低剂量顺铂与紫杉醇联合用药对结直肠癌细胞迁移、凋亡的影响及机制

张国玲，张秀丽，张鑫( 天津医学高等专科学校，天津 300； 武警后勤学院附属医院)



·基础研究·

低剂量顺铂与紫杉醇联合用药对结直肠癌细胞迁移、凋亡的影响及机制

张国玲1，张秀丽1，张鑫2
(1 天津医学高等专科学校，天津 300222；2 武警后勤学院附属医院)

目的 研究低剂量顺铂与紫杉醇联合用药对结直肠癌细胞株LOVO和SW480迁移及凋亡的影响，并探讨其可能机制。方法 将结直肠癌细胞株LOVO和SW480各分为五组，对照组加入PBS，顺铂组加入4 μg/mL顺铂，紫杉醇组加入200 μg/mL紫杉醇，联合1组加入4 μg/mL顺铂与200 μg/mL紫杉醇，联合2组加入1 μg/mL顺铂+200 μg/mL紫杉醇，通过细胞划痕实验测算各组细胞划痕愈合率，通过流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况，通过Western blotting法检测细胞周期蛋白CyclinD1和细胞凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3表达。结果 对照组、顺铂组、紫杉醇组LOVO细胞划痕愈合率分别为(82.50±1.58)%、(10.00±3.65)%、(15.00±4.90)%，对照组与顺铂组、紫杉醇组比较，P均<0.001。对照组、顺铂组、紫杉醇组LOVO细胞凋亡率分别为(3.16±2.04)%、(88.81±2.74)%、(57.32±3.98)%，对照组与顺铂组、紫杉醇组比较，P均<0.01。对照组、顺铂组、紫杉醇组SW480细胞划痕愈合率分别为(87.50±2.19)%、(17.00±2.67)%、(22.00±5.92)%，对照组与顺铂组、紫杉醇组比较，P均<0.01。对照组、顺铂组、紫杉醇组SW480细胞凋亡率分别为(2.08±3.01)%、(76.40±3.12)%、(40.3±4.84)%，对照组与顺铂组、紫杉醇组比较，P均<0.01。联合1组处理24 h后，LOVO和SW480细胞几乎全部死亡；联合2组处理24 h后，LOVO和SW480细胞凋亡率高达(98.65±5.06)%、(91.4±4.87)%，与对照组相比，P均<0.01；顺铂组、紫杉醇组、联合1组、联合2组CyclinD1表达均降低，Cleaved Caspase-3蛋白表达升高，顺铂组、紫杉醇组分别与联合1组、联合2组比较，P均<0.05。结论 低剂量顺铂与紫杉醇联合可显著抑制结直肠癌细胞株LOVO和SW480的迁移，并诱导细胞凋亡；其机制可能与联合用药降低细胞周期蛋白CyclinD1表达，上调细胞凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3蛋白表达有关。

结直肠癌；顺铂；紫杉醇；细胞迁移；细胞凋亡；细胞周期素D1；半胱氨酸蛋白酶3

结直肠癌发病率居全球第四位[1]，易发生远处转移，病死率高。顺铂和紫杉醇是目前最常见的治疗肿瘤化疗药物，对肺细胞癌[2]、卵巢癌[3]、膀胱癌[4]、鳞状细胞癌[5]及淋巴瘤[6]等均有较好的治疗效果，但使用一段时间后由于肿瘤细胞耐药性增强而疗效受到一定影响。细胞周期相关蛋白调节失控与肿瘤的发生发展及耐药密切相关。细胞周期素D1(CyclinD1)是细胞周期的重要成员之一，调控细胞由G1期向S期的过渡，CyclinD1活性上调见于多种恶性肿瘤的发生发展过程。半胱氨酸蛋白酶(Caspase)是一组在胞质中存在而结构上与半胱氨酸相关的蛋白酶，可特异性地断开天冬氨酸残基的肽键。……