回、汉族非小细胞肺癌EGFR突变差异与临床病理特征分析

袁立志，周 玮，孟凡珍

回、汉族非小细胞肺癌EGFR突变差异与临床病理特征分析

袁立志，周 玮，孟凡珍

目的 探讨回、汉族肺癌患者EGFR(Epidermal growth factor recepor)突变差异与临床病理特征的相关性。方法 收集确诊非小细胞肺癌(NSCLC)并且具备完整的临床资料，通过组织活检、淋巴结穿刺、恶性胸腔积液离心等方式获取标本完成基因检测的NSCLC患者218例，统计分析NSCLC患者EGFR基因突变在回、汉族2个民族间及不同病理类型与临床特征的相关性。结果 218例NSCLC患者中，回族突变率为21.53%，汉族为40.52%，2个民族间差异有统计学意义(P<0.05)。汉族组中，女性EGFR基因突变率为48.49%，明显高于男性的34.48%；非吸烟患者EGFR突变率为55.88%,高于吸烟患者的28.24%；腺癌患者EGFR突变率为51.22%，高于非腺癌的28.17%，差异有统计学意义(P<0.05)。65例回族肺癌患者中腺癌EGFR基因突变率为26.32%，非腺癌突变率为14.81%，腺癌组高于非腺癌组(P<0.05)。回族NSCLC患者EGFR基因突变率与年龄、性别及吸烟史无相关性。结论 汉族EGFR患者基因突变率高于回族；EGFR基因在汉族组患者中，女性、非吸烟和腺癌患者突变率较高；在回族组患者中，腺癌EGFR突变率高于非腺癌，但与年龄、吸烟史、性别无相关性。

非小细胞肺癌；表皮生长因子受体；TKI；回族

近年来，表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)对EGFR基因突变肺癌患者的显著疗效，将肺癌治疗带上了一个新的高度，为晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者带来了新的希望，它们使EGFR基因突变阳性的非小细胞肺癌患者显著获益[1-2]。多项研究表明，对TKI治疗敏感的NSCLC患者具有一定的临床特征，如女性、腺癌、不吸烟[3]。我国是一个多民族组成的国家，宁夏是少数民族回族的主要居住地，近几年观察到回族肺癌患者发病率逐年提高，但EGFR基因突变率在回族肺癌患者的分布特点目前仍未见报道。为明确 EGFR基因在回族肺癌患者的突变特点，进一步对患者有针对性地制定个体化治疗方案提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料：收集2011年9月-2015年9月我院经病理学或细胞学明确诊断为NSCLC，并且具备完整临床资料的肺癌患者218例。汉族患者153例中，年龄<60岁65例，≥60岁88例；男性87例，女性66例；有吸烟史85例，无吸烟史68例；腺癌82例，非腺癌71例。回族65例患者中，年龄<60岁28例，≥60岁37例；男性29例，女性36例；有吸烟史12例，无吸烟史53例；腺癌38例，非腺癌27例。

1.2 方法

1.2.1 取材：所选218例肺癌患者均具备完整的临床资料，通过电子支气管镜对肿瘤组织进行活检、刷检、外科手术肿瘤切除、转移淋巴组织针吸活检、胸腔积液离心沉淀获取肿瘤细胞等方式获取检测标本。将检测标本放入专用标本容器，用甲醛液进行固定，由专一人员负责送往外地生物检测中心进行基因检测。检测中心统一采用探针扩增阻滞突变系统(ARMS)，检测NSCLC的EGFR基因突变状态。

1.2.2 基因检测：检测目标为EGFR-TKI编码区基因18-21外显子，利用TaqDNA聚合酶缺乏3’→5’外切酶活性，该聚合酶如果进行复制扩增，其PCR引物的3’末端碱基必须具备与其互补的模板DNA，根据已经获得的不同类型的突变序列，设计与之相匹配对应的“引物”片段用以检测NSCLC患者EGFR基因突变状态。反应载体共设计了8管PCR反应条，将DNA样品、特异性PCR引物、双环探针及氯化镁、硫酸铵等化学物质放入每个反应体系管内，通过凝胶电泳或实时荧光定量PCR(real-time PCR)对复制扩增产生的PCR产物进行分析[4]。

1.3 观察指标：EGFR基因突变结果的判断，即：阳性为8个反应体系管中1个或1个以上突变阳性或弱阳性；阴性为8个 PCR反应体系管中，7管突变反应均为阴性。

1.4 统计学方法：应用SPSS 17.0统计学件，计数资料采用χ2检验，分析回、汉族2组间EGFR基因突变的差异，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 汉族NSCLC患者EGFR 基因突变检测结果:本研究153例汉族NSCLC患者中，62例存在EGFR突变(40.52%，62/153)，包括第19号外显子突变27例，第21号外显子突变 24 例，第18号外显子突变7例，第20号外显子T790M突变患者4例。

2.2 汉族NSCLC患者EGFR 基因突变率与临床特征及病理类型之间的关系:本研究汉族NSCLC患者中，男、女2组EGFR 基因突变率分别为34.48%(30/87)、48.49%(32/66),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)；有吸烟史患者 EGFR 突变率为 28.24%(24/85),无吸烟史EGFR 突变率为 55.88%(38/68)，两者比较差异有统计学意义(P<0.05)；腺癌与非腺癌患者EGFR 基因突变率分别为 51.22%(42/82)、28.17%(20/71)，两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。汉族NSCLC患者EGFR 基因突变率与年龄分布无相关性(P>0.05),见表1。

表1 汉族NSCLC患者EGFR突变率与临床特征及病理类型的关系

2.3 回族NSCLC患者EGFR基因突变检测结果:65例回族NSCLC患者有14例EGFR 基因突变阳性(21.54%，14/65)，其中6例为外显子19的缺失突变，7例为21外显子L858R 点突变；第18号外显子突变1例，未检测到20 外显子突变。

2.4 回族NSCLC患者EGFR 基因突变率与临床特征及病理类型之间的关系:腺癌患者EGFR基因的突变率为26.32%(10/38)，非腺癌患者突变率为14.81%(4/27)，两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。回族患者组中，EGFR 基因的突变与性别(P>0.05)、年龄(P>0.05)、有无吸烟史(P>0.05)无相关性,见表2。

表2 回族NSCLC患者EGFR突变率与临床特征及病理类型的关系

2.5 汉、回族NSCLC患者EGFR基因突变差异:218例晚期NSCLC患者中，汉族患者153例，EGFR 基因突变率为40.52%(62/153)；回族患者65例，EGFR 基因突变率为 21.53%(14/65)，两者比较差异有统计学意义(χ2=7.240，P<0.05)。

3 讨论

近几年，EGFR在国内外肺癌治疗研究领域得到了广泛关注，EGFR基因突变可以增加表皮生长因子受体的活性，随后导致其下游信号通道被高度激活，从而促进了肿瘤的发生与发展。Lynch等首次报道了EGFR酪氨酸激酶编码区基因突变是靶向药物治疗是否有效的一个重要条件[5]。通过对肺癌患者EGFR基因突变状态的确定，用以指导肺癌患者是否接受TKI靶向治疗已成为肺癌治疗领域临床医师的共识。我国是一个多民族组成的国家，地域广阔，不同地区、不同民族居民的生活方式有所不同。根据国内相关文献所述，EGFR基因突变率在我国不同区域有着显著不同，如广东地区以19外显子缺失突变为主[6]，北京地区19及21外显子突变的检出率大致相同[7]，广西非小细胞肺癌患者 EGFR 突变率仅为 3.9%[8]，不同民族的EGFR基因突变率同样存在差异，维吾尔族突变率(11.8%)低于汉族平均水平[9-10]。目前，大多数研究数据集中在亚洲及欧美人群，很少有数据对中东及中亚地区人群EGFR突变状态进行报道。宁夏回族自治区统计局2015年2月发布了宁夏人口统计相关数据，即2014年底，宁夏常住人口数为661.54万，其中回族236.14万，占总人口35.7%，是全国所有省市、自治区中回族人口比例最多的区域，占全国回族人口超过1/5。因此，了解回族肺癌患者EGFR基因突变状态，明确回、汉族患者基因突变差异，为宁夏地区肺癌患者提供个体化治疗方案意义重大。

本研究结果显示，在宁夏地区汉族NSCLC患者EGFR基因突变的检出率为40.52%，其中女性患者突变率为48.49%，男性为34.48%，女性患者高于男性；腺癌组与非腺癌组患者EGFR基因突变率分别为51.22%和28.17%，腺癌患者的突变率较非腺癌患者明显较高，这与国内外研究报道较一致[11-12]。没有吸烟史的NSCLC患者的突变率为55.88%，明显高于有吸烟史患者突变率的28.24%。另外，本研究显示，回族肺癌患者的EGFR基因突变率与汉族患者有着明显差异。本研究所收集的病例资料显示，在65例回族非小细胞肺癌患者中，EGFR基因总体突变率为21.53%，其中腺癌患者的突变率为26.32%(10/38)，非腺癌患者突变率为14.81%(4/27)，腺癌患者高于非腺癌患者(P<0.05)；但是回族患者EGFR基因的突变率与年龄、性别、有无吸烟史均无明显相关性(P>0.05)。本研究中，回族患者EGFR基因突变率为21.53%，突变率较低，与目前相关文献报道的亚洲肺癌人群EGFR高突变率不一致，接近于欧美非小细胞肺癌患者的突变水平，可能这也是相对于汉族肺癌患者回族患者经过靶向治疗效果较差的原因之一。据文献报道，除外种族差异，地域因素在EGFR基因突变的发生中也发挥着一定的作用，EGFR突变率在欧美地区高加索人群肺癌患者不到10%，但在东亚地区突变率高达50%左右，表明肺癌的发生受遗传学背景和环境因素的影响[13]。宁夏回族自治区是以回族为主体的少数民族，回族总人数占到了全国回民总数的1/5左右，各民族之间在遗传、人种、文化饮食、生活习惯、住所等各个方面存在差异。本研究结果显示，汉族NSCLC患者EGFR基因突变率为40.52%，回族为21.53%，两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。汉族肺癌患者突变率高于回族患者，这一结论在一定程度上可以解释在临床治疗回族晚期非小细胞肺癌患者过程中，应用EGFR-TKI效果不明显的原因。

EGFR基因突变在NSCLC治疗中存在着重要的临床意义，在对肺癌患者的治疗过程中发现，靶向药物在肺癌患者治疗过程中的疗效个体差异较大。本研究提供了回族NSCLC的EGFR突变率信息，可以为宁夏地区在肿瘤领域工作的医护人员提供重要信息。宁夏回族自治区位于中国大陆西北部，经济基础仍相对落后，通过有效的方式筛选出不能从靶向治疗获益的肺癌患者，从而减轻该部分患者及其家庭的经济负担，节约医疗资源。

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关于撰稿的要求

来稿应具先进性、科学性和逻辑性。来搞应做到数据可靠、论点明确、结构严谨、文字通顺。论著、实验研究、临床研究、调查研究等一般不少于6 000字(不包括图表和参考文献)，经验交流不少于4 000字，综述、讲座等不少于5 000字，病例报告等一般不超过1 500字(包括图表和参考文献)。

An Analysis of EGFR Mutation and Clinicopathologic Characteristics in Hui and Han Patients with Non-small-cell Lung Cancer

YUANLizhi,ZHOUWei,MENGFanzhen.

DepartmentofRespiratoryDiseases,CardiovascularandCerebrovascularDiseaseHospitalofNingxiaMedicalUniversity,Yinchuan750002，China

ZHOUWei，Email：zhw0306@126.com

Objective To discuss the correlation of EGFR (epidermal growth factor recepor) mutation differences and clinicopathologic features between Hui and Han lung cancer patients.Methods Collect 218 cases of non-small cell lung cancer (NSCLC) patients with complete clinical data that were diagnosed from September，2011 to September，2015 in our hospital.These patients have been tested completely by the means of biopsy,lymph node biopsy,malignant pleural effusion centrifugation,etc.The correlation between EGFR gene mutation between Hui and Han nationalities as well as its relation with different clinical and pathological types were analyzed.Results Among the 218 cases,EGFR gene mutation of Han was 40.52%，while Hui was 21.53%.The difference was statistically significant (P<0.05).The EGFR gene mutation rate of Han female was 48.49%,which was higher than that of men which was 34.48%.The EGFR mutation rate of non-smoking patients was 55.88%,which was higher than that of smoking patients which was 28.24%.The EGFR mutation rate of adenocarcinoma patients was 51.22%,which was higher than that of non-adenocarcinoma which was 28.17%.All of these differences were statistically significant (P<0.05).Among the 65 cases of Hui patients,the EGFR gene mutation rate of those with adenocarcinoma was 26.32%,which was higher than that of non-adenocarcinoma patients which was 14.81%.The difference was statistically significant (P<0.05).Besides,the mutation rate of Hui cancer patients had no correlation with age,smoking history and gender.Conclusion The EGFR gene mutation rate was higher in women,non-smoking and adenocarcinoma cancer patients in Han.In Hui,the adenocarcinoma mutation rate was relatively high，but has no correlation with age,smoking history and gender.In conclusion，the EGFR mutation rate of Han was higher than that of Hui.

Non-smallcelllungcancer;EGFR;TKI;Hui

10.13621/j.1001-5949.2017.06.0484

宁夏医科大学总医院心脑血管病医院，宁夏 银川 750002

袁立志(1983-)，男，硕士研究生，主治医师，从事呼吸系统相关疾病的诊断和治疗研究方向。

周玮，Email:zhw0306@126.com

http://kns.cnki.net/kcms/detail/64.1008.R.20170614.1314.006.html

R734.2

A

2016-05-05 [责任编辑]马兴忠