冬凌草甲素诱导三阴乳腺癌MDA—MB—231细胞凋亡及对细胞内活性氧水平的影响

齐琦+张配+李其响+潘琼+郑海伦+赵素容

[摘要] 冬凌草甲素是从中药冬凌草Rabdosia rubescens中分离得到的一种贝壳杉烯二萜类的天然有机化合物，具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生物活性。该实验观察冬凌草甲素对三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。采用MTT法检测冬凌草甲素对MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用，PI单染、Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术分析冬凌草甲素对MDA-MB-231细胞凋亡的影响，活性氧（ROS）试剂盒检测细胞内ROS水平的变化，Western blot分析PARP，Bcl-2，caspase-3蛋白的表达情况。结果表明，冬凌草甲素对乳腺癌MDA-MB-231细胞具有明显的凋亡诱导作用，显著升高细胞内的ROS水平，下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，并促进caspase-3及其底物PARP的切割。提示，冬凌草甲素诱导MDA-MB-231细胞凋亡的作用可能与升高细胞内ROS水平、下调Bcl-2的表达以及激活caspase-3相关。

[关键词] 乳腺癌； 冬凌草甲素； 细胞凋亡； 活性氧

[Abstract] Oridonin， which is an ent-kaurene diterpenoid isolated from traditional Chinese medicine Rabdosia rubescens， displays various bioactivities， including anti-inflammation， anti-bacteria and anti-tumor. This study aimed to investigate the effect of oridonin on apoptosis of triple-negative breast cancer MDA-MB-231 cells and its underlying mechanisms. The inhibitory effect of oridonin on proliferation of MDA-MB-231 cells was measured by MTT assay； Apoptosis was analyzed by flow cytometry with PI staining and Annexin V-FITC/PI staining； Intracellular reactive oxygen species （ROS） level was determined by ROS detection kit， and expressions of PARP， Bcl-2， caspase-3 were analyzed by Western blot. The results showed that oridonin exhibited a significant effect in inducing apoptosis of MDA-MB-231 cells， enhancing intracellular ROS level， down-regulating expression of Bcl-2 protein， and promoting cleavage of caspase-3 and its substrate PARP. These results indicated that the apoptosis-inducing effect of oridonin on MDA-MB-231 cells might be correlated with increase of intracellular ROS level， down-regulation of Bcl-2 protein and activation of caspase-3.

[Key words] breast cancer； oridonin； apoptosis； reactive oxygen

乳腺癌是世界范圍内严重危害女性健康与生命的恶性肿瘤，其发病率呈逐年增长的趋势。近年来尽管其治疗取得了长足的进步，但乳腺癌在发展中国家的发病率依然快速增长[1]。目前，外科手术、放疗和化疗是乳腺癌最主要的治疗手段。雌激素受体、孕激素受体、人类表皮生长因子受体2（HER2）均为阴性表达的乳腺癌，为三阴性乳腺癌（TNBC），该亚型的乳腺癌占乳腺癌病例数的12%～24%[2]。TNBC具有恶性程度高、侵袭性强、预后差等特征，并对内分泌治疗和抗HER2的靶向治疗均不敏感[3-4]。因此，寻找新的作用机制的治疗药物对TNBC的治疗具有重要意义。

冬凌草甲素是从中药冬凌草Rabdosia rubescens中分离得到的一种贝壳杉烯二萜类的天然有机化合物，具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种生物活性[5]。……