三种鸡菌属真菌核苷及嘌呤碱基类成分含量测定△

高艳云，张园娇，张倩，陈建伟*

(1.南京中医药大学 附属医院，江苏 南京 210029；2.南京中医药大学 药学院，江苏 南京 210023)

·基础研究·

高艳云1,2，张园娇2，张倩2，陈建伟2*

(1.南京中医药大学 附属医院，江苏 南京 210029；2.南京中医药大学 药学院，江苏 南京 210023)

1 仪器与试药

1.1仪器

Waters2695高效液相色谱仪(Waters2489型PDA检测器，Empower工作站)；BT1250电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司)；KH-500DB型数控超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司)；SAGA-10TQ易普易达超纯水仪(南京易普易达科技发展有限公司)。

1.2试药

中医药大学中药资源学教研室陈建伟教授鉴定。

对照品：黄嘌呤(批号：1001279304)、腺苷(批号：101183448)、肌苷(批号：1001271021)、次黄嘌呤(批号：1001392976)、鸟苷(批号：1001662525)、尿苷(批号：1001290893)、胞苷(批号：101069370)购于SIGMA公司。

甲醇(Fisher chemical，批号：155175)；磷酸(南京化学试剂有限公司，批号：13112612030)；水为去离子水。

2 方法与结果

2.1色谱条件

采用WatersXbridgeC18柱(250mm×4.6mm，5μm)，以甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相，梯度洗脱为0～10min，2%～5%甲醇；10～18min，5%～10%甲醇；18～25min，10%～25%甲醇；25～35min，25%～80%甲醇；流速为0.8mL·min-1，柱温为30℃，检测波长为260nm，进样量为10μL。

2.2对照品和供试品溶液的制备

2.2.1混合对照品溶液制备 精密称取次黄嘌呤、黄嘌呤、胞苷、腺苷、鸟苷、尿苷、肌苷的对照品适量，用15%甲醇水溶液配制成质量浓度分别为79.84、402.00、120.12、201.80、80.48、80.00、160.00μg·mL-1的混合对照品溶液。

2.3方法学考察

2.3.2 线性关系考察 分别精密吸取混合对照品溶液0.1、0.5、1.0、1.5、2.0置10mL容量瓶中，加15%甲醇定容至刻度，离心后取10μL注入高效液相色谱仪，按2.1项下色谱条件进行分析，以峰面积Y对进样量X进行回归计算，回归方程见表1。

注：1.胞苷；2.次黄嘌呤；3.黄嘌呤；4.尿苷；5.腺苷；6.鸟苷；7.肌苷。图1 混合对照品和鸡供试品溶液的HPLC图

对照品回归方程线性范围/μg·mL-1r次黄嘌……