水貂阿留申病毒、肠炎病毒与犬瘟热病毒多 重PCR检测方法的建立与应用

马 芹，王元智，闫文卓，赵丽丽，陈洪岩，陆涛峰

(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室，哈尔滨 100193)

水貂阿留申病毒、肠炎病毒与犬瘟热病毒多 重PCR检测方法的建立与应用

马 芹，王元智，闫文卓，赵丽丽，陈洪岩，陆涛峰*

(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室，哈尔滨 100193)

研究报告

目的水貂阿留申病、病毒性肠炎与犬瘟热并称影响水貂健康的三大疫病，拟建立一种可同时检测三种病毒的多重PCR检测方法。方法针对三种病毒基因保守区分别设计了3对特异性引物，对貂阿留申病毒(ADV)和水貂肠炎病毒(MEV)的DNA模板和犬瘟热病毒(CDV)的RNA模板进行了多重PCR扩增和扩增条件优化。结果PCR可同时扩增出601 bp(ADV)、205 bp(MEV)和451 bp(CDV)的特异性目的条带，敏感性试验表明最低核酸检出量为ADV 每微升2.67×104拷贝、MEV 每微升3.02×104拷贝和CDV每微升1.72×105拷贝。临床样品检测结果表明多重PCR和单一PCR检测结果一致。结论建立的多重PCR检测方法可快速地检测ADV、MEV和CDV单一或混合感染的临床样品。

多重PCR；水貂阿留申病毒；水貂肠炎病毒；犬瘟热病毒

貂作为重要的经济动物，不仅仅具有经济价值[1]，同时貂还是流感病毒、SARS、新城疫病毒、貂圆环病毒、阿留申病毒以及肠炎病毒的宿主，其中雪貂对流感病毒十分易感，感染后表现出与人相似的症状，还能产生免疫反应，因此雪貂可作为研究流感病毒最佳的实验动物模型。貂的实验动物化养殖必须保证背景清晰，并对其携带的病原体进行控制，所以需要建立一系列针对貂携带的病原体的检测方法。……