猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立与应用

徐引弟,鲁智远，王治方，李海利，张青娴,朱文豪，焦文强，郎利敏，王克领

(河南省农业科学院 畜牧兽医研究所，河南 郑州450002)

猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立与应用

徐引弟,鲁智远，王治方，李海利，张青娴,朱文豪，焦文强，郎利敏，王克领

(河南省农业科学院 畜牧兽医研究所，河南 郑州450002)

为了建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)快速、特异的检测方法，减少猪流行性腹泻(PED)给养猪业带来的损失，根据PEDV的S基因序列设计1对引物，优化扩增条件，建立了针对PEDV的RT-PCR检测方法。结果显示，建立的检测方法可特异地检测出PEDV。应用建立的检测方法对2016年河南地区38家发生腹泻的猪场的256份病料进行检测，结果表明，阳性猪场为30家，阳性样本为157份，检出率高于试纸条检测方法。可见，建立的检测方法特异性强，可用于PEDV感染疑似病例的诊断及流行病学调查。

猪流行性腹泻； RT-PCR； 检测

猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea，PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的以腹泻、呕吐、脱水为主要特征的一种高度接触性肠道传染病，各年龄段的猪均可发生，哺乳仔猪发病率可达100%，1周以内出生仔猪死亡率高达80%～100%。1971年首次在英国发现PED，2010年韩国首次报道PEDV的S基因发生变异。我国自2010年10月流行并暴发PED，给中国东南省份的养猪场带来了毁灭性的经济损失。从2010年10月开始，由变异PEDV引起的PED给世界养猪业造成了巨大的经济损失。在一些接种过经典弱毒株CV777疫苗的猪场也报道发生PED[1-3]。我国2010年10月暴发PED，2011—2013年疫情从蔓延到有所缓和，2015—2016年疫情有所反弹，并且预计未来 PED会继续流行，呈常态化，PEDV将继续变异和演化，不可避免会出现新毒株[4-5]。……