血清游离轻链检测在肾脏相关疾病中的诊断意义和应用价值

余悠悠，潘秀军

(上海交通大学医学院附属新华医院 检验科,上海200092)

血清游离轻链检测在肾脏相关疾病中的诊断意义和应用价值

余悠悠，潘秀军*

(上海交通大学医学院附属新华医院 检验科,上海200092)

目的定量检测血清游离轻链(serum free light chain,sFLC κ、λ )在慢性肾脏疾病(CKD)中的水平，分析在不同情况下肾损伤时血清游离轻链的变化，探讨其在肾脏疾病中的临床意义和应用价值。方法将慢性肾脏疾病患者分为3组，62例非骨髓瘤性慢性肾脏疾病患者，22例骨髓瘤性肾病κ型患者，12例骨髓瘤性肾病λ型患者，另选取40例健康体检人群作为对照，采用散射比浊法定量检测血清游离轻链 (κ、λ)的含量并计算κ/λ，并对结果进行分析。结果62例非骨髓瘤性慢性肾脏疾病患者sFLCκ和λ，κ/λ比值均升高,与健康对照组比较有显著性差异(P<0.05)；22例骨髓瘤性肾病κ型患者sFLCκ和λ，κ/λ比值与对照组比较，均有显著性差异(P<0.05)；12例骨髓瘤性肾病λ型患者的sFLCκ 的结果与对照组比较无显著性差异(P>0.05)，sFLC λ结果与对照组比较有显著性差异(P<0.05)，κ/λ比值下降，与对照组比较亦有显著性差异(P<0.05)。另外，随着CKD分期的进展，血清游离轻链 κ、λ进行性地升高，尤其是在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期的慢性肾脏疾病中，肾脏功能的损伤对血清游离轻链λ比对血清游离轻链κ 的影响更显著。结论血清多克隆游离轻链(sFLC κ、λ)水平检测，尤其κ/λ比值可反映肾损伤程度，当用于多发性骨髓瘤疾病的辅助诊断时，可作为肾损伤情况的评估，提高临床诊断治疗的准确性。在CKD患者肾损伤程度评估中亦具有重要的临床意义。

慢性肾脏疾病；骨髓瘤性肾病；血清游离轻链；散射免疫比浊

(ChinJLabDiagn,2017,21:2087)

健康人的免疫球蛋白(immunoglubin，Ig)由两条重链和两条轻链经二硫键联结而成的完整分子，其中轻链有两型，即 Kappa(κ)和Lambda(λ)，在一个Ig分子中两条轻链的比值接近2∶1[1]。轻链(light chain,LC)由B淋巴细胞产生，健康人每天产生LC约为0.5-1 g，多于重链(heavy chain,HC)[2]，部分轻链与重链以1∶1的比例结合形成完整的免疫球蛋白，还有部分未与重链结合而游离地存在于血清中,称为血清游离轻链(serum free light chain,sFLC)。对于正常成人而言，血清FLC主要通过肾脏清除和代谢，清除速率和分子大小有关。肾小球相对分子质量在40-60×103的小分子物质可以自由滤过，L链的相对分子质量约22．5×103，因此可以自由通过肾小球，然后在近曲小管被重吸收和代谢。血清中L链的量最终取决于B细胞的合成分泌与肾脏清除的动态平衡结果[3]。非骨髓瘤性慢性肾脏疾病和骨髓瘤性肾病患者都由不同病因造成肾脏损伤，本试验的主要目的是评价不同病因造成肾损伤时血清sFLC(κ、λ)结果变化及比值(κ/λ)的水平。以探讨其在肾脏疾病中的临床意义和应用价值，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1研究对象收集2015年11月至2016年6月上海交通大学附属新华医院34例多发性骨髓瘤患者，系临床骨髓活检、免疫电泳等确诊患者，其中22例骨髓瘤性肾病κ型患者，12例骨髓瘤性肾病λ型患者。22例骨髓瘤性肾病κ型患者，男性13例，女性9例，平均年龄分别为63.9岁和57.8岁。12例骨髓瘤性肾病λ型患者，男性5例，女性7例，平均年龄分别为62.6岁和58.4岁。62例非骨髓瘤性肾脏疾病患者，男性34例，女性28例，且根据GFR的水平分为5期[4],各期病例数分别为8、8、16、15和15，平均年龄分别为34.8、55.4、62.4、64.1和69.1。健康体检人群40例，其中男女性各20例，平均年龄分别为47.90岁和48.75岁。

1.2方法采用免疫散射比浊法。美国Beckman公司IMMAGE 800全自动免疫散射浊度仪(Beckman Coulter)，英国The Binding Site公司(FreeliteTM)提供sFLCκ、λ检测试剂。

1.3统计学分析

采用SPSS19.0软件进行统计学分析。用直线回归计算相关性，统计描述采用中位数(四分位数)。两样本比较采用Mann-Whitney检验，多个样本之间的比较采用Kruskal Willis检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1血清游离轻链(FLC κ 、λ )在非骨髓瘤性肾脏疾病，及骨髓瘤性肾病中的结果分析，采用中位数表示，见表1。

表1 各组血清游离轻链(sFLC κ 、λ )结果及比值(κ/λ)(M)

注：与健康对照组比较：*P<0.05

2.2健康对照组与CKD各期sFLC(κ 、λ )结果及比值比较，见图1。

3 讨论

CKD患者肾功能受损后，肾小球滤过率(GFR)下降，sFLC在肾脏中的代谢受到影响。随着肾脏受损程度逐渐加重，肾脏清除功能进行性下降，本文结果显示非骨髓瘤性慢性肾脏疾病患者血清游离轻链(sFLC κ、λ)结果及比值(κ/λ)均升高，与正常对照组有显著差异(P<0.05)。Desjardins L[5]等人也得出相同的结论。并且分子量大小不同的物质肾脏对其的清除能力不相同[6]。因此当肾脏受损后，由于FLC κ以单体形式存在，分子较FLC λ小，在 它在肾脏中更易滤过，在CKD早期它所受的影响较小(见图2：在CKDⅠ期到Ⅲ期的进展过程中，s FLC κ游离轻链的上升速度比sFLCλ的速度慢)。但FLC λ与肾脏功能变化比FLC κ关系更密切，更能准确反映肾脏功能变化，有研究显示血清游离轻链logκ和logλ与末期肾功能衰竭死亡因素密切相关，但是当eGRF调节后，logκ显著性的减少，不具有统计学意义，但是logλ血清游离轻链仍然具有统计学意义[7]。这个结果与本实验所获得的数据结果一致。当肾功能受损严重，网状内皮系统成为血清游离轻链κ、λ的主要清除部位。网状内皮系统对血清游离轻链的清除不受分子大小的影响，κ、λ型血清游离轻链的清除速度相近[8]。在病情进展中，sFLC κ/λ比值应呈现逐渐升高的表现。因此，CKD患者除了完善血清免疫固定电泳，sFLC检测也是十分必要的，可以更早、更准确地评估肾功能的损伤程度[1]。

注： sFLCκ在健康人群及CKD各期中的水平(A)； sFLCλ在健康人群及CKD各期中的水平(B)； sFLCκ/λ在健康人群和及CKD各期中的水平(C)。

图1健康对照组与CKD各期sFLC结果比较

本文结果还显示22例骨髓瘤性肾病κ型患者sFLCκ显著升高，λ值下降，κ/λ比值15.1,显著升高，与对照组比较，均有显著性差异；12例骨髓瘤性肾病λ型患者的sFLCκ 的结果与对照组比较无显著性差异，而sFLC λ结果显著升高，与对照组比较有显著性差异，κ /λ比值0.20，与对照组比较亦有显著性差异。与陈海飞等研究结果一致[3]。多发性骨髓瘤(MM)致肾损害常表现继发性肾病综合征，称为骨髓瘤性肾病，其特点是患者血清和尿中常能检测到单一增殖的轻链Kappa(M)或Lambda(k)[9]。对于正常肾功能的浆细胞病(plasma celldyscrasia，PCD)患者只有L链量超出近曲小管的最大重吸收能力(10-309/d)才有可能形成溢出性蛋白尿，从而在终尿中检测到。如L链的量继续分泌增加远大于肾脏的重吸收能力进入远曲小管并且可能形成管型堵塞肾小管，导致肾小球坏死肾功能下降，这样，血清中的L链进一步升高，而尿中L链减少，残存的肾单位势必滤过更多的L链，如此恶性循环，最终肾功能进一步恶化。如上所述，血清L链水平上升提示病情进展，尿中L链的下降无法区分是治疗有效还是疾病进展恶化。因此，血清FLC的水平和病情相关，尿L链水平则和病情不完全平行[3]。所以血清游离轻链分析提供了一个比尿蛋白电泳更准确的检测游离轻链的方法[10]。FLC测定的敏感度明显优于IFE和PE[11]。因此，在疑似为“非分泌型骨髓瘤” 时，免疫比浊法检测sFLC是一种高度敏感的检测方法,有助于NSMM患者轻链克隆性的判断[12]。避免漏诊和误诊。在临床上90%的AL型淀粉样变性患者存在血游离轻链水平升高和比值异常(<0．26或>1．65)，其中80%为λ轻链的异常。κ 轻链异常虽较少见，但患者临床表现常较重，多伴肾功能不全。有观察表明，患者游离轻链的水平与疾病的临床表现和预后相关[13]。

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Diagnosticsignificanceandapplicationvalueofserumfreelightchaindetectioninkidneyrelateddiseases

YUYou-you,PANXiu-jun.

(Departmentoflaboratory,XinhuaHospitalAffiliatedtoShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai200092,China)

ObjectiveQuantitative detection of serum free light chain (serum free light chain sFLC,kappa and lambda) in chronic kidney disease (CKD) in the level of analysis in renal injury changes of serum free light chain in different conditions,explore the kidney disease with clinical significance and application value.MethodsKidney disease patients were divided into 3 groups,62 cases of non tumor bone marrow of patients with chronic kidney disease,22 cases of myeloma nephropathy in patients with type κ,12 cases of myeloma nephropathy patients with type λ,the other 40 healthy cases were selected as control group,using nephelometry quantitative detection of serum free light chain (kappa,lambda) content and calculated the kappa/lambda,and the results were analyzed.Results62 cases of non myeloma kidney disease in patients with chronic sFLC kappa and lambda,kappa / lambda ratio were increased,there were significant differences between the control group and health (P<0.05); 22 cases of sFLC myeloma nephropathy patients with type k kappa and lambda,kappa/lambda ratio compared with the control group,there were significant differences(P<0.05);the results of 12 cases of myeloma nephropathy in patients with type λ sFLC kappa compared with the control group had no significant difference (P>0.05,sFLC).Results of lambda there was significant difference compared with the control group (P<0.05),kappa / lambda ratio decreased,compared with the control group,there was significant difference (P<0.05).In addition,with the CKD stage of development,serum free light chain kappa and lambda was increased,especially in patients with chronic kidney disease Ⅰ,Ⅱ and Ⅲ.In the effect of kidney on serum free light chain lambda is more significant than serum free light chain kappa.ConclusionPolyclonal serum free light chain (sFLC kappa,lambda) level detection,especially the kappa/lambda ratio can reflect the severity of kidney damage,when used in the diagnosis of multiple myeloma disease,can be used as the assessment of kidney injury,improve the accuracy of clinical diagnosis and treatment.In the evaluation of the degree of renal injury in CKD patients also has important clinical significance.

chronic kidney disease;bone marrow tumor nephropathy;serum free light chain;scattering immune turbidity

*通讯作者

1007-4287(2017)12-2087-04

R692

A

余悠悠，女，主管技师，主要从事免疫学项目检验；潘秀军，女，硕士，副主任技师，主要从事免疫医学研究。

2016-09-15)