降总胆红素、降甘油三脂、降尿酸和护肝保健茶包的研制

徐国良，袁菊如，涂招秀，李雄辉，胡居吾

（江西省科学院，江西南昌 330096）

降总胆红素、降甘油三脂、降尿酸和护肝保健茶包的研制

徐国良，袁菊如，涂招秀，李雄辉，胡居吾

（江西省科学院，江西南昌 330096）

研究了以茵陈、车前草、荷叶，碱为主要原料进行配制，筛选出保健茶的配方为茵陈3g、车前草3g、荷叶3g、碱0.3g。通过对原料的氧化性及药理作用进行综合评价、茶包确有降总胆红素，降甘油三脂、降尿酸和护肝保健作用。

茵陈；车前草；荷叶；碱；茶包；氧化性；药理作用

总胆红素高产生的原因及危害：总胆红素偏高主要是肝内疾患与肝外疾患引起的。肝脏疾患：急性黄疸型肝炎、急性黄色肝坏死、慢性活动性肝炎、肝硬化等。肝外的疾病：溶血型黄疸、血型不合的输血反应、胆囊炎、胆石症等。

甘油三酯高产生的原因及危害：甘油三酯是人的身体内部含量比较多的一种脂肪类，人体的器官组织都可以利用甘油三酯提供能量，肝脏可以进行甘油三酯的合成，在肝脏中贮存。如果甘油三酯升高，则表示肝脏堆积脂肪过多，就是脂肪肝。高甘油三酯是作为高血脂症的一种，对人体的主要危害主要是引起动脉粥样硬化、造成血管堵塞和形成血栓，但甘油三酯的血液浓度不偏太高时，人体对其没察觉，但当其一旦引起动脉粥样硬化，导致血管严重堵塞时便会危及生命。

尿酸高产生的原因及危害：人体尿酸来来源分为内源性和外源性两部分。其中，外源性尿酸占20%，是通过食物中的嘌呤经过肝脏氧化生成尿酸；内源性尿酸占80%，是体内核酸（DNA和RNA）进行氧化分解产生嘌呤，嘌呤再通过肝脏氧化生成尿酸。由此可知采取抗氧化措施，可以减少尿酸的产生。对控制尿酸而言，内源性代谢紊乱比外源性因素更重要。尿酸在体内堆积导致痛风。

1 实验部分

1.1 材料与试剂

茵陈、车前草、荷叶产地：购于江西南昌市黄庆栈药店；食用碱网购。

甲醇、无水乙醇、三氟乙酸、正己烷、Vc、二氯甲烷、BHT、乙酸乙酯、正丁醇、硝酸铝、氢氧化钠、亚硝酸钠、氯化铁、铁氰化钾和福林试剂均为分析纯，购于国药集团化学试剂有限公司；芦丁标准品、没食子酸标准品、二苯基苦味酰基苯肼（DPPH）均购于Sigma公司。

1.2 实验仪器

Vacucella 22L真空干燥箱，德国MMM公司；Ecan In finite M200PRO酶标仪，瑞士Tecan公司；Direct-Q3CHAO超纯水系统，美国密理博公司；ALPHA 1-2LDPLUS冷冻干燥机，德国Alpha公司；KQ-500B超声波清洗器：昆山市超声仪器有限公司；QRE-3000旋转蒸发器，上海荣生生化仪器厂；250B3高速多功能粉碎机，上海冰都电器有限公司；SHZ-Ⅲ循环水真空泵，郑州长城科工贸有限公司；分析天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司。

1.3 实验方法

1.3.1 工艺流程

以茵陈、车前草、荷叶，碱，作为一种苦丁茶被人们饮用，是我国传统中医药典籍中记载的药用植物资源，具有很好的开发利用价值。确定配方为；茵陈3g、车前草3g、荷叶3g，碱0.3g将干燥的茵陈、车前草、荷叶烘干、机械粉碎、加碱调配，包装茶包。

操作要点：①原料烘干、粉碎、将所用的植物原料烘干至水分含量低于5%，然后粉碎，过4目筛。②合料、拌匀按比例投入粉碎好的物料，混合拌匀。③包装以自动充填包装机，将物料先用纸袋包装，外层再以铝箔袋密封，每袋装料定量为9.5g。

1.3.2 茶包总黄酮含量的测定

黄酮含量的测定根据Do[1]描述并稍作修改，具体来说，先向4mL离心管中加入1mL的不同萃取液（1mg/mL），再向每管中加入0.3mL的5%的亚硝酸钠溶液，混合液在避光下静止反应5min后，加入0.3mL的10%的硝酸铝和4%的氢氧化钠溶液2mL，待反应15min结束后，每管中取200L溶液加入到96孔板中，采用酶标仪在510nm下测其吸光度。标准品采用芦丁，根据其标准曲线计算茵陈、车前草、荷叶不同萃取相的总黄酮含量，以mg RU/g 干重样品为单位。标准曲线为y=0.002x-0.011，y代表样品的吸光度，x为样品浓度，在浓度范围0到500 g/mL线性良好，R2=0.999 88。

1.3.3 茶包多酚含量的测定

多酚含量的测定采用福林酚试剂法根据Rekha[2]描述并稍作修改，具体来说，先向离心管中加入200L的茵陈、车前草、荷叶不同萃取液（1mg/mL），再向每管中加入1mL的蒸馏水和0.2mL的福林酚试剂，混合液在避光下静止反应3min后，加入600mL的7.5%的碳酸钠溶液反应，待反应结束后，每管中取200L溶液加入到96孔板中，采用酶标仪在765nm下测其吸光度。标准品采用没食子酸，根据其标准曲线计算茵陈、车前草、荷叶不同萃取相的总酚含量，以mg GAE/g干重样品为单位。标准曲线为y=0.005x-0.030，y代表样品的吸光度，x为样品浓度，在浓度范围0到400g/mL线性良好，R2=0.999 8。

1.3.4 茶包清除DPPH自由基能力

按照Rekha[2]方法，取茵陈、车前草、荷叶不同萃取液100L加到96孔透明板中，分别加入100L 0.2mM的DPPH溶液。依照相同的操作方法，将不同浓度的样品液分别与甲醇混匀作为空白组，采用酶标仪在波长517nm处测其吸光值，重复3次实验，每次3组平行，取平均值。

DPPH清 除 率（%）=[1-（Asample-Ablank）/Acontrol]*100%

式中，Asample-DPPH溶液与样品液的吸光度之和；Ablank-样品与提取溶剂的吸光度之和；Acontrol-DPPH溶液与提取溶剂的吸光度之和。

1.3.5 茶包还原能力测定

还原能力的测定采用Do[1]方法并稍作修改，在浓度为20～320g/mL，测定茵陈、车前草、荷叶不同萃取液的还原能力值，吸光度越大，说明还原能力越强。

2 结果与讨论

2.1 茶包各萃取相总酚与总黄酮含量

植物体内多酚和黄酮作为植物最主要的次级代谢产物，具有多种生理活性，茵陈、车前草、荷叶不同极性部位多酚和总黄酮含量见表1。由表可知，不同极性部位中总黄酮含量差异较大。对于总黄酮而言，含量从高到低依次为乙酸乙酯萃取相（EF）＞正丁醇萃取相（NBF）＞粗提物（CE）＞二氯甲烷萃取相（CH）＞水萃取相（HF）＞正己烷萃取相（NHF）。多酚含量的结果呈现出于总黄酮含量结果基本一致的趋势，乙酸乙酯萃取相中含有较高的总酚含量，最少含量出现在正己烷和二氯甲烷萃取相中，这种原因的出现可能是由于黄酮本身就是一种酚类物质，而且黄酮和多酚在某些结构划分上并不明显。正己烷和二氯甲烷萃取相中含有少量的多酚类物质，一方面这可能由于萃取过程中萃取并不完全造成的，另一方面可能是由于存在极性相对较弱的多酚类物质的缘故。

茵陈、车前草、荷叶中含有丰富的黄酮类物质，本文研究了茵陈、车前草、荷叶中总黄酮的含量，由茵陈、车前草、荷叶粗提物得率为24.95%可知，茵陈、车前草、荷叶样品中总黄酮的含量得率为2.50%。

表1 茵陈、车前草、荷叶不同极性相态总黄酮、多酚含量

2.2 茶包清除DPPH自由基能力

清除DPPH自由基是一种用途最为广泛的抗氧化模型，由于其快捷、高效、稳定的特点常被用来检测各种样品的清除自由基的能力。由表2可知，以BHT、Vc为阳性对照，茵陈、车前草、荷叶不同萃取相对DPPH的清除能力以IC50表示，结果显示，正己烷和二氯甲烷萃取相表现出较弱的清除DPPH自由基的能力，其IC50值都大于300g/mL，水相和粗提物表现出相对较强的清除DPPH自由基的能力，其IC50值分别为295.61和254.23g/mL，而乙酸乙酯萃取相对DPPH清除的能力与BHT基本一致，小于Vc的清除能力IC50其IC50为（51.86±6.32）g/mL，正丁醇萃取相也表现出一定的抗氧化能力，其IC50为（76.45±3.24）g/mL。各萃取部位表现出清除DPPH自由基的能力不同，这可能与其含有的化学成分不同所致，结果表明茵陈、车前草、荷叶清除DPPH自由基的活性段主要是乙酸乙酯段和正丁醇萃取相。

表2 茵陈、车前草、荷叶不同极性部位对DPPH自由基清除能力

2.3 茶包还原能力

Fe3+还原能力是酚类物质抗氧作用的重要机制，其表现形式通过电子转移，化合物还原能力主要是通过氢质子的传递破坏自由基链来发挥其抗氧化作用的，茵陈、车前草、荷叶主要的抗氧化活性段，这可能与其部位中含有的总黄酮、总酚类物质有关。

3 茶包的药理作用

3.1 茵陈功效[3]

清热利湿；退黄。主治：黄疸；小便不利；湿疮瘙痒等。茵陈具有保护肝细胞膜完整性及良好的通透性、防止肝细胞坏死，促进肝细胞再生及改善肝脏微循环，抑制葡萄糖醛酸酶活性，增强肝脏解毒等功能[4]、降血脂、抗凝血和抗病毒等药理作用，当然，这只是西医学提取茵陈成分做出来的研究，茵陈有显著的保肝作用，对甲，乙型肝炎，黄疸型肝炎，有显著的疗效。有利胆，促进胆汁分泌，增加胆汁中胆酸和胆红素排出的作用。能增加心脏冠脉血流量，改善微循环，并有降血压，降血脂，抗凝血，利尿解热平喘，驱除蛔虫及抑制多种致病性皮肤真菌与细菌的作用。茵陈分布广泛，由于其药效明确，无毒及不良反应，在我国用药历史悠久。文献调研显示，该药材富含香豆素、黄酮、酚酸类、色原酮等成分。药理活性包括保肝利胆、抗炎镇痛、抗菌、细胞保护、抗肿瘤疾病等多个方面，其中在保肝利胆方面研究的较多，为治疗肝胆疾病及其并发症提供了参考。

3.2 车前草的功效[5]

车前草，甘，寒，归手日头，阳明经，利水，清热，明目，祛痰，用于小便不通，淋浊，带下，尿血，黄疸，浮肿，热痢泄泻，鼻衄，目赤肿痛，喉痛，咳嗽，皮肤溃疡。对车前草化学分析，车前草嫩叶含水分、碳水化合物、卵白质、脂肪、钙、磷、铁、胡萝卜素、维生素C，还含有胆碱、钾盐、宁檬酸、草酸、桃叶珊瑚甙等营养身分。其性寒、味甘，具有帮助水通淋、清热明目、清肺化痰的功效。主治小便倒霉，盛夏气温高的气候泄泻，目赤肿痛等症。车前草即可食用又有药用价值。其性味甘寒，无毒，具有清热住进排尿，祛痰止咳，清肝明目，除湿痹功效。《本草纲目》认为：久服轻身耐老。因为车前具有大好的疗治效用

3.3 荷叶的功效[6]

荷叶，是一味中药，含有多种同类生物碱，如莲碱、原荷叶碱和荷叶碱等，另外，还含有维生素C、柠檬酸、苹果酸、葡萄糖酸、草酸、琥珀酸及其它抗有丝分裂作用的碱性成分。《本草纲目》中记载，“荷叶：苦、平、无毒”。鲜叶具有解暑、清热、利湿等作用。经过炮制后的荷叶具有降血脂、升阳发散、主脾开胃等作用。《本草纲目》中对荷叶功效的描述为：“止渴，落胞破血，治产后口干，心肺躁烦（大明）。治血胀腹痛，产后胎衣不下，酒煮服之。荷鼻∶安胎，去恶血，留好血，止血痢，杀菌蕈毒，并煮水服（藏器）。生发元气，裨助脾胃，涩精滑，散瘀血，消水肿痈肿，发痘疮，治吐血咯血衄血，下血溺血血淋，崩中产后恶血，损伤败血（时珍）。”

4 结论

本文对茵陈、车前草、荷叶进行初步分离得到不同萃取相，进而对不同萃取相进行初步的成分测定及抗氧化活性评价，筛选出活性强的萃取相，发现茵陈、车前草、荷叶中主要的有效活性物质总黄酮与总酚多富集在乙酸乙酯和正丁醇萃取相；茵陈、车前草、荷叶不同部位具有良好的抗氧化活性，其中乙酸乙酯和正丁醇萃取相具有最强的清除DPPH自由基的能力和还原能力，这与其含有的丰富的黄酮、多酚类物质有关。对于各部位的抗氧化活性有了比较清晰的了解，便于解析茵陈、车前草、荷叶的药理作用；通过实验：茵陈、车前草、荷叶还可以提取出其他成分，如多糖类，可溶性膳食纤维，无机盐等。

本文以茵陈3g、车前草3g、荷叶3g，碱0.3g制作而成的茶包对降总胆红素、降甘油三脂、降尿酸和护肝保健作用。

[1] Do Q D，Angkawijaya A E，Tran-Nguyen P L，et al. Effect of extraction solvent on total phenol content，total flavonoid content，and antioxidant activity of Limnophila aromatica[J].Journal of Food & Drug Analysis，2014，22（3）：296-302.

[2] Rekha C，Poornima G，Manasa M，et al.Ascorbic acid，total phenol content and antioxidant activity of fresh juices of four ripe and unripe citrus fruits[J].Chemical Science Transactions，2012，1（2）.

[3] 曹锦花.茵陈的化学成分和药理作用研究进展[J]沈阳药科大学学报，2013，30（6）：489-493.

[4] 唐凯.经方合用治慢性乙型肝炎高胆红素血 40 例[J].国医论坛，2002，17（1）：6-8.

[5] 夏玲红，金冠钦，孙黎，等.前草的化学成分与药理作用研究进展[J]中国药师，2013，16（2）：294-295.

[6] 陈海光，余以刚，曾庆孝.荷叶保健茶的研制及其功效研究[J]食品工业科技，2002，23（1）：53-54.

Lowering the Total Bilirubin，Lowering the Triglycerides，Lowering Uric Acid and Liver Health Care Tea Bag Development

Xu Guo-liang，Yuan Ju-ru，Tu Zhao-xiu，Li Xiong-hui，Hu Ju-wu

The preparation of health tea with cinnamon，plantain，lotus leaf and alkali was studied.The formula for selecting healthy tea was 3g，3g of plantain，3g of lotus leaf and 0.3g of alkali，Oxidation and pharmacological effects，a comprehensive evaluation，tea bags do have reduced total bilirubin，lowering triglycerides，lowering uric acid and liver protection role.

capillaris；plantain；lotus leaf；alkali；tea bag；oxidizing；pharmacological action

R285.1

B

1003–6490（2017）10–0003–03

2017–07–19

国家自然科学基金项目（31260400）。

徐国良（1964—），男，江西南昌人，副研究员，主要研究方向为天然产物化学。