小鼠肝组织扫描电镜样本的制备及改良方法*

姚莹华陈育尧吕志平

[文章编号] 1672-8270(2017)06-0165-03 [中图分类号] R-332 [文献标识码] A

小鼠肝组织扫描电镜样本的制备及改良方法*

姚莹华①陈育尧②吕志平②

目的：探讨优化小鼠肝组织扫描电镜样本的制备方法。方法：通过改良灌注固定的部位、优化灌注材料及步骤、采用经门静脉灌注固定和改变固定流程等制备小鼠肝脏扫描电镜样本，并对比改良制备方法与常规制备方法的组织细胞形态观察结果。结果：改良后的样本制备方法较好地保存了小鼠肝组织以及细胞的生活状态，可清晰观察肝脏组织及细胞的超微形态结构，获得了颇为理想的观察效果，且操作简便，成功率高，优于传统制备方法。结论：经门静脉灌注固定制备小鼠扫描电镜样本是比较优越的扫描电镜制样方法，具有一定应用价值。

肝组织；扫描电镜；样本制备；改良方法

电子显微镜术的应用使人们对肝脏的认识从组织学水平上升到细胞器水平，并进入分子生物学研究领域[1]。扫描电镜可清晰地观察物体表面的立体微细结构及其形态学变化，从三维水平研究肝脏的亚微结构，是现今一种较为常见和实用的形态学研究方法[2]。实验发现，肝脏细胞的超微结构只能在完整的肝组织或培养的细胞中使用电子显微镜进行观察，而理想的生物样品应如实反映其生理过程中的状态，在高真空和强电子束的轰击下保持稳定，且亚微结构清晰、无变形[3-4]。理想的生物样品与样品的制备技术密切相关，由于小鼠门静脉短且壁薄，其样品制备为一大技术难点。……