AM79 EPSPS蛋白的体外模拟胃肠液消化稳定性研究

王玉王建华刘允军

（1. 中国农业大学农学院，北京 100094；2.中国农业科学院作物科学研究所，北京 100081）

AM79 EPSPS蛋白的体外模拟胃肠液消化稳定性研究

王玉1，2王建华1刘允军2

（1. 中国农业大学农学院，北京 100094；2.中国农业科学院作物科学研究所，北京 100081）

AM79 EPSPS基因是从草甘膦高度污染的土壤中克隆的、具有我国自主知识产权的一个新型抗草甘膦基因，在转基因玉米中过表达能显著提高转基因玉米的草甘膦抗性，具有重要应用价值。为了评价AM79 EPSPS蛋白的食用安全性，本研究参考中华人民共和国国家标准，开展了AM79 EPSPS蛋白的消化稳定性研究。将AM79 EPSPS基因构建到原核表达载体pET-30a上，在大肠杆菌中表达了分子量为48.3 kD的可溶性AM79 EPSPS蛋白。通过Ni-NTA亲和层析方法纯化了AM79 EPSPS蛋白用于体外模拟胃肠液实验。结果表明，AM79 EPSPS蛋白在模拟胃肠液中均在15 s内即被消化，SDS-PAGE和Western蛋白免疫印迹均未检测到蛋白残留，表明AM79 EPSPS蛋白在模拟胃肠液体系中极易被消化。

AM79 EPSPS蛋白；草甘膦；模拟胃肠液；消化稳定性

玉米是我国种植面积最大的作物，可以作为粮食、饲料、工业原料等。杂草对玉米生产危害严重，一般年份可使玉米减产10%-20%。利用转基因技术培育抗除草剂转基因玉米，可以利用除草剂有效控制田间杂草，减少农药使用量，降低生产成本，保护环境。随着转基因作物的迅猛发展，转基因作物的环境安全性及食用安全性评价备受关注，其中最受关注的是食用安全性问题。转基因作物中所表达的外源蛋白大部分是受体作物中所没有的蛋白质，有可能对人体产生包括致敏性在内的一些不良反应。……