牛传染性鼻气管炎gB基因TaqMan探针及SYBR Green1荧光定量PCR方法的建立与比较

张喜喜 ， 许 健 ， 李永清 ， 周双海

(1.北京农学院动物科技学院 ， 北京昌平102206 ； 2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所 ， 北京海淀100097)

牛传染性鼻气管炎gB基因TaqMan探针及SYBR Green1荧光定量PCR方法的建立与比较

张喜喜1,2， 许 健2， 李永清2， 周双海1

(1.北京农学院动物科技学院 ， 北京昌平102206 ； 2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所 ， 北京海淀100097)

为建立牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)荧光定量PCR检测方法，本研究利用IBRVgB基因序列设计引物及相应探针，分别建立TaqMan探针与SYBR Green 1荧光定量PCR方法，并对两种方法的敏感性等综合比较。结果显示，SYBR Green 1荧光定量PCR方法的相关系数(R2)为0.998，扩增效率(E)为95.7%；TaqMan探针荧光定量PCR方法的R2为0.999，E为108.3%；两种方法的敏感性均为0.2 TCID50，变异系数均小于3%。综合结果显示，两种检测方法无显著差异。最后，本研究成功建立了检测IBRV的荧光定量PCR，将为IBRV的临床检测提供方法。

牛传染性鼻气管炎病毒 ；TaqMan 探针荧光定量PCR ； SYBR Green 1 荧光定量PCR ； 临床检测

牛传染性鼻气管炎(IBR)是由牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)引起牛的一种呼吸道疾病，以高热、呼吸困难、鼻炎、鼻窦炎和上呼吸道炎症为主要特征[1]。此病毒主要以潜伏感染和持续性感染为主，病牛长期甚至终生带毒，给防控工作带来了极大的困难。临床症状多种多样：有呼吸道型、生殖道型、流产型、脑膜脑炎型[2]。目前此病毒感染过我国多省份地区的牛群，同时由于没有适当的免疫防护措施，该病呈上升趋势，对牛群肥育率、产奶量和繁殖影响极大，给养牛业造成了严重危害[3]。没有特效药物可以治疗牛传染性鼻气管炎，截至目前，疫苗接种和扑杀是主要的防控措施。……