色素上皮衍生因子对缺氧条件下H9C2心肌细胞保护作用*

王 柱，周中新，关秋华，张 昊，刘志伟，董红燕，张中明△

(1.徐州医科大学附属医院心胸外科，江苏徐州 221006；2.徐州医科大学生物化学与分子生物学研究中心，江苏徐州 221004；3.徐州医科大学形态学科研实验中心，江苏徐州 221004)

论著·基础研究

色素上皮衍生因子对缺氧条件下H9C2心肌细胞保护作用*

王 柱1，周中新1，关秋华2，张 昊1，刘志伟3，董红燕3，张中明1△

(1.徐州医科大学附属医院心胸外科，江苏徐州 221006；2.徐州医科大学生物化学与分子生物学研究中心，江苏徐州 221004；3.徐州医科大学形态学科研实验中心，江苏徐州 221004)

目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对H9C2心肌细胞在低氧无血清条件下的保护作用及其可能的机制。方法体外培养H9C2细胞进行低氧无血清处理，将细胞分为对照组(H9C2)、缺氧组(缺氧+H9C2)、PEDF组(缺氧+H9C2+PEDF)、残粒体分裂抑制剂(Medivi-1)组(缺氧+H9C2+Mdivi-1)。TUNEL染色检测H9C2心肌细胞凋亡率；Western blot检测动力相关蛋白1(Drp1)、活化半胱天冬酶-3 (Cleaved-Caspase3)的蛋白水平；电镜及MitoTracker Red检测线粒体形态；采用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测线粒体膜电位，MitoSOXTM检测线粒体活性氧簇(ROS)水平。结果缺氧诱导H9C2细胞线粒体分裂，缺氧组(6 h)与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)，PEDF减少缺氧条件下线粒体分裂，PEDF组与缺氧组(6 h)比较差异有统计学意义(P<0.05)，PEDF和Mdivi-1可以减少缺氧条件下(24 h)细胞凋亡，与缺氧组(24 h)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论PEDF通过抑制缺氧条件下H9C2细胞线粒体分裂减少细胞凋亡。

细胞凋亡；缺氧；心脏；H9C2细胞；色素上皮衍生因子;动力相关蛋白1;线粒体分裂

急性心肌梗死(acute myocardium infarction，AMI)是一种较常见的心血管疾病，对其的有效防治是医学界关注的热点[1-2]。AMI是持续而严重的心肌缺血所致的急性心肌细胞坏死[3]，抑制缺血心肌细胞的凋亡与坏死及提高AMI预后是治疗的关键。色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor，PEDF)作为重要的内源性血管抑制因子，在多个组织中均有表达，并具有多种生物活性[4-6]。……