张徐,臧雪燕,顾建美,张鹏,梁炜,陈京燕,潘磊,钱晖,许文荣
(1.江苏大学医学院,江苏省检验医学重点实验室,江苏镇江 212013;2.南通市肿瘤医院,江苏南通 226000)
·肿瘤与微环境检测·
长链非编码RNAZFAS1在非小细胞肺癌患者组织中表达及作用*
张徐1,臧雪燕1,顾建美2,张鹏1,梁炜1,陈京燕1,潘磊1,钱晖1,许文荣1
(1.江苏大学医学院,江苏省检验医学重点实验室,江苏镇江 212013;2.南通市肿瘤医院,江苏南通 226000)
目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中锌指结构反义转录本1(zinc finger antisense 1,ZFAS1)表达水平,探讨ZFAS1在NSCLC进展中的生物学作用。方法实时荧光定量RT-PCR检测ZFAS1在NSCLC患者癌组织和癌旁组织中的表达水平。RNA干扰ZFAS1在A549细胞中表达,细胞计数和克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式分析检测细胞周期和细胞凋亡,Transwell迁移和基质胶侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量RT-PCR检测CyclinD1、Bcl2、N-cadherin、ZEB1、Slug和Twist基因表达水平变化。结果ZFAS1在NSCLC患者癌组织中的平均表达水平[0.01(0.002,0.054)]较癌旁组织[0.002 (0.001,0.012)]明显升高(Z=-2.638,P<0.01)。ZFAS1基因敲减后,A549细胞增殖能力明显减弱(P<0.01);A549细胞周期G1期比例升高,S期比例下降(P<0.01);A549细胞凋亡比例明显增加(P<0.01);A549细胞迁移和侵袭能力明显下降(P均<0.01);A549细胞中CyclinD1、Bcl2、N-cadherin、ZEB1、Slug和Twist基因表达水平均降低(P均<0.05)。结论ZFAS1在NSCLC患者癌组织中呈高表达。ZFAS1基因敲减诱导细胞周期阻滞、凋亡和抑制上皮-间质转变(EMT),减弱NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭能力。
锌指结构反义转录本1;长链非编码RNA;非小细胞肺癌;上皮-间质转变
长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)参与染色质重塑、基因转录、转录后调节、蛋白质翻译等生物学进程[1]。lncRNA表达异常与肿瘤发生、生长、转移及治疗耐药等密切相关,可作为肿瘤诊断、疗效监测及预后判断的分子标志物[2]。锌指结构反义转录本1(zinc finger antisense 1,ZFAS1)是一种新发现的lncRNA,在肝癌[3]、卵巢癌[4]、结肠癌[5]中表达上调。本研究旨在检测ZFAS1在非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中的表达水平,并探讨ZFAS1在NSCLC进展中的生物学作用。
1.1研究对象 收集2015年11月至2016年10月于南通市肿瘤医院就诊的NSCLC患者50例,男31例,女19例,年龄37~72岁,中位年龄53.6岁。……