当归补血汤抗肿瘤作用研究进展*

王艳杰 康芯荣 张雨薇 孙 阳 代巧妹*

当归补血汤抗肿瘤作用研究进展*

王艳杰①康芯荣①张雨薇①孙 阳①代巧妹①*

肿瘤之治关键在于明辨邪正之强弱，以相应取法来扶正与祛邪。在肿瘤治疗中,补益气血方剂的扶正固本作用是中医药治疗肿瘤的优势之一。具有扶正固本，增效减毒作用的当归补血汤在抗肿瘤治疗中占有举足轻重的地位。为此，以实验研究发展的时间先后顺序为主线，介绍其抗肿瘤作用的发展历程和研究现状，其结果表明，无论是单独使用当归补血汤，还是与其他药物联合或与其他方剂合用均表现出一定的抗肿瘤作用。故综合分析梳理当归补血汤的增效减毒与机体保护、抑制肿瘤转移、抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡、影响肿瘤细胞膜代谢、影响肿瘤细胞信号通路转导、影响肿瘤细胞端粒酶活性等6个方面的抗肿瘤作用的机制，并对当归补血汤的发展前景给予展望，为后续研究提供必要的文献参考。

当归补血汤；肿瘤；进展；机制

王艳杰,女,(1973- ),博士后，副教授，硕士生导师。黑龙江中医药大学基础医学院，从事医学细胞生物学、分子生物学、基因工程等教学及中药抗肿瘤作用机制的研究。

中医理论指导下的肿瘤治疗依照辨证论治，在应用安全和有效的抗肿瘤中草药的同时，若能调动机体免疫机能，就能使机体充分发挥抵抗肿瘤的作用，而当归补血汤在肿瘤临床治疗的作用主要是扶正固本和增效减毒[1-3]。

近年来，关于当归补血汤药理实验研究的报道逐年递增，1979-1990年的文献报道主要集中在改善血流变、增强免疫及抗损伤方面，而1990-2000年的文献报道中有关当归补血汤对免疫系统、血液系统、心血管系统以及肝脏等作用的研究颇多，其研究表明，当归补血汤具有免疫促进、保护心肌、补血、抗自由基和耐缺氧等多方面的药理作用。基于此，就2000年以来国内关于当归补血汤抗肿瘤的体内外试验、当归补血汤联合放射治疗或化疗抗肿瘤以及当归补血汤和其他经方的研究进行综述。

1 当归补血汤在肿瘤治疗中的作用及地位

张蕴芬等[4-6]较早提出当归补血汤(黄芪和当归两味药，以5∶1比例组成)增强免疫及抗损伤方面，其研究指出，当归补血汤不仅对于T、B淋巴细胞免疫功能有一定的促进作用，而且能促进小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬作用。王以诚等[7]首次对脑肿瘤术后患者静脉滴注当归补血汤注射液，观察E玫瑰花结形成百分率(E-RFC)和淋巴细胞转化率(LTP)，结果显示：当归补血汤对提高脑肿瘤患者术后细胞免疫具有一定治疗效果。王敏玉等[8]用当归补血汤治疗21例癌症患者，用酸性酯酶染色法观察患者血涂片，结果显示，当归补血汤使患者白细胞总数明显增加，T淋巴细胞的酯酶活性明显增强，酯酶与T淋巴细胞的细胞毒功能有密切关系。窦骏等[9]研究表明，当归补血汤具有提高小鼠脾细胞自然杀伤(NK)活性和IL-2的产生能力。陈玉春[10]通过研究证明，当归补血汤有显著促进血虚小鼠脾淋巴细胞产生白细胞介素-2(IL-2)的作用，并对小鼠巨噬细胞具有活化作用[11]。

随着我国对中药开发的重视程度的不断提高，当归补血汤的现代应用与研究步入新的篇章，在临床应用上占有举足轻重地位。当归补血汤应用于白细胞减少症、原发性血小板减少性紫癜、痹证、足底痛、子宫发育不良性闭经、更年期综合征、子宫肌瘤、老年性皮肤瘙痒以及牙龈出血等，而当归补血汤抗肿瘤治疗也开始了新的里程[12]。

2 当归补血汤抗肿瘤作用实验研究

王平等[13]利用HPLC-DAD-MS研究当归补血汤的化学成分，在初步定性10个化合物中，来自于黄芪的黄酮类，来自于当归的苯酞类和来自于黄芪的三萜皂苷均是当归补血汤的主要活性成分。

汪群红等[14]则对S180模型小鼠用自制相当于生药115 kg/l的不同剂量当归补血汤分组实验，计算抑瘤率及生命延长率，其结果表明，当归补血汤有一定的抑瘤作用，并能延长荷瘤小鼠生命。申宇玲等[15]用自制当归补血汤不同剂量灌胃Lewis肺癌的C57BL/6小鼠，20 d后取瘤称重，抑瘤率最高为15.03%，其结果表明，当归补血汤有抑制肺肿瘤的作用。各项实验表明，当归补血汤及其成分有一定的抗肿瘤作用。

曹娟等[16]自制水煎液浓度生药1.2 g/ml连续灌胃给药H22模型小鼠，考察当归补血汤对荷瘤小鼠补血作用，结果提示，当归补血汤能有效修复癌症导致的骨髓造血干细胞的造血功能，延缓癌性因子对骨髓造血细胞抑制造成凋亡的速度，以及对抗癌性贫血的发生。

张三印等[17]将自制当归补血汤水煎剂浓缩成含0.1 g/ml生药的当归补血汤(DBD)受试液，离心除菌后以1640培养基稀释后，以高、中、低3个剂量组培养经处理后的人脐静脉内皮细胞系和人肺癌细胞系24 h，研究结果表明：当归补血汤能诱导不同的内皮细胞分泌血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)，VEGF能促进正常内皮细胞增殖，但却抑制肿瘤内皮细胞的增殖。

孙玉敏等[18]自制相当于生药l g/ml的当归补血汤，连续灌胃给药于肿瘤直径0.3 cm和肿瘤直径0.6 cm的两组EL-4瘤株模型小鼠，每日测量瘤体积，15 d后观察其存活时间，结果显示，肿瘤直径0.3 cm组小鼠肿瘤生长速度显著减慢，生存时间显著延长；肿瘤直径0.6 cm组与空白对照组比较肿瘤生长速度无差异，生存时间无明显延长，提示肿瘤生长早期单独应用当归补血汤治疗有一定疗效。

实验表明，当归补血汤的抗肿瘤作用机制是多方面的，随着研究的深入都将会得到总结。在当归补血汤抗肿瘤作用方面，要考虑肿瘤的活性及肿瘤的生长时间，肿瘤晚期单独应用传统当归补血汤作为辅助性用药是否合适还将有待研究探讨。

3 当归补血汤联合其他药物治疗抗肿瘤作用的研究

陈鹊汀等[19]自制相当于生药1.2 g/ml的当归补血汤，分成阴性对照组、环磷酰胺(cytoxan，CTX)组、当归补血汤+CTX组和当归补血汤组，建立S180荷瘤小鼠模型，连续给药10 d后处死，测胸脾指数发现，CTX化疗小鼠的胸腺和脾脏指数明显低于阴性组的胸脾指数，而联合用药组胸脾指数明显升高。另测得NK细胞杀伤率、T淋巴细胞增殖能力以及巨噬细胞吞噬功能在CTX组中均明显下降，而联合用药组的以上免疫学指标的数值均显著增加。

陈鹊汀等[20]对当归补血汤对阿霉素(adriamycin，ADM)化疗S180荷瘤小鼠的增效减毒作用的研究中，以对照组、ADM组、当归补血汤(高、中剂量)+ADM组给药13 d后将小鼠处死，计算抑瘤率、有核细胞计数、骨髓DNA影响、心肌超氧化物歧化酶(super oxide dlsmutase，SOD)活力以及丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量，其研究结果表明：当归补血汤对ADM抗移植瘤生长具有一定增效作用，又可提高ADM化疗荷瘤小鼠的抗氧化酶活性和减少脂质过氧化产物的生成，达到保护其心脏的作用，还有减毒作用，能对抗ADM对骨髓造血功能的抑制。

张宇峰等[21]用当归补血汤联合皮下注射重组人粒细胞刺激因子可以防治乳腺癌化疗后对骨髓抑制，降低对白细胞、粒细胞、血红蛋白及血小板的损害程度，对机体化疗后的副作用具有保护作用。

上述实验表明，放射治疗和化疗抗肿瘤过程中使用当归补血汤不仅可以提高免疫力、减少对机体的伤害(增效减毒作用)，还能促进抑制肿瘤的作用。

4 当归补血汤与其他经方合用抗肿瘤作用的研究

在临床上，当归补血汤与其他经方合用以提高疗效。欧阳兵等[22]静脉滴注参芪扶正注射液联合内服当归补血汤，与化疗同步治疗不同癌症患者37例的研究显示，化疗组30例患者只应用西药，观察药物疗效，结果表明，联合用药可以缓解化疗导致的胃肠道不适反应，提升患者抵抗力，促进骨髓的再生功能；而四君子汤与当归补血汤合用对环磷酰胺化疗荷瘤小鼠保护作用的研究结果表明，四君子汤与当归补血汤合用后能更好的抵抗化疗对细胞免疫功能的影响[23]。参附注射液与当归补血汤联合常规化疗治疗急性髓细胞性白血病的研究结果表明，联合用药后，患者造血功能提高，白细胞数、血小板及血红蛋白含量均显著提高，肿瘤坏死因子和IL-2表达水平量上升，提示联合用药不仅能提高机体的免疫力，还可以杀死肿瘤细胞[24]。

5 当归补血汤抗肿瘤作用机制分析

明代名医张景岳指出：“脾肾不足及虚弱失调之人，多有积聚，癓瘕之病”。肿瘤的发生发展与机体的免疫有着密切的关系，肿瘤患者的体液免疫与细胞免疫功能均受到了抑制，因此提高机体免疫力是比较普遍的抗肿瘤机制[25]。当代抗肿瘤治疗主要在于诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤端粒酶活性、抑制肿瘤血管的生长、诱导肿瘤细胞分化、逆转肿瘤细胞多药耐药性以及提高机体免疫力等方面[26]。当归补血汤抗肿瘤作用实验研究及临床研究的多样性，使得当归补血汤抗肿瘤作用机制有了新突破。

通过对文献综合分析，当归补血汤与肿瘤之间的作用机制绝不是单一的，总体有下述作用。

5.1 增效减毒与机体保护作用

当归补血汤能提高小鼠血液中白细胞、红细胞、血红蛋白以及免疫球蛋白Ig A、Ig G和Ig M的含量，调节辅助性T细胞家族成员Th1、Th17亚群数，提高细胞免疫效能；降低对T细胞分化、成熟有抑制作用的Th2、Treg细胞的含量，对环磷酰胺损伤小鼠起到保护作用[27]。当归补血汤含药血清抑制体外培养的巨噬细胞白血病RAW264.7细胞株分泌肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、细胞间粘附因子1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)，而氧化低密度脂蛋白对巨噬细胞白血病RAW264.7细胞株TNF-α、ICAM-1因子具有促进分泌的作用[28]。TNF-α和ICAM-1是巨噬细胞产生的炎性因子标志物。炎性因子的释放对机体造成一定的损伤，而当归补血汤对机体具有一定的保护作用。

5.2 抑制肿瘤转移的作用

肿瘤细胞的转移与肿瘤细胞从组织脱离进入血液循环有关。血液的流动性降低，粘度加大，对肿瘤细胞的转移有促进作用。当归活血，黄芪扩张血管，影响荷瘤小鼠的血流变。在给予生药1.5 g/ml的剂量下，加味当归补血汤能显著性的降低血液的粘度，降低血小板凝集率，影响脱落于血液中的肿瘤细胞向血管内皮细胞的迁移，发挥抗肿瘤作用[29]。当归水提液能抑制体外培养的小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16-BI6与细胞外基质的粘附能力，降低其穿越基底膜的运动能力，从而抑制黑色素瘤高转移细胞株B16-BL6的转移[30]。

5.3 抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡

100 mg/ml的当归补血汤在体外分别与人肝癌H22，人红白血病K562，小白鼠淋巴瘤Yac-1的3种不同肿瘤细胞培养48 h，给药后细胞变小，变圆，细胞表面粗糙，部分细胞破损，表明当归补血汤具有直接抑制肿瘤细胞增殖的作用[31]。李军昌等[32]研究表明：灌胃4 h后的兔当归补血汤含药血清(每孔150 μl)与人肝癌细胞SMMC-7721体外培养68 h，具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。当归补血汤口服液和当归补血汤口服液荷瘤小鼠含药血清，在体外作用与肺癌A549细胞株共培养48 h和72 h后，采用MTT法检测细胞生长状态，采用流式细胞仪检测细胞周期细胞，结果表明：当归补血汤口服液和当归补血汤口服液荷瘤小鼠含药血清具有直接抑制肿瘤细胞生长的作用，且48 h后细胞生长周期停滞在细胞分裂间期与分裂期的过渡期G2/M期，细胞增殖不能进入分裂期，同时凋亡细胞增多[33-34]。

5.4 影响肿瘤细胞膜的代谢

唾液酸广泛存在于各种生物的组织中，是构成细胞表面的复合糖质的组成成分，通常在糖蛋白和糖脂的末端以糖甙的形式存在。唾液酸可影响物质转运过程、抗原决定簇的暴露及膜表面受体功能等。肿瘤细胞表面糖链末端唾液酸的脱落，预示肿瘤细胞将被清除。汪群红等[35]以含生药1.5 kg/L浓度的当归补血汤，饮水途径给药S180荷瘤小鼠10 d，摘眼球取血，采用比色法检测荷瘤小鼠血清中唾液酸的含量，其结果表明：血清中唾液酸水平升高，原因可能与肿瘤细胞唾液酸的脱落有关。

5.5 影响肿瘤细胞的信号通路

腾佳琳等[36]发现，当归补血汤能显著提高小鼠心肌细胞cAMP/cGMP比值，而cAMP是细胞第二信号，参与许多细胞信号转导的级联反应。当归补血汤对辐射损伤的骨髓细胞的造血功能具有促进作用，也用于肿瘤化放疗后造血免疫机能的恢复。骨髓细胞的增殖与Notch信号通路有关，Notch信号通路包括Notchl受体及配体蛋白Jagged1以及下游靶基因HES1等。王晓玲等[37]用当归补血汤血清观察γ射线照射小鼠骨髓细胞的形态学及Notch信号相关基因的表达，其结果显示：当归补血汤降低γ射线照射小鼠骨髓细胞所致的细胞凋亡、造血组织减少等现象的产生，促进造血产生。

5.6 影响肿瘤细胞端粒酶活性

张玉红等[38]以红芪90 g(黄氏的一种)、当归30 g煎煮制成药液，灌胃S180荷瘤小鼠，剂量12 g/(kg·d)。给药18 d后，取肿瘤组织，检测端粒酶活性，其结果表明，当归补血汤抑制荷瘤小鼠的肿瘤组织中肿瘤细胞中端粒酶的活性，从而抑制肿瘤的生长，促进肿瘤细胞的调亡[39]。

6 结论与展望

古籍中中医对肿瘤的形成原因早有记载。如《内经》以“邪气居其间”“久而内着”描述肿瘤形成之原因。宋《圣济总录》谓：“瘤之为义，留滞而不去。中医学认为肿瘤发生之因主要有气滞、血瘀、痰凝、湿聚、邪毒蕴热及正气虚弱等因素。囿于其病机病因之异，临证当以辨证论治为要。

肿瘤之治关键在于明辨邪正之强弱，以相应取法施扶正与祛邪之治。在肿瘤治疗中，以补益气血方剂扶正固本是中医药治疗肿瘤的优势之一。目前，国内在当归补血汤抗肿瘤作用方面的研究并不多，但当归补血汤中的中药组分黄芪、当归抗肿瘤的研究成果及当归补血汤的研究近况表明，当归补血汤及其组成的成分不但能减轻放化疗不良反应、改善生存质量，还具有一定的抗肿瘤作用。相信当归补血汤在抗肿瘤作用方面定能开辟可喜的前景。

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The research progress of antitumor effect of Angelicae Sinensis Decoction For Supplementing Blood/

WANG Yan-jie, KANG Xin-rong, ZHANG Yu-wei, et al//

China Medical Equipment,2017,14(8):165-169.

The key lies in the treatment of tumor is to clearly discriminate the strong and weak of evil and positive, and the corresponding method was used to support positive and eliminate evil. The function of supporting healthy energy of invigorating qi and blood prescription was one of the advantages for treating cancer by using Chinese medicine. Angelicae Sinensis Decoction for Supplementing Blood possessed the function of supporting healthy energy and effect-enhancing and toxicity-reducing, and it was a pivotal role in antitumor treatment. Therefore, the chronological order of experimental research was adopted as the main line, the development and research status of anti-tumor effect were introduced in this paper, the results showed that single use of the Angelicae Sinensis Decoction for Supplementing Blood, and the combination with other drugs or other prescriptions have antitumor effect in some degree. Depended on above reasons, the comprehensive analysis of antitumor mechanism of Angelicae Sinensis Decoction for Supplementing Blood included 6 aspects: effect-enhancing and toxicity-reducing and protecting body: inhibited tumor metastasis, inhibited proliferation of tumor cell and induced apoptosis of tumor cell, affected the metabolism of tumor cell membranes, affected the transduction of signaling pathways of tumor cell, and affected the telomerase activity of tumor cell. Besides, this paper took a prospection for the development of Angelicae Sinensis Decoction for Supplementing Blood and provided necessary reference documents for subsequent researches.

Angelicae Sinensis Decoction for Supplementing Blood; Cancer; Progress; Mechanism

School of Basic Medicine, Heilongjiang University Of Chinese Medicine, Harbin 150040, China.

1672-8270(2017)08-0165-05

R243

A

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2017.08.046

2017-03-28

2012黑龙江省博士后科学基金(LBH-Z12258)“夏莲花汤对乳腺癌抗肿瘤作用及活性物质的拆方与配伍研究”；2013中国博士后(54批)科学基金(2013M541427)“不同配伍对白花蛇舌草抗肿瘤作用及化学成分的比较研究”

①黑龙江中医药大学基础医学院 黑龙江 哈尔滨 150040

*通讯作者：1291666828@qq.com