阿萨希毛孢子菌泌尿系感染的流行病学及药物敏感性分析

黄俊云，陆文仙，廖一群，凌宝殿，卢洪飞

(赣南医学院第一附属医院检验科，江西赣州 341000)

·调查研究·

阿萨希毛孢子菌泌尿系感染的流行病学及药物敏感性分析

黄俊云，陆文仙，廖一群，凌宝殿，卢洪飞

(赣南医学院第一附属医院检验科，江西赣州 341000)

目的分析阿萨希毛孢子菌泌尿系感染的流行病学、感染状况、危险因素以及微生物学的特征，指导临床选择及时、有效的抗真菌治疗。方法收集分离自2013至2016年泌尿系感染患者的18株阿萨希毛孢子菌，对该病原菌的分离鉴定、药敏试验以及病历资料进行流行病学回顾性调查。结果18株阿萨希毛孢子菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑的耐药率分别为0、5.6%、0、0、0，但是伊曲康唑的敏感率仅为50.0%。阿萨希毛孢子菌泌尿系统感染的风险因素以男性、患有基础疾病(占100%)、长期使用广谱抗菌药物(占100%)、留导尿管(占83.3%)、皮质激素的应用(占50.0%)、免疫抑制剂应用(占38.9%)为主，粒细胞减少的比例较少(占5.6%)。临床16例选用氟康唑治疗好转，另2例用伊曲康唑、伏立康唑治疗后死亡，其主要死亡原因与真菌治疗无关。结论阿萨希毛孢子菌可引起泌尿系统感染，高危因素主要有基础疾病、广谱抗菌药物的长期使用和留置导尿管等，治疗首选氟康唑。及早明确病原学诊断、正确选用抗真菌药物是成功治疗阿萨希毛孢子菌感染的关键。

阿萨希毛孢子菌；泌尿系感染；流行病学；分离鉴定；药物敏感性分析

阿萨希毛孢子菌(Trichosporonasahii) 属于半知菌亚门、芽生菌纲、隐球酵母目、隐球酵母科、毛孢子菌属，广泛存在于自然界及人体的部分器官中，有12.4%人群的生殖器皮肤表面有该菌存在[1]。目前认为是一种条件致病真菌，也是毛孢子菌病最多见的致病菌，不仅可引起免疫缺陷患者危及生命的各种机会性感染，而且在免疫正常人群中也有感染该菌的报道[2]；其感染部位及临床类型多见于肺感染、全身播散性感染、皮肤损害和毛发感染等[3]，泌尿系感染仅见于个案报道[4-5]。本研究对2013至2016年赣南医学院第一附属医院泌尿系阿萨希毛孢子菌病患者进行回顾性分析，报告如下。

1 材料与方法

1.1标本来源 收集2013年1月至2016年12月赣南医学院第一附属医院住院患者中段尿标本分离的18例阿萨希毛孢子菌。入选标准：均有泌尿系感染症状和体征(尿频、尿急、尿痛或血尿)；实验室检查指标符合2014版《中国泌尿外科疾病诊断治疗指南》中尿路感染的诊断标准；在同一患者连续多份尿标本中分离出纯阿萨希毛孢子菌并且菌落计数均≥105CFU/mL；可确诊该菌为泌尿系感染的病原菌。对同一患者多份标本不重复计数。

1.2培养基、仪器和试剂 哥伦比亚血琼脂培养基、沙氏琼脂平板(SDA)、中国蓝琼脂平板(广州迪景公司)；乳酸酚棉蓝染色液(珠海贝索公司)；莱芙特敏真菌荧光染色液(江苏莱芙时代公司)；ECLIPSE 80i共聚焦荧光显微镜(Nikon公司)；Vitek 2 Compact全自动细菌鉴定药敏仪、Vitek 2 YST酵母菌鉴定卡、麦氏比浊仪、ATB FUNGUS 3真菌药敏试剂条(法国生物梅里埃公司)。

1.3分离培养与鉴定 吸取10 μL中段尿接种于哥伦比亚血琼脂平板、中国蓝琼脂平板、沙氏琼脂平板，于35 ℃培养过夜，选择菌落计数≥105CFU/mL的阳性菌落使用Vitek 2 YST酵母菌鉴定卡经Vitek 2 Compact全自动细菌鉴定药敏仪进行菌株鉴定。

1.4药物敏感性试验 用ATB FUNGUS 3真菌药敏试剂条测定最低抑菌浓度(MIC)值(μg/mL)，包括5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑。质控菌株为克柔假丝酵母菌ATCC 6258。根据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)颁布的M27-A准则进行质控和结果判断。因阿萨希毛孢子菌菌落较干燥而且生长较慢，于48 h判读5-氟胞嘧啶和两性霉素B结果；而对于氟康唑、伏立康唑和伊曲康唑，分别于24 h和48 h判读，判读结果无明显差异。

2 结果

2.1患者的一般临床资料 18例阿萨希毛孢子菌泌尿系感染患者中，男性14例，女性4例；年龄(68.8±12.8)岁；均患有基础疾病；18例患者使用广谱抗菌药物(使用皮质激素9例，免疫抑制剂7例)；15例使用留置尿管；18例应用抗真菌药治疗(使用氟康唑16例、伊曲康唑1例、伏立康唑1例)；16例用氟康唑治疗4周以后，中段尿真菌培养阴性，病情好转出院；另2例死亡,主要死亡原因与抗真菌治疗效果无关。

2.2形态学观察 阿萨希毛孢子菌在哥伦比亚血琼脂平板、沙氏琼脂平板、中国蓝琼脂平板35 ℃培养24 h生长速度中等，为奶油色酵母样、柔软、潮湿，呈突起、针尖样的菌落。各种培养基上的菌落生长特征见图1，染色和镜下形态特征见图2、3、4。

注：A,沙氏平板35 ℃ 48 h;B,哥伦比亚平板35 ℃ 48 h；C，哥伦比亚平板35 ℃ 5 d；D，中国蓝平板35 ℃ 5 d。

图1 阿萨希毛孢子菌菌落形态

注：A，乳酸酚棉蓝染色(×400)；B，革兰染色(×1 000)。均可见关节孢子，数目不等、长短不一，末端圆形呈筒状；大量多形性酵母样细胞；少量分枝分隔真菌丝，无明显的叉状分枝，粗细不等。

图2 阿萨希毛孢子菌镜下形态

注：可见棒状或桶状关节孢子，呈卵形的游离芽生孢子以及分隔菌丝。

图3 阿萨希毛孢子菌镜下形态(荧光染色，×1 000)

注：可见排列整齐的大量芽生孢子、关节孢子和分隔菌丝。

图4 阿萨希毛孢子菌小培养镜下形态(×400)

2.3药物敏感试验结果 18株阿萨希毛孢子菌药敏结果显示对5种抗真菌药物抗菌活性较好，见表1。5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑的耐药率分别为0%、5.6%、0%、0%、0%，敏感率分别为94.4%、94.4%、94.4%、50.0%、100%，其中伊曲康唑的中介率高达50.0%。

表1 18株阿萨希毛孢子菌的耐药特征[n(%)]

3 讨论

近年来，我们在实际工作中发现在中段尿中检出阿萨希毛孢子菌的病例数有所增多，通过对18份泌尿系感染病例资料的回顾性分析发现，侵犯泌尿系统的阿萨希毛孢子菌感染患者以男性为主，均患有基础疾病。进一步调查分析发现，阿萨希毛孢子菌感染泌尿系统的危险因素主要有长期使用广谱抗菌药物、留导尿管、皮质激素与免疫抑制剂的应用，而感染较少发生于粒细胞减少患者。临床应避免或重视以上因素，以防阿萨希毛孢子菌感染。

文献报道浅表性或播散性阿萨希毛孢子菌对多种抗真菌药均不敏感，仅唑类药物对其显示出良好的抗菌活性。而近年来阿萨希毛孢子菌对唑类，特别是氟康唑的耐药现象日益突出[3]。杨杰等[5]报道1例肺部及泌尿道感染患者痰液及尿液标本分离的阿萨希毛孢子菌均对氟康唑、伏立康唑中介，伊曲康唑、两性霉素B、5-氟胞嘧啶均耐药。我们对泌尿系感染阿萨希毛孢子菌的药敏结果分析发现，其对5种抗真菌药物的抗菌活性除伊曲康唑外均较好。综合分析药敏试验和临床治疗转归，本研究认为阿萨希毛孢子菌引起的泌尿系统感染推荐首选药物为氟康唑。

[1]Chagas-Neto TC，Chaves GM，Colombo AL．Update on the genusTrichosporon[J]．Mycopathologia，2008，166(3)：121-132．

[2]Kim SH，Kim DH，Joo SI，etal．Chronic cutaneous disseminatedTnchospomnasahiiinfection in a nonimmunocompromised patient[J]．J Am Acad Dermatol，2008，59(2 Suppl 1)：S37-S39．

[3]Miceli MH，Diaz JA，Lee SA．Emerging opportunistic yeast infections[J]．Lancet Infect Dis，2011，11(2)：142-151．

[4]翁绳凤, 刘宏蕴. 阿萨希毛孢子菌致泌尿系统感染2例[J]. 临床检验杂志, 2010, 28(5): 344.

[5]杨杰, 崔敏. 阿萨希毛孢子菌致肺部及泌尿道感染1例[J]. 临床检验杂志, 2012, 30(1): 75.

2017-08-14)

(本文编辑：刘群)

EpidemiologyandantifungalsusceptibilityanalysisofTrichosporonasahiiinurinarytractinfection

HUANGJun-yun,LUWen-xian,LIAOYi-qun,LINGBao-dian,LUHong-fei

(DepartmentofClinicalLaboratory,FirstAffiliatedHospitalofGannanMedicalUniversity,Ganzhou341000,Jiangxi,China)

ObjectiveTo analyze the epidemiology, infection status, risk factors and microbiological characteristics ofTrichosporonasahiiin urinary tract infection for guidance of selecting the prompt and effective antifungal drugs in clinical therapy.MethodsA total of 18 strains ofTrichosporonasahiiisolated from the patients with urinary tract infection were selected from 2013 to 2016. The isolation and identification of pathogenic bacteria, results of antimicrobial susceptibility test and clinical data were investigated by retrospective epidemiological survey.ResultsThe 5 antifungal drugs, i.e., 5-fluorocytosine, amphotericin B, fluconazole, itraconazole and voriconazole, exhibited favorable antibacterial activity for the 18 strains ofTrichosporonasahiiwith resistance rate of 0, 5.6%, 0, 0 and 0 except itraconazole which showed only 50% of sensitive rate. The risk factors ofTrichosporonasahiiinfection in urinary system mainly included such as male, basic diseases (100%), long-term use of broad-spectrum antimicrobial agents (100%), indwelling catheter (83.3%) , application of corticosteroids (50.0%) and immunosuppressive agents (38.9%) as well as a small proportion of granulocytopenia (5.6%). The 16 cases treated with fluconazole were improved, while the other 2 cases died following the treatment with itraconazole or voriconazole for reasons irrelevant to antifungal treatment.ConclusionTrichosporonasahiicould cause urinary tract infections with high risk factors including basic diseases, long-term use of broad-spectrum antimicrobial agents, indwelling catheter, etc. The drug of top choice should be fluconazole. The key elements for successful treatment ofTrichosporonasahiiinfection include early diagnosis of pathogens and correct selection of antifungal agents based on sensitivity and resistance tests of drugs.

Trichosporonasahii; urinary tract infection; epidemiology; isolation and identification; drug susceptibility analysis

10.13602/j.cnki.jcls.2017.10.12

黄俊云， 1976年生，女，副主任技师，硕士，从事临床微生物学检验研究工作。

R446.5

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