和env三种结构蛋白[7]。……