抑颤颗粒的含量测定

陆 珞 王 冰 陈 朵 何 蕊 方春雪 位 鸿 杨 戈

(吉林省食品药品审评中心，吉林 长春 130062)

抑颤颗粒的含量测定

陆 珞 王 冰1陈 朵2何 蕊3方春雪3位 鸿3杨 戈3

(吉林省食品药品审评中心，吉林 长春 130062)

目的建立“抑颤颗粒”中芍药苷的HPLC含量测定方法。方法采用Agilent TC-C18 色谱柱 (4.6 mm×250 mm，5 μm)；以乙腈-0.1%磷酸水(14:86)为流动相；柱温：25℃，流速1 ml/min，检测波长为230 nm。结果芍药苷进样量在0.119 6～1.495 0 μg范围内线性关系良好，r=0.999 9，平均加样回收率为97.22%(n=6)，RSD为1.97%。结论所建立的方法专属性良好，结果准确可靠，重复性好，可用于抑颤颗粒的质量控制。

抑颤颗粒；高效液相色谱法；芍药苷；含量测定

1 仪器与试药

1.1仪器 AUW220D型电子天平(岛津国际贸易有限公司)；岛津LC-2010A型高效液相色谱仪(岛津国际贸易有限公司)；Water Purifier 实验室专用超纯水机；；超声波清洗器(昆山禾剑)。

1.2试药 抑颤颗粒(自制，批号：20160101、20160102、20160103)，芍药苷对照品(批号：110736-201539，供含量测定用，规格：20 mg，购于中国食品药品检定研究院)。乙腈使用色谱纯，其他试剂均使用分析纯，水为超纯水。

2 方法与结果

芍药苷的含量测定:参考药典方法〔6〕，对样品中的芍药苷含量进行检测，同时进行含量测定方法学验证。

2.1色谱条件 色谱柱：Agilent TC-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：乙腈-0.1%磷酸水(14∶86)；检测波长：230 nm；流速：1 ml/min；理论板数按芍药苷峰计算应不低于3 000。

2.2对照品溶液的制备 精密称取芍药苷对照品5.98 mg，置100 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；即得。

2.3供试品溶液的制备 取本品约2 g，研成细粉，精密称定，置50 ml量瓶中，加稀乙醇40 ml，超声处理(功率250 W，频率40 kHz)30 min，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4阴性对照溶液的制备 另称取除去白芍的阴性样品，按照供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。

2.5测定法 分别精密吸取上述溶液各10 μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

2.6专属性考察 分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液和阴性对照溶液各10 μl，依法测定，见图1～图3。

图1 芍药苷对照品高效液相色谱图

图2 抑颤颗粒供试品高效液相色谱图

在此条件下，芍药苷峰与其他峰分离较好，分离度gt;1.5；理论板数按芍药苷峰计算gt;3 000；且白芍阴性无干扰。

2.7线性关系的考察 分别精密吸取芍药苷(59.8 μg/ml)对照品溶液2.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0 μl，依法测定。以进样量(μg)作为横坐标，峰面积积分值作为纵坐标，绘制标准曲线，见图4。回归方程为：y=1 780 613.523 4x-15 699.671 6，r=0.999 9，表明芍药苷在0.119 6～1.495 0 μg范围内线性良好。

图3 白芍阴性对照色谱图

图4 芍药苷标准曲线

2.8精密度考察 精密吸取对照品溶液10 μl注入液相色谱仪，连续进针6次，记录峰面积积分值，计算，RSD为0.37%，精密度良好。

2.9稳定性实验 精密吸取对照品溶液和同一批供试品溶液各10 μl，分别在0 h，2 h，4 h，6 h，8 h，12 h，24 h进样，依法测定，计算，RSD为1.51%和1.05%，稳定性良好，即24 h内测定结果可靠。

2.10重复性实验 取同一批样品，按供试品溶液项下方法制备6份，依法测定，计算，芍药苷平均含量为3.535 0 mg，RSD为1.54%，重现性良好。

2.11加样回收率实验 取已知含量同一批样品6份，取约1 g，精密称定，分别置50 ml量瓶中，精密加入3.314 mg/ml芍药苷对照品溶液(稀乙醇溶解)1 ml，加稀乙醇40 ml，超声处理(功率250 W，频率40 kHz)30 min，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液，依法测定，计算回收率，见表1。由回收率实验数据可得，平均回收率是97.22%，RSD是1.97%，说明试验方法的准确性良好，方法可行。

表1 回收率试验结果(n=6)

2.12含量测定 取3批抑颤颗粒中试样品，平行两份，依法测定，记录峰面积，计算样品中芍药苷含量，结果见表2。由含量测定试验所得数据可知，三批抑颤颗粒中试样品中芍药苷含量的平均值为3.462 5 mg/g。

表2 三批中试样品含量测定结果(mg/g)

2.13含量限度的确定 含量限度按测定结果平均值的80%计算，结果为2.77 mg/g，本品规格为每袋装10 g，故暂定本品每袋颗粒含白芍以芍药苷(C23H28O11)计，不得少于27.00 mg。

3 讨 论

本实验采用高效液相色谱法对抑颤颗粒中芍药苷的含量进行测定，方法学考察结果表明：该法的专属性、线性、精密度、重现性、稳定性和回收率等技术指标均符合规定，暂定本品每袋颗粒含白芍以芍药苷(C23H28O11)计，不得少于27.00 mg。并且采用该法测定了三批中试样品的含量，结果符合规定，表明该法具有可行性、可控性，适用于本品的检测，为抑颤颗粒的质量控制提供了依据。

1中华医学会神经病学分会运动障碍及帕金森病学组.帕金森病的诊断〔J〕.中华神经科杂志,2006；39(6):408-9.

2熊 珮,陈 忻,张 楠.帕金森病病理机制及中药防治帕金森病实验研究进展.〔J〕.中国中药杂志,2012;37(5):686.

3朱 泉,周杰平.帕金森病中医治疗近况〔J〕.山东中医药大学学报,2000;24(2):156.

4文晓东,郑景辉,蒙 冰,等.中医药治疗帕金森病疗效系统评价〔J〕. 辽宁中医药大学学报,2014;16(7):120-4.

5顾 超,袁灿兴,叶 青.熟地平颤汤协同左旋多巴对帕金森病非运动症状的影响〔J〕.上海中医药杂志,2011;45(3)：29-31.

6国家药典委员会.中华人民共和国药典2015年版〔M〕.北京:中国医药科技出版社,2015：105.

〔2017-03-15修回〕

(编辑 袁左鸣)

R28

A

1005-9202(2017)22-5547-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.22.026

帕金森病(PD)是发生于中老年时期,以震颤、肌强直、运动减少、姿势异常为主要表现的一种中枢神经系统变态退行性疾病，属中医“颤证”范畴；西医治疗方法目前有药物治疗、手术、细胞移植、基因技术等。临床中最常用的方法为多巴制剂治疗〔1〕；近年来，随着传统中医学对PD认识的深化及临床经验的积累和实验研究的开展，中医中药参与治疗PD的文献报道日益增多〔2～5〕，在解除病痛、改善生活质量方面中医药有独特的疗效。抑颤颗粒是由临床经验方开发的院内制剂，由熟地黄、山茱萸、天麻、白芍等七味药材组成，具有滋补肝肾、平肝熄风的作用，主要用于治疗肝肾亏虚，肝风内动型PD，有很好的临床疗效。为控制该制剂的质量，本文采用高效液相色谱法对芍药苷的含量进行研究，并建立含量测定标准。

吉林省科技厅重点科技攻关项目(20150204054YY)

1 长春中医药大学中医内科2016级研究生

2 长春中医药大学中药学2014级研究生

3 长春中医药大学附属医院

杨 戈(1975-)，男，副主任医师，主要从事中医内科研究。

陆 珞(1984-)，女，主管中药师，主要从事中药药剂研究。