胡定辉,李鸿雁*,刘尊涛,杜 琎,李 航
(1.南京中医药大学附属中西医结合医院,江苏 南京 210028;2.东南大学附属中大医院,江苏 南京 210009)
经典的大鼠腹腔异位心脏移植模型由Ono等[1]于1969年进行改进并确立模型的基本手术方式,由于其可行性较高,便于移植物观察等优点而被广泛应用于基础研究中。在本实验研究中,我们对Ono心脏移植模型的手术步骤和操作流程进行部分优化和改进,使得该移植模型的建立更加简单、稳定可靠。
本实验经江苏省中医药研究院伦理委员会批准。供者受体均为SD大鼠,均为雄性,体重200~250 g,以及实验用肝素、生理盐水、心肌保护液等药物均由江苏省中医药研究院动物中心提供。
显微手术器械一套,无损伤血管阻断钳、常规手术器械若干,8 mg0 prolene线,纱布、棉签若干,Keeler2.5倍手术放大镜,冷光源手术灯1盏。
大棉球滴有七氟醚2~4 ml,放入4 L的密闭容器内,将大鼠置于其中约2~5 min,待大鼠反应迟钝后取出,予以腹腔内注射氯胺酮(75 mg/kg)。
1.4.1 供心摘取
供体鼠术前禁食6~8 h,不禁水。麻醉后用电子秤称重,取仰卧位固定于手术台上。常规3%碘伏消毒,腹正中切口进腹,显露下腔静脉。经下腔静脉注入125 U/ml肝素钠盐水1 ml,进行全身肝素化。剪开膈肌,剪断两侧肋骨,显露胸腔。打开心包,分离出升主动脉和主肺动脉间隙。用4-0丝线结扎左上腔静脉与左肺根、右上腔静脉与右肺根以及下腔静脉。阻断升主动脉,按25 ml/kg的比例灌注心脏停跳液,至心脏停搏。剪断升主动脉、上下腔静脉,修剪心脏周围组织,取出供心,置入4℃心脏停跳液中保存。……