菊花提取方式的研究与应用

郭黎媛，靳吉寅，段慧玲

（1.山西杏花村汾酒厂股份有限公司技术中心，山西汾阳032205； 2.山西杏花村汾酒厂股份有限公司质量检测中心，山西汾阳032205）

菊花提取方式的研究与应用

郭黎媛1，靳吉寅1，段慧玲2

（1.山西杏花村汾酒厂股份有限公司技术中心，山西汾阳032205； 2.山西杏花村汾酒厂股份有限公司质量检测中心，山西汾阳032205）

菊花是菊科植物，属于药食两用药材，是竹叶青酒中配制药材之一。本试验对菊花中的总黄酮的提取方法进行了研究，以芦丁为标准品对提取液中的总黄酮含量进行测定，测定结果表明，由超声辅助提取得到的菊花总黄酮含量为4.2%，冷浸法提取得到的菊花总黄酮含量为3.3%，超声辅助提取工艺优于冷浸法。并且将菊花提取液在汾酒基酒中进行添加试验，所得酒体清亮，微黄透明，菊花芳香怡人，口感醇和，悠长。

配制酒； 菊花； 提取； 总黄酮

菊花是菊科植物，属于药食两用药材。菊花具有多种药理作用：疏散风热、明目、清热解毒。主要治疗头痛、眩晕、目赤、心胸烦热、疔疮、肿毒等症。现代药理研究表明，菊花具有治疗冠心病、降低血压、预防高血脂、抗菌、抗病毒、抗炎、抗衰老等多种药理活性。菊花的化学成分比较复杂，其中黄酮类化合物是其主要有效成分。目前研究表明，黄酮类化合物能防治心脑血管系统和呼吸系统疾病，具有抗炎抑菌、降血糖以及增强免疫功能等药理作用。通过文献资料的查询，关于菊花中总黄酮的提取文献较多，本试验结合菊花品种与在汾酒中的感官应用进行研究，对菊花总黄酮的提取工艺选用超声辅助提取方法进行正交试验，最终确定最佳提取工艺。

1 材料与方法

1.1 材料、试剂与仪器

样品：菊花；65%vol汾酒；45%vol汾酒。

试剂：乙醇、乙醇（AR）、氢氧化钠、硝酸铝、亚硝酸钠等均为市售分析纯；蒸馏水；芦丁对照品（Dr.ehrenstorfer Gmbh）；Rutin hydrate C 168000；Lot:80212 0.5 g 98.0%R-code 36137138S-code 22-25。

仪器设备：紫外可见分光光度计(uv-2450日本岛津公司)；超声波清洗机（LQ-300DE昆山超声波仪器有限公司）；电子天平(梅特勒电子天平)；具塞三角瓶；玻璃棒；烧杯；微量进样器；电子秤；移液管；量筒；滤纸；漏斗；容量瓶。

1.2 实验方法

1.2.1 标准曲线的绘制

1.2.1.1 芦丁标准液的制备

精密称取芦丁对照品26.32 mg，用体积浓度70%的乙醇溶解于100 mL容量瓶中，定容后摇匀，制成质量浓度为263.2 mg/L的芦丁标准品溶液。取芦丁标准溶液，以相应不加标准品溶液为空白，用紫外可见分光光度计在200～600 nm波长范围内进行全波长扫描得芦丁标准品最大吸收波长为λmax=510 nm。

1.2.1.2 芦丁标准曲线的绘制

精确量取上述芦丁标准品溶液0 mL、2.0 mL、4.0 mL、6.0 mL、8.0 mL、10.0 mL、12.0 mL，分别置于50 mL容量瓶中，加5%亚硝酸钠溶液2.0 mL，摇匀放置6 min，加10%硝酸铝2.0 mL，摇匀放置6 min，加10%氢氧化钠溶液20.0 mL，再加水至刻度，摇匀放置15 min，配制成标准曲线工作液。以相应的试剂溶液为空白，在510 nm处测定吸光度，以溶液质量浓度C为横坐标，吸光度A为纵坐标，线性回归得到工作曲线为：A=12.268C-0.0025，R2=0.9998(N=6)。结果见图1。

图1 芦丁标准曲线

1.2.2 菊花超声提取液制备方法

准确称取烘干至恒重的菊粉X g，按试验中优选的料液比加入Y%vol乙醇，按限定的时间和温度进行超声波提取后冷却过滤，取待测液1 mL于50 mL容量瓶中，定容。用分光光度计在510 nm处测定其吸光度,并按1.2.1.2中的方法检测菊花总黄酮含量。

1.2.3 提取条件选择

根据初步预试验结果,采用L16(4)4正交试验设计正交表,对乙醇浓度、提取时间、提取温度、料液比4因子在4个水平上进行优选,结果采用直观分析和方差分析。选出提取效果较好的组合，具体见表1。

表1 菊花提取物试验方法

2 结果与分析

2.1 正交试验及试验结果分析（见表2和表3）

总平均数=0.301625，总离差平方和QT=0.036234。

2.2 提取工艺条件的确定

由正交试验数据可知，根据R值大小，判断因素对试验结果影响的主次顺序：D＞A＞C＞B，最优组合水平为D3A4C4B3，根据方差分析得，在α=0.1的显著水平下，可知因素D对试验结果有显著影响，其余3个因素则无显著影响。

通过正交试验结果直观分析和方差分析得出菊花总黄酮提取的最佳工艺条件为D3A4C4B3，即料液比 1∶20（g/mL），乙醇浓度 70%vol，提取温度60℃，提取时间50 min。

2.3 验证试验

由正交试验设计得到最佳提取工艺，并对最佳条件进行验证试验，在最优条件下超声波提取菊花中总黄酮吸光度值为0.453，计算得菊花中总黄酮含量，为4.2%。

表2 正交试验设计及结果

表3 方差分析

2.4 冷浸提取方法的对比及测定

按比例称取菊花,放入65%vol汾酒中,在避光条件下放置30 d，然后过滤得滤液，取待测液1 mL于50 mL容量瓶中，定容。用分光光度计在510 nm处测定其吸光度,并按1.2.1.2中的方法检测菊花总黄酮含量，测得吸光度值为0.397,计算得菊花中总黄酮含量，为3.3%。

2.5 菊花提取液在汾酒中的应用试验

2.5.1 基酒的确定

本试验选取优质汾酒为基酒，酒精度为45%vol。

2.5.2 提取液在酒中加量的确定

在基酒中将菊花提取液按0.5‰～5‰加入不同酒体中，按一定量加入后的酒体有明显改善,经项目组评酒员反复品评后，确定调味液的最佳添加量，保留了药材香和味的有效成分，而且增加了酒体口感的丰富度。酒体微黄，菊花芳香幽雅，酒体绵软协调，具有本品的特殊风格，可以在酒中使用。

2.5.3 不同浸提液在基酒中的感官品评结果(见表4)

表4 不同浸提液在基酒中的感官品评结果

3 结论

本试验通过对菊花提取工艺的研究，确定了使用超声提取技术从菊花中提取黄酮类物质，得到的优化条件为：料液比1∶20（g/mL），乙醇浓度70%vol，提取温度60℃，提取时间50 min。并且测得由超声辅助提取得到的菊花总黄酮含量为4.2%，冷浸法提取得到的菊花总黄酮含量为3.3%，此方法与传统提取法相比，时间缩短，提取率增加，并且在酒中的应用效果优于冷浸提取液。

[1]贾凌云,孙启时,黄顺旺.滁菊花中黄酮类化学成分的分离与鉴定[J].中国药物化学杂志,2003,13(3)：159-161.

[2]李英霞,彭广芳,王小梅,等.菊花的药理研究进展[J].时珍国医国药,1998,9(6)：580.

[3]斯琴格日乐,恩德,李英杰.怀菊花总黄酮的提取工艺及其抗氧化活性[J].光谱实验室,2013(2)：513-518.

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Extraction of Total Flavonoids from Chrysanthemum

GUO Liyuan1,JIN Jiyin1and DUAN Huiling2
(1.Technical Center of Xinghuacun Fenjiu Distillery Co.Ltd.,Fenyang,Shanxi 032205;2.Quality Inspection Center of Xinghuacun Fenjiu Distillery Co.Ltd.,Fenyang,Shanxi 032205,China)

Chrysanthemum is a kind of herb that has both medicinal and edible values,and is also one of the medicinal herbs used for producing Zhuyeqing liquor.In this study,the extraction of total flavonoids from chrysanthemum was investigated.Rutin was used as the standard to determine total flavonoids content in the extract.The determination results showed that,total flavonoids content in the extract by ultrasonic assisted extraction was 4.2%,and total flavonoids content in the extract by cold-soak extraction was 3.3%.Ultrasonic assisted extraction was better than cold-soak extraction.Besides,chrysanthemum extract was added in Fenjiu base liquor for experiments.The produced liquor was transparent and yellowish with pleasant aroma and enjoyable taste.

liqueur;chrysanthemum;extraction;total flavonoids

TS262.3；TS261.4

A

1001-9286（2017）10-0065-03

10.13746/j.njkj.2017145

2017-05-31

郭黎媛(1981-)，女，山西人，本科，工程师，从事保健酒新品研发工作。

优先数字出版时间：2017-07-19；地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20170719.1107.005.html。